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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專(zhuān)用試劑>生化與分子生物學(xué)用試劑>40706ES60 JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒

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40706ES60 JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱(chēng) 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
  • 品牌 Yeasen/翌圣生物
  • 型號(hào) 40706ES60
  • 產(chǎn)地 上海
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2022/11/7 16:05:31
  • 訪問(wèn)次數(shù) 2347

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企業(yè)簡(jiǎn)介

翌圣生物科技(上海)股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化技術(shù)為驅(qū)動(dòng),聚焦生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料,從事分子、蛋白和細(xì)胞三大品類(lèi)生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷(xiāo)售的高新技術(shù)企業(yè),通過(guò)打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開(kāi)發(fā)路徑,成為國(guó)內(nèi)少數(shù)同時(shí)覆蓋三大品類(lèi)生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)?;a(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè),產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域、診斷與檢測(cè)領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。



主營(yíng)業(yè)務(wù)


公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢(shì)和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗(yàn),構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良、類(lèi)型齊全、種類(lèi)豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來(lái),公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售的生物試劑超過(guò)3000種,涵蓋分子、蛋白、細(xì)胞三大品類(lèi)的生物試劑,能夠滿足客戶多種類(lèi)型生物試劑的一體化采購(gòu)需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細(xì)胞分析系列、細(xì)胞培養(yǎng)系列、細(xì)胞轉(zhuǎn)染系列、報(bào)告基因檢測(cè)系列等多個(gè)品類(lèi)的生物試劑,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、診斷檢測(cè)和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。

發(fā)展歷程



榮譽(yù)資質(zhì)


翌圣生物通過(guò)申請(qǐng)商標(biāo)和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力,不斷加強(qiáng)公司品牌建設(shè)。截至2022年3月31日,公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項(xiàng)(其中發(fā)明14項(xiàng)、實(shí)用新型1項(xiàng)、外觀設(shè)計(jì)3項(xiàng))和45項(xiàng)與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán),擁有經(jīng)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局商標(biāo)局核準(zhǔn)的注冊(cè)商標(biāo)權(quán)37項(xiàng)以及4項(xiàng)境外注冊(cè)商標(biāo),是國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專(zhuān)精特新企業(yè)。

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創(chuàng)新平臺(tái)


經(jīng)過(guò)多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗(yàn)的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新,翌圣生物積極開(kāi)展“產(chǎn)學(xué)研”合作,與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的湖北大學(xué)、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點(diǎn)研究基地的江南大學(xué)展開(kāi)合作,優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達(dá)工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù)、生物信息技術(shù)、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生化分析技術(shù)等生命科學(xué)領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ),建立了六大核心技術(shù)平臺(tái)——雙向分子酶理性設(shè)計(jì)與定向進(jìn)化平臺(tái)、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺(tái)、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺(tái)、高通量測(cè)序建庫(kù)試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺(tái)、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺(tái)和mRNA醫(yī)藥應(yīng)用研發(fā)平臺(tái),目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項(xiàng)核心技術(shù),打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開(kāi)發(fā)路徑,覆蓋技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品升級(jí)、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié)。


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工業(yè)化生產(chǎn)


翌圣生物擁有按照準(zhǔn)GMP 標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)運(yùn)營(yíng)的工業(yè)化生產(chǎn)基地,配有噸級(jí)發(fā)酵線、工業(yè)級(jí) AKTA 純化線和全自動(dòng)包裝線。同時(shí),公司通過(guò)了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認(rèn)證,從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉(cāng)儲(chǔ)運(yùn)輸?shù)葘?duì)生產(chǎn)線進(jìn)行360度管理監(jiān)督,保證產(chǎn)品過(guò)程的可控制性及可追溯性,竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。

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客戶服務(wù)


翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時(shí)的響應(yīng)能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務(wù)獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認(rèn)可,為檢測(cè)公司、治療公司、工具類(lèi)公司和科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室提供應(yīng)用于科學(xué)研究、體外診斷、基因測(cè)序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國(guó)科學(xué)院、清華大學(xué)、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、浙江大學(xué)等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關(guān)系,公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國(guó)際頂級(jí)期刊論文發(fā)表中。

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公司企業(yè)文化



使命

幫助客戶創(chuàng)造價(jià)值,讓世界更健康更快樂(lè)

愿景

成為生命科學(xué)工具領(lǐng)域全球Top⑩
具備驅(qū)動(dòng)產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
擁有一支持續(xù)學(xué)習(xí)型的翌圣鐵軍


