HTRF CAMP GS DYNAMIC KIT

分析原理：
cAMP 試劑盒基于一種競爭形式，涉及用穴狀化合物（供體）標(biāo)記的特異性抗體和與 d2 偶聯(lián)的 cAMP（受體）。這使得能夠直接表征作用于貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞中 Gs 蛋白偶聯(lián)受體的所有類型化合物。細(xì)胞產(chǎn)生的天然 cAMP 與 d2 標(biāo)記的 cAMP 競爭結(jié)合單克隆抗 cAMP Eu3?穴狀化合物。

分析方案：
該方案簡單直接，僅需兩個(gè)孵育步驟：

通過目標(biāo)化合物刺激細(xì)胞。

使用 HTRF 試劑檢測 cAMP。

分析細(xì)節(jié)：
cAMP Gs 動(dòng)態(tài)產(chǎn)品規(guī)格：
使用這個(gè)優(yōu)化的試劑盒來研究戰(zhàn)性和珍貴的細(xì)胞模型。該試劑盒設(shè)計(jì)為以最少的細(xì)胞消耗產(chǎn)生結(jié)果，具有的納摩爾級(jí) IC50。
左移的 IC50 使你能夠定量更低的 cAMP 濃度，顯著減少所需的細(xì)胞數(shù)量。

分析驗(yàn)證：

激動(dòng)劑劑量反應(yīng)驗(yàn)證：
表達(dá)內(nèi)源性 β2 腎上腺素能受體的 HEK293 細(xì)胞用異丙腎上腺素激動(dòng)劑處理 45 分鐘。異丙腎上腺素特征明確，顯示出與文獻(xiàn)良好相關(guān)的正確效力。

拮抗劑劑量反應(yīng)驗(yàn)證：
以 7500 個(gè)細(xì)胞 / 孔的密度（位于試劑盒動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)的最佳細(xì)胞濃度）的 HEK293 細(xì)胞用一系列濃度的異丙腎上腺素（β2 腎上腺素能受體激動(dòng)劑）處理。確定 EC80 - EC90 以選擇用于拮抗劑模式實(shí)驗(yàn)的最佳激動(dòng)劑濃度。擬合拮抗劑的系列稀釋可以計(jì)算化合物的 IC50（效力），這與文獻(xiàn)相關(guān)。