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IML-004 22RV1-LUC-BSD(人前列腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記(STR鑒定正確))
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱(chēng) 上海淳麥生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào) IML-004
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2023/11/24 22:14:48
- 訪問(wèn)次數(shù) 92
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胎牛血清,細(xì)胞株,原代細(xì)胞,耐藥細(xì)胞,LUC細(xì)胞,標(biāo)記細(xì)胞,大鼠細(xì)胞,小鼠細(xì)胞,ELISA試劑盒,感受態(tài)細(xì)胞,
一、細(xì)胞基本屬性 | ||||
細(xì)胞名稱(chēng) | 22RV1-LUC-BSD(人前列腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記)(STR鑒定正確) | |||
細(xì)胞別稱(chēng) | 22RV1-LUC-BSD;人前列腺癌細(xì)胞-LUC-BSD;人前列腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記 | |||
種屬來(lái)源 | 人 | |||
組織來(lái)源 | 前列腺 | |||
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) | |||
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | |||
細(xì)胞代數(shù) | 10代以?xún)?nèi) | |||
puro藥篩濃度 | 22RV1-LUC-BSD細(xì)胞puro藥篩濃度為1.0ug/ml,培養(yǎng)過(guò)程中可不用再添加puro,如若擔(dān)心抗性隨著傳代時(shí)間降低,可定期用0.5ug/ml濃度puro維持, 22RV1-LUC-BSD細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)都較慢,傳代或消化處理后,48h內(nèi)不要移動(dòng),以免影響細(xì)胞貼壁 | |||
背景說(shuō)明 | Luciferase 22RV1細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲(chóng)熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時(shí)不需要添加抗生素維持??捎米魑灮鹣x(chóng)熒光素酶活性檢測(cè)中的陽(yáng)性對(duì)照,也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。 該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。 前列腺癌細(xì)胞,該細(xì)胞能產(chǎn)生逆轉(zhuǎn)錄病毒需要在生物安全等級(jí)2級(jí)的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中操作細(xì)胞。22RV1細(xì)胞表達(dá)前列腺特異抗原PSA。二羥基睪丸脂酮可輕微刺激細(xì)胞生長(zhǎng),經(jīng)western blot檢測(cè)溶解產(chǎn)物與雄激素受體抗體起免疫反應(yīng)。EGF可刺激細(xì)胞生長(zhǎng),但TGF-β1不能抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。近期證實(shí)22RV1可生產(chǎn)高滴度的人逆轉(zhuǎn)錄病毒XMRV。在裸鼠體內(nèi)可成瘤。 | |||
Luciferase活性檢測(cè) | 22RV1-LUC-BSD Luciferase檢測(cè)報(bào)告下載 | |||
Luc成像文獻(xiàn) | 22RV1-LUC活體成像參考文獻(xiàn)1 22RV1-LUC活體成像參考文獻(xiàn)2 22RV1-LUC活體成像參考文獻(xiàn)3 | |||
STR鑒定位點(diǎn) | ||||
生物安全等級(jí) | 2 | |||
細(xì)胞規(guī)格 | 1x10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 | |||
支原體檢測(cè) | 無(wú) | |||
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-2505 BCRC; 60545 DSMZ; ACC-438 | |||
培養(yǎng)基 | 90%DMEM+10% FBS+PS | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ | |||
凍存條件 | 無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 | |||
細(xì)胞貨期 | 2周左右 | |||
運(yùn)輸方式 | 復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞 | |||
供應(yīng)限制 | 于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
特別說(shuō)明 | 以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主 | |||
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 | ||
收貨處理 | 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) | 收到細(xì)胞后,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇 | ||
傳代密度 | 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) | 第三天換液并檢查細(xì)胞密度 | ||
傳代比例 | 傳代建議1:2傳代 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿 | 一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 | ||
傳代方法 | a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-5 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 | 將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心5 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。 | ||
注意事項(xiàng) | 1.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 2.因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。 | 1.收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存; 2.為保證細(xì)胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請(qǐng)立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。 | ||
到貨須知 | 1.收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。 2.靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請(qǐng)拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。 3.由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。 4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。 | |||
備注:客戶(hù)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,有任何技術(shù)問(wèn)題可以技術(shù)服務(wù)電話(huà): 按 2,我們隨時(shí)給予解答。 | ||||
三、細(xì)胞凍存操作 | ||||
凍存液配方 | 無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 | |||
細(xì)胞密度 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例 | |||
凍存方法 | a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。 b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 | |||
注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 | |||
四、售后服務(wù) | ||||
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn) | 1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā); 2.收到細(xì)胞未開(kāi)封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā); 3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問(wèn)題,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時(shí)并且未開(kāi)封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 6.細(xì)胞活性問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 7.視具體情況而定。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶(hù)操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā); 2.客戶(hù)嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā); 5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題的,不重發(fā); 6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問(wèn)題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,不重發(fā); 7.視具體情況而定。 |
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