小鼠糖皮質類固醇受體（GR）ELISA試劑盒

產(chǎn)品名稱：小鼠糖皮質類固醇受體(GR)ELISA試劑盒

檢測方法： ELISA酶聯(lián)免疫法
測試種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
保存條件：2~8℃，*溫度6攝氏度，有效期6個月。
產(chǎn)品產(chǎn)地：進口/國產(chǎn)
產(chǎn)品庫存：現(xiàn)貨供應
產(chǎn)品性狀：48T/96T，盒裝液體
品牌：琛藝酶科/進口原裝
檢測波長：450nm
低檢測限：歡迎咨詢索取原版說明書
研究領域：炎癥研究、神經(jīng)生物學、新陳代謝、信號通路、免疫學。
注意要點：僅供科研實驗，不得用于其他用途。

elisa試劑盒組成：

注：標準品濃度依次為：120、60、30、15、7.5、0 pg/mL.

小鼠糖皮質類固醇受體(GR)ELISA試劑盒樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應分別小于10%和15% 。

檢測范圍：                                              

3.75 pg/mL - 120 pg/mL 

靈敏度：                                              

低檢測濃度小于0.1 pg/mL

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存： 2-8℃。

2．有效期： 6個月

　　【貨號】  

　　【品牌】 琛藝酶科

　　【規(guī)格】 48T/96T

　　【單位】 盒

　　【價格】 電議

　樣品收集:

1.血清：全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應為一次性的無熱原，無內毒素試管。
2.血漿：抗凝劑推薦使用EDTA或肝素，樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂樣品。
3.組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4.細胞培養(yǎng)上清：取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質及細胞碎片。取上清檢測。
5.其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測
6.樣品應清澈透明，懸浮物應離心去除。
7.樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個月內檢測)，或-80℃（6個月內檢測），避免反復凍融。
結果判斷:
1. 以標準品的濃度為橫坐標， OD值為縱坐標， 繪制標準曲線。 如有設置復孔，則應取其平均值計算。 以標準品的濃度為橫坐標， OD值為縱坐標，繪出標準曲線。亦可以OD值為橫坐標，標準品的濃度為縱坐標，繪出標準曲線。
2. 推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值，由標準曲線查出相應的濃度，乘以稀釋倍數(shù)；亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。 1478. 若樣品OD值高于標準曲線上限，應適當稀釋后重測，計算濃度時應乘以稀釋倍數(shù)。

9.為什么有的試劑盒是采用競爭ELISA法？

小分子抗原或半抗原因為缺乏可作夾心法的兩個以上的位點，因此不能用雙抗體夾心法進行測定，可以采用競爭法。其原理是標本中的抗原和固相載體上的抗原競爭生物素化抗體上的結合位點，標本中抗原量含量愈多，結合在固相上的生物素化抗體愈少，高的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素等ELISA測定多用此法。

 ELISA試劑盒使用說明書操作流程：
稀釋——加樣——溫育——配液——洗滌——加酶——溫育——洗滌——顯色——終止——測定
1.有質量問題免費包換，合同上注明了的（質量問題包括運輸不當，客戶在使用過程中測不出結果，等等！）
2.全程技術指導.（包括售前的標本收集，使用過程中不明白的地方，實驗結束后的數(shù)據(jù)分析，有任何疑問，我們技術都會即時給你去電）
3.提供免費代測的服務。（你只需把標本寄過來，我們?yōu)槟愎?jié)省時間，幫你出結果，原始數(shù)據(jù)，分析數(shù)據(jù)均可提供，一般時間是5天左右）
4.客戶有任何問題，我們都是在一個工作日之內給出解決方案。售后和技術這一塊都是竭誠為客戶服務！
為什么實驗過程中孵育、洗滌需要振蕩、如何振蕩。
振蕩孵育使反應更充分，振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標96孔微孔板振蕩器。
孵育過程振蕩，可以加快、加強抗原抗體分子間的相互碰撞接觸，使得反應過程更加*，OD值通常會比未振蕩孵育的結果要高；洗滌過程振蕩，可以使洗板更干凈，在很大程度上能降低背景值，同時可以提高試劑盒檢測的靈敏度，具體操作請參見說明書。