價(jià)值觀


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翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價(jià)值,讓世界更健康更快樂(lè)”的使命,專(zhuān)注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級(jí),不斷拓展核心技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域,為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務(wù),助力我國(guó)打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時(shí),翌圣生物將進(jìn)一步推進(jìn)國(guó)際化戰(zhàn)略,繼續(xù)布局和拓展海外市場(chǎng),為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻(xiàn)力量。










分子生物學(xué)試劑,細(xì)胞生物學(xué)試劑,免疫學(xué)試劑,蛋白組學(xué)試劑等

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100 tests(6孔板)
貨號(hào) 40706ES60 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)




產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

保存

價(jià)格(元)

JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit  JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒

40706ES60

100 tests(6孔板)

-20℃避光保存

800.00


產(chǎn)品描述

JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit)是一種以JC-1 為熒光探針,快速靈敏地檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測(cè),也是用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的常用方法。

JC-1 是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針,JC-1染料以電勢(shì)依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi)。正常線粒體內(nèi),JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中,產(chǎn)生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不僅可用于定性檢測(cè),因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測(cè),因線粒體的去極化程度可以通過(guò)紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來(lái)衡量。觀察時(shí),只需使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。

線粒體膜電勢(shì)的破壞是細(xì)胞凋亡早期發(fā)生的一個(gè)標(biāo)志性事件。細(xì)胞受到凋亡誘導(dǎo)后線粒體膜電位的變化使得膜的通透性發(fā)生改變。膜通透性的增加,使得線粒體蛋白包括Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸內(nèi)切酶G(EndoG)、凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)等從線粒體基質(zhì)釋放到細(xì)胞漿。釋放伴隨膜電位的*喪失,進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞凋亡酶的級(jí)聯(lián)效應(yīng)。

本試劑盒提供了CCCP 作為誘導(dǎo)線粒體膜電位下降的陽(yáng)性對(duì)照。對(duì)于六孔板中的樣品,本試劑盒共可以檢測(cè)100 個(gè)樣品;對(duì)于12 孔中的樣品,本試劑盒共可以檢測(cè)200 個(gè)樣品。


試劑盒組分


編號(hào)

組分

規(guī)格

保存方法

40706-A

JC-1(200×)

5× 100 μL/管

-20℃避光

40706-B

JC-1染色緩沖液(5×)

80 mL

-20℃避光,也可4℃保存

40706-C

CCCP(50 mM)

20 μL

-20℃避光

40706-D

超純水

90 mL

4℃保存


運(yùn)輸與保存方法

冰袋(wet ice)運(yùn)輸。

-20℃避光保存,盡量避免反復(fù)凍融,有效期一年。超純水和JC-1 染色緩沖液(5×)也可4℃保存。


使用說(shuō)明

1. JC-1 染色工作液的配制

六孔板每孔所需 JC-1 染色工作液的量為1 mL,其他培養(yǎng)器皿的JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5 mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1(200×),按照每50μL JC-1(200×)加入8 mL 超純水的比例稀釋JC-1。劇烈震蕩充分溶解并混勻JC-1。然后再加入2 mL JC-1 染色緩沖液(5×),混勻后即為JC-1 染色工作液。

2. 陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置

把試劑盒中提供的CCCP(50mM)推薦按照1∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至50 μM,處理細(xì)胞20分鐘。隨后按照下述方法裝載JC-1,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常50μM CCCP處理20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定或優(yōu)化體系摸索*條件。

3.  對(duì)于懸浮細(xì)胞

1) 取10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于0.5 mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。

2) 加入0.5 mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20 分鐘。

3) 在孵育期間,按照每1 mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入4 mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。

4) 37℃孵育結(jié)束后,600×g 4℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。

5) 用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌2 次:加入1 mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600×g 4℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入1 mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600×g 4℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。

6) 再用適量JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。

4.  對(duì)于貼壁細(xì)胞

對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果希望采用熒光分光光度計(jì)或流式細(xì)胞儀檢測(cè),可以先收集細(xì)胞,重懸后參考懸浮細(xì)胞的檢測(cè)方法。

1) 對(duì)于六孔板的一個(gè)孔,吸除培養(yǎng)液,根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)如有必要可以用PBS 或其它適當(dāng)溶液洗滌細(xì)胞一次,加入1mL 細(xì)胞培養(yǎng)液。細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含有血清和酚紅。

