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abs60371 SfiI

參考價(jià)	￥ 280
訂貨量	≥1份

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

公司名稱 愛必信（上海）生物科技有限公司
品牌 absin
型號(hào) abs60371
產(chǎn)地上海
廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
更新時(shí)間 2025/2/7 7:24:19
訪問次數(shù) 1925

產(chǎn)品標(biāo)簽

abs60371 SfiI 分子克隆分子生物學(xué)限制性內(nèi)切酶

在線交流發(fā)送詢價(jià) 進(jìn)入商鋪同類產(chǎn)品

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公司介紹 主營(yíng)產(chǎn)品

愛必信（上海）生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及耗材的高新技術(shù)企業(yè)。公司秉承“為生命科學(xué)創(chuàng)造便利！為客戶創(chuàng)造價(jià)值！為員工創(chuàng)造幸福人生！”的發(fā)展理念，擁有專業(yè)的產(chǎn)品研發(fā)質(zhì)檢團(tuán)隊(duì)、市場(chǎng)營(yíng)銷團(tuán)隊(duì)及*倉儲(chǔ)物流等管理團(tuán)隊(duì)。榮獲2021年度上海市“專精特新”企業(yè)稱號(hào)。

自營(yíng)品牌Absin®，主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品有：生化試劑（常用生化試劑、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用試劑、熒光染料、激動(dòng)劑/抑制劑，植物提取物）、細(xì)胞生物學(xué)（細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品、血清、基質(zhì)膠、添加劑、檢測(cè)試劑盒）、免疫學(xué)產(chǎn)品、分子生物學(xué)產(chǎn)品、實(shí)驗(yàn)室儀器/耗材、產(chǎn)品定制和檢測(cè)服務(wù)。

Absin還提供一些特色產(chǎn)品：霍亂毒素B亞單位（CTB）、雞胚提取物（CEE）、牛腦垂體提取物、呼吸爆發(fā)試劑盒、多色免疫組化試劑盒、 mRNA原料等在業(yè)界深受客戶喜歡。

Absin秉承踏實(shí)，務(wù)實(shí)，求精和不斷創(chuàng)新的精神為中國(guó)科學(xué)家提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，努力打造屬于中國(guó)自己的生物試劑品牌，為廣大科學(xué)家提供更全面更豐富更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

愛科研，必信它(Absin)！Absin努力成為你身邊的科研百寶箱！

展開

生化試劑，分子生物學(xué)試劑，血清，細(xì)胞培養(yǎng)試劑，化學(xué)試劑，免疫學(xué)試劑，耗材，儀器，定制服務(wù)

詳細(xì)信息 在線詢價(jià)

CAS	-	純度	-
分子量	-	分子式	-
供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	100T
貨號(hào)	abs60371	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合
主要用途	-

產(chǎn)品描述

描述

SfiI 快速內(nèi)切酶是一系列經(jīng)過基因工程重組的快速限制性內(nèi)切酶，適用于質(zhì)粒 DNA、PCR 產(chǎn)物或基因組 DNA 等的快速酶切。所有快速內(nèi)切酶在通用的 CutOne 或 CutOne ColorBuffer 中都具有優(yōu)良的活性，能夠在 5~15 分鐘內(nèi)完成酶切。此外，去磷酸化、連接試劑在 CutOne Buffer 中均具有 100% 活性，支持一管化反應(yīng)，提升“酶切 - 修飾 - 連接”的體驗(yàn)。CutOne Color Buffer 包括紅色和黃色示蹤染料，可將產(chǎn)物直接用于凝膠電泳。CutOne Color Buffer 的紅色染料與 2500 bp 雙鏈 DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近；黃色染料與 10 bp雙鏈 DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近。

識(shí)別位點(diǎn)：
5'...G G C C N N N N ↓ N G G C C...3'
3'...C C G G N ↑ N N N N C C G G...5'

