XSL0017 Goldner三色法染色

Goldner三色法染色

骨染色方法有很多種，例如甲苯胺藍(lán)法、阿利新藍(lán)法、番紅O法、Goldner三色染色法等。Goldner三色染色又稱戈德納三色染色，與Masson三色染色類似，三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。 Goldner三色染色液染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)：分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。該染液多用于骨類物質(zhì)的染色，對細(xì)胞染 色效果較好，尤其適用于代謝性疾病(Paget病、骨性營養(yǎng)不良等)的研究，以評估成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的活性，并容易辨認(rèn)骨髓中的轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞。

【自備材料】

1、系列乙醇

2、蒸餾水

【使用方法】

1、切片二甲苯脫蠟或脫塑料，乙醇漂洗，入水。

2、入配制好的Weigert鐵蘇木素染色20～30min。

3、流水沖洗1min，用酸性分化液迅速分化(一般＜5s)。

4、流水沖洗5min，蒸餾水稍洗。

5、入Acid Ponceau染色液染色5min。

6、在上述過程中按蒸餾水:弱酸溶液=4:1比例配制弱酸工作液，用弱酸工作液洗15～30s。

7、入Orange G染色液染色，直至Ponceau染色液，一般需要3～10min。

8、用配制好的弱酸工作液沖洗15～30s。

9、直接入亮綠染色液中染色5min。

10、用配制好的弱酸工作液沖洗3次，每次15s。

11、蒸餾水沖洗，吸干或晾干，無水乙醇快速脫水，中性樹膠封固。

【染色結(jié)果】

礦化骨 綠色 類骨質(zhì) 橙色-紅色 軟骨 紫色 細(xì)胞核 藍(lán)色-灰色

【注意事項(xiàng)】

1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。固定起著重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。

2、取A1、A2等量混合即為Weigert鐵蘇木素染液，一般24h失去染色力。

3、酸性分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。

4、弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可自行配制0.1～1%乙酸溶液予以替代。

5、Orange G染色液染色時(shí)在鏡下控制，以麗春紅脫去為準(zhǔn)。

Goldner三色法染色

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