BB-461752 真菌過氧亞硝基陰離子（ONOO–檢測-紅色

試劑準備：
根據(jù)樣本數(shù)量，用純水將O08探針10倍稀釋。充分混勻，備用。

樣本處理：
1. 剛?cè)〉玫男迈r組織樣本用PBS洗凈。
2. 準確稱取50 mg或100 mg組織樣本，加入500 μl-1 ml勻漿緩沖液A，用勻漿機/勻漿器充分勻漿。
3. 在100×g，4℃離心5分鐘，取上清備用。

樣本檢測：
1. 在96孔板中加入190微升勻漿上清液、10微升O08探針，用移液器吹打，使之充分混勻。
2. 在37℃避光孵育20-30分鐘。
3. 置于酶標儀中，激發(fā)波長為488-535 nm、發(fā)射波長606 nm檢測熒光強度。

蛋白定量：
1. 另取50微升上清勻漿液，用PBS大約稀釋30倍。
2. 取100微升進行蛋白定量。

結(jié)果處理：
以熒光強度（RFU）/蛋白濃度（毫克蛋白）表示組織活性氧強度。