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abs60210 快速內切酶DpnI

參考價	￥ 800
訂貨量	≥1盒

具體成交價以合同協(xié)議為準

公司名稱 愛必信（上海）生物科技有限公司
品牌 absin
型號 abs60210
產地上海
廠商性質 生產廠家
更新時間 2025/2/8 11:17:35
訪問次數(shù) 2330

產品標簽

分子生物學內切酶內切酶DpnI 試劑

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公司介紹 主營產品

愛必信（上海）生物科技有限公司是一家從事生物學試劑及耗材的高新技術企業(yè)。公司秉承“為生命科學創(chuàng)造便利！為客戶創(chuàng)造價值！為員工創(chuàng)造幸福人生！”的發(fā)展理念，擁有專業(yè)的產品研發(fā)質檢團隊、市場營銷團隊及*倉儲物流等管理團隊。榮獲2021年度上海市“專精特新”企業(yè)稱號。

自營品牌Absin®，主要經營產品有：生化試劑（常用生化試劑、生物學實驗常用試劑、熒光染料、激動劑/抑制劑，植物提取物）、細胞生物學（細胞培養(yǎng)產品、血清、基質膠、添加劑、檢測試劑盒）、免疫學產品、分子生物學產品、實驗室儀器/耗材、產品定制和檢測服務。

Absin還提供一些特色產品：霍亂毒素B亞單位（CTB）、雞胚提取物（CEE）、牛腦垂體提取物、呼吸爆發(fā)試劑盒、多色免疫組化試劑盒、 mRNA原料等在業(yè)界深受客戶喜歡。

Absin秉承踏實，務實，求精和不斷創(chuàng)新的精神為中國科學家提供優(yōu)質產品，努力打造屬于中國自己的生物試劑品牌，為廣大科學家提供更全面更豐富更優(yōu)質的產品。

愛科研，必信它(Absin)！Absin努力成為你身邊的科研百寶箱！

展開

生化試劑，分子生物學試劑，血清，細胞培養(yǎng)試劑，化學試劑，免疫學試劑，耗材，儀器，定制服務

供貨周期	現(xiàn)貨	應用領域	化工,生物產業(yè),能源

愛必信的快速內切酶是一系列經過基因工程重組、能夠在5~15分鐘內精確完成DNA切割的限制性內切酶，適用于質粒DNA、PCR產物或基因組DNA等的快速酶切。愛必信的快速內切酶具有如下特點：5~15分鐘內即可完成酶切；共用一種酶切Buffer，大大簡化酶切反應體系；良好的酶活冗余度，輕松應對底物過量或困難模板酶切。此外，愛必信生物去磷酸化、連接試劑在配套的Buffer中具有100%活性，支持一管化反應，提升“酶切-修飾-連接”的體驗。
識別位點：
5'...G Am6 ↓T C...3'
3'...C T↑ Am6G...5'
同裂酶：MalI
注：同裂酶對于不同的甲基化修飾也許具有不同敏感性。

快速內切酶DpnI產品組分：

名稱	規(guī)格
DpnI	50 μl
10× Cut Buffer	1 ml
10× Cut Color Buffer	1 ml

使用方法

1. 快速內切酶DpnIDNA 快速酶切流程：
① 在冰上按如下建議的加樣順序配制反應體系：

	質粒 DNA	基因組 DNA
ddH2O	15 μl	30 μl
10× Cut Buffer 或 10× Cut Color Buffer	2 μl	5 μl
底物 DNA	2 μl (up to 1 μg)	10 μl (5 μg)
DpnI	1 μl	5 μl
Total	20 μl	50 μl

② 輕柔吸打或輕彈管壁以混勻（切勿渦旋），然后瞬時離心以收集掛壁液滴；
③ 37℃溫育 15 min（質粒），或 30~60 min（基因組 DNA）；
④ 80℃溫育 20 min 即可使酶失活，停止反應（可選）。
2. 雙酶切或多酶切：
① 每種快速內切酶的用量為 1 μl，并根據(jù)需要適當擴大反應體系；
② 所有快速內切酶的體積總和不得超過總反應體系的 1/10；
③ 如果所用的幾種快速內切酶的最適反應溫度不同，應先以最適溫度低的酶開始酶切，再添加最適溫度較高的酶，在其最適反應溫度下進行酶切反應。
3. 適用于質粒的擴大反應體系：

DNA	1 μg	2 μg	3μg	4 μg	5 μg
DpnI	1 μl	2μl	3 μl	4 μl	5 μl
10× Cut Buffer 或 10× Cut Color Buffer	2 μl	2 μl	3 μl	4 μl	5 μl
Total	20 μl	20 μl	30 μl	40 μl	50 μl

注：如果總反應體系大于 20 μl，應適當增加溫育時間，盡量使用水浴、金屬浴或沙浴。
不同 DNA 中的酶切位點數(shù)量：

λDNA	ΦX174	pBR322	pUC57	pUC18/19	SV40	M13mp18/19	Adeno2
116	0	22	15	15	8	7	87

甲基化修飾影響：

Dam	Dcm	CpG	EcoKI	EcoBI
不能切割Dam-DNA	無影響	無影響	無影響	序列可能重疊剪切可能受影響

在不同反應緩沖液中的活性：

	Cut Buffer	Thermo Scientific FastDigest Buffer	NEB CutSmart® Buffer	Takara QuickCut™ Buffer
活性	100%	100%	100%	100%

儲存/保存方法

-20℃，有效期2年。

技術指標

建議反應條件：
1× Cut 緩沖液；
37℃溫育；
參照“DNA 快速酶切流程”配制反應體系。
失活條件：
80℃溫育 20 min。
質量控制：
功能活性檢測：
最適反應溫度下，在 20 μl 反應體系中，1 μl DpnI能夠在 15 min 內*消化 1 μg pUC19 DNA。
超長時間溫育檢測：
最適反應溫度下，將 1 μl DpnI 與 1 μg pUC19 DNA共同溫育 3 h，未檢測到其他核酸酶污染或星號活性引起的底物非特異性降解，延時酶切可能出現(xiàn)星號活性。
酶切 - 連接 - 再酶切檢測：
最適反應溫度下，使用 1 μl DpnI 消化底物，回收酶切產物。在 22℃下使用適量 Fast T4 DNA Ligase 可以將酶切產物重新連接。將連接產物再次回收后，使用相同的內切酶可以重新切開連接產物。
非特異性內切酶活性檢測：
最適反應溫度下，將 1 μl DpnI 與 1 μg 超螺旋質粒DNA 共同溫育 4 h，使用瓊脂糖凝膠電泳檢測，質粒 DNA 仍然處于超螺旋狀態(tài)。

溫馨提示：本產品僅作科研實驗使用，不支持臨床等研究

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