2) 加入1 mL JC-1 染色工作液,充分混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20 分鐘。

3) 在孵育期間,按照每1 mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入4 mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。

4) 37℃孵育結(jié)束后,吸除上清,用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌2 次。

5) 加入2 mL 細(xì)胞培養(yǎng)液,培養(yǎng)液中可以含有血清和酚紅。

6) 熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡下觀察。

5.  對(duì)于純化的線粒體

1) 把配制好的JC-1 染色工作液再用JC-1 染色緩沖液(1×)稀釋5 倍。

2) 0.9 mL 5 倍稀釋的JC-1 染色工作液中加入0.1 mL 總蛋白量為10~100 μg 純化的線粒體。

3) 用熒光分光光度計(jì)或熒光酶標(biāo)儀檢測(cè):混勻后直接用熒光分光光度計(jì)進(jìn)行時(shí)間掃描(time scan),激發(fā)波長(zhǎng)為485 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為590 nm。如果使用熒光酶標(biāo)儀,激發(fā)波長(zhǎng)不能設(shè)置為485 nm 時(shí),可以在475~520 nm 范圍內(nèi)設(shè)置激發(fā)波長(zhǎng)。另外,也可以參考下面步驟6 中的波長(zhǎng)設(shè)置進(jìn)行熒光檢測(cè)。

4) 用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察:方法同下面的步驟6。

6. 熒光觀測(cè)和結(jié)果分析

檢測(cè) JC-1 單體時(shí)可以把激發(fā)光設(shè)置為490 nm,發(fā)射光設(shè)置為530 nm;

檢測(cè)JC-1 聚合物時(shí),可以把激發(fā)光設(shè)置為525 nm,發(fā)射光設(shè)置為590 nm。

注意:此處測(cè)定熒光時(shí)不必把激發(fā)光和發(fā)射光設(shè)置在最大激發(fā)波長(zhǎng)和最大發(fā)射波長(zhǎng)。如使用熒光顯微鏡觀察,檢測(cè)JC-1聚合物時(shí)可使用常來(lái)檢測(cè)碘化丙啶或者Cy3用的標(biāo)準(zhǔn)帶通濾波器。檢測(cè)JC-1單體可使用常來(lái)檢測(cè)綠色熒光化合物如FITC的標(biāo)準(zhǔn)帶通濾波器。出現(xiàn)綠色熒光說(shuō)明線粒體膜電位下降,并且該細(xì)胞很可能處于細(xì)胞凋亡早期。出現(xiàn)紅色熒光說(shuō)明線粒體膜電位比較正常,細(xì)胞的狀態(tài)也比較正常。

也可以使用雙帶帶通濾波器如FITC/羅丹明, FITC/Texas Red來(lái)同時(shí)檢測(cè)兩種熒光探針。

另外,由于紅色的JC-1信號(hào)淬滅比綠色快,所以用標(biāo)準(zhǔn)帶通濾波器檢測(cè)時(shí)先檢測(cè)紅色熒光并拍照。


注意事項(xiàng)

1)JC-1(200×)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20~25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

2)必須先把JC-1(200×)用試劑盒提供的超純水充分溶解混勻后,才可以加入JC-1染色緩沖液(5×)。不可先配制JC-1染色緩沖液(1×)再加入JC-1(200×),這樣JC-1會(huì)很難充分溶解,會(huì)嚴(yán)重影響后續(xù)的檢測(cè)。

3)裝載完JC-1后用JC-1染色緩沖液(1×)洗滌時(shí),使JC-1染色緩沖液(1×)保持4℃左右,此時(shí)的洗滌效果較好。

4)JC-1探針裝載完并洗滌后盡量在30分鐘內(nèi)完成后續(xù)檢測(cè)。在檢測(cè)前需冰浴保存。

5)請(qǐng)勿把JC-1染色緩沖液(5×)全部配制成JC-1染色緩沖液(1×),本試劑盒使用過(guò)程中需直接使用JC-1染色緩沖液(5×)。

6)如果發(fā)現(xiàn)JC-1染色緩沖液(5×)中有沉淀,必須全部溶解后才能使用,為促進(jìn)溶解可以在37℃加熱。

7)CCCP為線粒體電子傳遞鏈抑制劑,有毒,請(qǐng)注意小心防護(hù)。

8)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
9)本產(chǎn)品僅作科研用途!

HB180709






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