人β葡糖苷酶（glucosidase）ELISA試劑盒

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中人β內酰胺酶(β-lactamase)的含量。

l  有效期：6個月

l  保存條件：2-8℃

人β葡糖苷酶(glucosidase)ELISA試劑盒廠家實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人β內酰胺酶(β-lactamase)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人β內酰胺酶(β-lactamase)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

人β葡糖苷酶(glucosidase)ELISA試劑盒廠家樣本處理及要求

1.  血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2.  血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會影響后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

需要而未提供的試劑和器材

1.     酶標儀（450nm）

2.     高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.     37℃恒溫箱

4.     蒸餾水或去離子水

人ELISA試劑盒使用說明書

科研ELISA試劑盒標本的采納和保存
可用作科研ELISA試劑盒測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其間某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同即是血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清天然凝結、xue塊縮短后即可獲得。除特殊情況外，在醫(yī)學查驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等使用。血清標本可按慣例方法收集，應留心防止溶血，紅細胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標本或許會增加非特異性顯色。

血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中或許含有內源性HRP，也會發(fā)生假陽性反應。如在冰箱中保存過久，其間的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超越一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解后，蛋白質部分濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩?；鞚峄蛴谐练e的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價下跌，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少數分裝冰存。保存血清自收集時就應留心無菌操縱，也可加進適當防腐劑。

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

實驗結果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。

試劑盒性能

1.  特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

2.  重復性：板內變異系數小于10% ，板間變異系數小于15% 。

注釋：本公司所有產品僅用于科研，不得用于臨床。