建議反應(yīng)條件：
1× CutOne™ 緩沖液；
50℃溫育；
參照“DNA 快速酶切流程”配制反應(yīng)體系。

失活條件：
不可熱失活，請(qǐng)使用酚氯仿抽提或柱純化。

產(chǎn)品組成：

組分	規(guī)格
SfiI	100 μl
10× CutOne Buffer	1 ml
10× CutOne Color Buffer	1 ml

使用方法

使用方法
1、DNA 快速酶切流程
（1）在冰上按如下建議的加樣順序配制反應(yīng)體系：

組分	質(zhì)粒 DNA	PCR 產(chǎn)物	基因組 DNA
ddH2O	15ul	16ul	30ul
10× CutOne Buffer 或 10× CutOne Color Buffer	2ul	3ula	5ul
底物 DNA	2ul (up to 1ug)	10ul (~0.2ug)	10ul (5ug)
SfiI	1ul	1ul	5ul
Total	20ul	30ul	50ul

a. 本體系適用于經(jīng)過純化的 PCR 產(chǎn)物酶切。未純化的 PCR 產(chǎn)物具備一定的離子強(qiáng)度，10× Cutone Buffer 加入量可適當(dāng)減少至 2 μl。但由于 DNA 聚合酶同時(shí)具有外切酶活性，會(huì)影響酶切產(chǎn)物，因此如下一步需進(jìn)行（2）輕柔吸打或輕彈管壁以混勻（切勿渦旋），然后瞬時(shí)離心以收集掛壁液滴；
（3）50℃溫育 15 min（質(zhì)粒），或 15~30 min（PCR 產(chǎn)物），或 30~60 min（基因組 DNA）；
（4）酚氯仿抽提或柱純化（可選）；

（5）如果使用 CutOne Color Buffer 進(jìn)行酶切反應(yīng)，得到的產(chǎn)物可以直接進(jìn)行上樣電泳。

2、雙酶切或多酶切
（1）每種快速內(nèi)切酶的用量為 1 μl，并根據(jù)需要適當(dāng)擴(kuò)大反應(yīng)體系；
（2）所有快速內(nèi)切酶的體積總和不得超過總反應(yīng)體系的 1/10；

（3）如果所用的幾種快速內(nèi)切酶的最適反應(yīng)溫度不同，應(yīng)先以最適溫度低的酶開始酶切，再添加最適溫度較高的酶，在其最適反應(yīng)溫度下進(jìn)行酶切反應(yīng)。

3、適用于質(zhì)粒的擴(kuò)大反應(yīng)體系

DNA	1ug	2ug	3ug	4ug	5ug
SfiI	1ul	2ul	3ul	4ul	5ul
10× CutOne Buffer 或 10× CutOne Color Buffer	2ul	2ul	3ul	4ul	5ul
Total	20ul	20ul	30ul	40ul	50ul

不同 DNA 中的酶切位點(diǎn)數(shù)量

λDNA	ΦX174	pBR322	pUC57	pUC18/19	SV40	M13mp18/19	Adeno2
0	0	0	0	0	1	0	3

甲基化修飾影響

Dam	Dcm	CpG	EcoKI	EcoBI
無影響	剪切受影響	剪切受影響	無影響	無影響

在不同反應(yīng)緩沖液中的活性

CutOne Buffer

Thermo Scientific

FastDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

儲(chǔ)存/保存方法

-20°C 及以下運(yùn)輸及保存，長(zhǎng)期保存建議放 80°C 。有效期2年。

技術(shù)指標(biāo)

質(zhì)量控制：
功能活性檢測(cè)：
50℃下，在 20 μl 通用 CutOne 反應(yīng)體系中，1 μl SfiI 能夠在 15 min 內(nèi)消化 1 μg pEPE DNA。
超長(zhǎng)時(shí)間溫育檢測(cè)：
50℃下，在 20 μl 通用 CutOne 反應(yīng)體系中，將 1 μl SfiI 與 1 μg pEPE DNA 共同溫育 3 h，未檢測(cè)到其他核酸酶污染或星號(hào)活性引起的底物非特異性降解。更長(zhǎng)時(shí)間酶切可能出現(xiàn)星號(hào)活性。
酶切 - 連接 - 再酶切檢測(cè)：
50℃下，使用 10 倍酶量的 SfiI 消化 DNA 底物，回收酶切產(chǎn)物，在 22℃下使用 T4 DNA Ligase (Fast) 可以將超過 95%的酶切產(chǎn)物重新連接。將連接產(chǎn)物再次回收后，使用相同的內(nèi)切酶可以重新切開 95% 以上的連接產(chǎn)物。
非特異性內(nèi)切酶活性檢測(cè)：
50℃下，在 20 μl 通用 CutOne 反應(yīng)體系中將 1 μl SfiI 與 1 μg 超螺旋質(zhì)粒 DNA 共同溫育 4 h 后，使用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，少于 10% 的質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)變成缺刻或線性狀態(tài)。

溫馨提示：本產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用，不支持臨床等研究

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