蛋白質(zhì)電泳及轉(zhuǎn)膜示蹤劑1 mL
- 公司名稱 上海士鋒生物科技有限公司
- 品牌
- 型號
- 產(chǎn)地 美國,德國,澳大利亞,中國
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2016/7/4 15:04:58
- 訪問次數(shù) 1127
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規(guī)格:1 mL
用途:科研試驗
庫存:現(xiàn)貨供應(yīng)
保存條件:低溫避光
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PCR原理
DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在DNA聚合酶的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。在實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,加入設(shè)計引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。
但是,DNA聚合酶在高溫時會失活,因此,每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶,不僅操作煩瑣,而且價格昂貴,制約了PCR技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展。
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大 taq酶[1]量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準備;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合;③引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基互補配對與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈,重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
鄭重承諾:凡是購買公司產(chǎn)品,出現(xiàn)質(zhì)量問題,無條件退貨退款。
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電解錳/電介錳/Manganese SFSF,99.5% 7439-96-5 RT
硫酸錳/硫酸亞錳/一水硫酸亞錳/硫酸錳(II)一水合物/Manganous sulfate monohydrate AR,99% 10034-96-5 RT
SSF
碳酸錳/碳酸亞錳/錳白/碳酸錳(II)/菱錳礦/Manganous SFarbonate SFSF,44-48% 598-62-9 RT
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乙酸錳/醋酸錳/乙酸亞錳/醋酸亞錳/四水合乙酸錳/乙酸錳(II)四水合物/Manganous aSFetate tetrahydrate AR,99% 6156-78-1 RT
/Sodium selenite SFentahydrate SFSF,98% 26970-82-1 RT
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暈苯/六苯并苯/冠/蔻/SForonene 特純,95% 191-07-1 RT
1,3-二溴苯/間二溴苯/1,3-Dibromobenzene BR,96% 108-36-1 RT