大鼠elisa 大鼠血清溶菌酶（LZM）檢測elisa

大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa北京方程生物公司現(xiàn)貨供應(yīng)

本試劑僅供研究使用 目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa的含量。
實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa水平。用純化的大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入 大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa ，再與 HRP標(biāo)記的大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa呈正相關(guān)。 用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度 （OD值） ，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa濃度。

 

一、操作因素對ELISA結(jié)果的影響ELISA操作步驟復(fù)雜，操作不當(dāng)將引起較大的誤差。以下敘述各個步驟中的影響因素。1.加樣2.溫育3.洗滌4.顯色5.比色二、灰區(qū)的設(shè)置通常情況下，ELISA定性實(shí)驗(yàn)以"陽性"和"陰性"來報告結(jié)果，兩者間有一條分界線被稱為"陽性判斷值"（cut-off value，CO值），這是定性免疫測定結(jié)果報告的依據(jù)。三、標(biāo)本復(fù)查ELISA手工檢測過程復(fù)雜，影響因素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異，因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法，比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標(biāo)本及少見模式的檢測結(jié)果進(jìn)行復(fù)查。四、結(jié)果判斷和報告常用下列幾種方法表示結(jié)果：1.定性測定2.半定量測定 結(jié)果一般以滴度表示。3.定量測定 即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

 

1. 每個標(biāo)準(zhǔn)品的OD值減去空白孔的OD值后作圖，如設(shè)置復(fù)孔，則應(yīng)取其平均值計算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。2. *使用專業(yè)的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù)。亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。3. 若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限，應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測，計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。 特異性：無明顯交叉反應(yīng)。由于受到技術(shù)及樣本來源的限制，不可能完成對所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測，因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)?；厥章剩悍謩e于定值血清及血漿樣本中加入一定量的小鼠白介素1β (IL-1β)（加標(biāo)樣品），重復(fù)測定并計算其均值，回收率為測定值與理論值的比率。 線性：在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的小鼠白介素1β (IL-1β)，并倍比稀釋成 1:2，1:4，1:8，1:16 的待測樣本，線性范圍即為稀釋后樣本中小鼠白介素1β (IL-1β)含量的測定值與理論值的比率。 小鼠白介素1β (IL-1β)酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒精密度：精密度用樣品測定值的變異系數(shù) CV 表示。CV(%) = SD/mean×100批內(nèi)差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定 20 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及 SD 值。

 

 樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固 10-20 分鐘，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用 PBS（PH7.2-7.4）稀釋胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬/ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?br />用。標(biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4） ，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

 

大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa

腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測elisa

乳過氧化物酶(LPO)檢測elisa

組蛋白H2B(H2B)檢測elisa

白介素25(IL25)檢測elisa

尿調(diào)蛋白(UMOD)檢測elisa

細(xì)胞骨架關(guān)聯(lián)蛋白2樣蛋白(CKAP2L)檢測elisa

松弛肽3(RLN3)檢測elisa

WNT抑制因子1(WIF1)檢測elisa

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)檢測elisa

單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)檢測elisa