大鼠elisa 大鼠血清組蛋白脫乙酰基酶6（HDAC6）檢測(cè)elisa

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ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。實(shí)驗(yàn)新手講解自己的ELISA操作流程，您沒(méi)見(jiàn)過(guò)吧，本章就由我司一個(gè)客戶朋友親身講講他自己的實(shí)驗(yàn)經(jīng)歷。讓我們一起閱讀！給師弟科普ELISA基本步驟。與其寫(xiě)個(gè)文檔，不如直接寫(xiě)帖子，反正工作量一樣。我自己做ELISA也只是初學(xué)者，所以說(shuō)得不對(duì)的地方，請(qǐng)大家多多指正。ELISA有白底（上圖，不可拆）和黑空板子（可拆，8個(gè)一排，12排）。用吸光度（一般是450nm的OD值）來(lái)檢測(cè)，就只能用白底的板子。黑底的板子可以用Lumin讀數(shù)。步，拿到板子，還有封蓋膜。第二步：用100ul包被抗體，包被好板子之后，輕彈混勻。將封蓋膜的白色撕去，用透明有粘性的膜，貼在板子上，把膜壓緊（貼膜是為了防止液體揮發(fā)，所以一定要把每孔黏牢）。室溫孵育過(guò)夜。注意事項(xiàng)：1.如果一次只做一部分孔，貼膜可以剪刀剪開(kāi)，只用一部分。保證膜可以把加液后的孔蓋住就可以。2.加樣時(shí)候，一定要保證每孔加樣量*一樣。避免因?yàn)椴僮髟颍靠滓后w量有區(qū)別。ELISA比較敏感，操作誤差會(huì)導(dǎo)致zui后讀數(shù)有不小的差別。3.加的樣，保證樣品加在孔底，不要粘在管壁上，減少孔與孔之間的差異。第二天早上，來(lái)洗掉包被液。

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