HTRF HUMAN IFN G KIT

產(chǎn)品規(guī)格：

檢測點數(shù)：500/10000。

檢測目標(biāo)類型：試劑盒。

檢測技術(shù)：均相時間分辨熒光（HTRF）。

品牌：HTRF。

數(shù)量：1。

運輸條件：干冰運輸。

治療領(lǐng)域：腫瘤與炎癥。

規(guī)格尺寸：500/10000 檢測點數(shù)。

分析原理：

將細(xì)胞上清液、樣本或標(biāo)準(zhǔn)品直接分配到檢測板中，通過 HTRF 試劑（384 孔低體積白色板或 Cisbio 低體積 96 孔板，20µL）進(jìn)行檢測。用 HTRF 供體和受體標(biāo)記的抗體預(yù)先混合，并在一個分配步驟中加入，以進(jìn)一步簡化檢測程序。只需按比例調(diào)整每次添加的體積，該檢測就可以擴(kuò)展到 1536 孔格式。

分析數(shù)據(jù)：

四參數(shù)邏輯（4PL）曲線通常被推薦用于擬合酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）標(biāo)準(zhǔn)曲線。與線性分析相比，這種回歸能夠在更寬的濃度范圍內(nèi)準(zhǔn)確測量未知樣本，使其非常適合用于分析細(xì)胞因子釋放等生物系統(tǒng)。

分析細(xì)節(jié)：

人 IFN gamma 試劑盒的技術(shù)規(guī)格：

樣本量：16µL。

最終檢測體積：20µL。

試劑盒組成：凍干標(biāo)準(zhǔn)品、冷凍檢測抗體、緩沖液和方案。

檢測限和定量限（在稀釋液中）：14pg/mL 和 21pg/mL。

范圍：21 – 4000pg/mL。

出結(jié)果時間：室溫下過夜。

校準(zhǔn)：NIBSC（82/587）值（IU/mL）= 0.019×HTRF 人 IFNγ 值（pg/mL）。

物種：僅人類。

分析性能：

批內(nèi)和批間：

批內(nèi)（n = 24）：對 3 個樣本中的每個樣本進(jìn)行了 24 次測量，并計算每個樣本的變異系數(shù)（% CV）。

批間（n = 4）：在 4 個不同的實驗中對每個樣本進(jìn)行測量，并計算每個樣本的變異系數(shù)（% CV）。

稀釋線性：從這些實驗中獲得的出色的回收率百分比顯示了該檢測的良好線性。

加標(biāo)回收：將相同量的重組細(xì)胞因子添加到 2 個不同的血清樣本中，并將從標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得的一組響應(yīng)與計算的預(yù)期值進(jìn)行比較。觀察到的約 100% 的回收率驗證了用于該檢測的樣本基質(zhì)。

分析驗證：

用佛波酯（PMA）和離子霉素刺激的外周血單個核細(xì)胞（PBMC）中的 IFNγ 分泌：將 PBMC 以 50、100、200 和 400 千個細(xì)胞 / 孔的密度接種，用添加到 500ng/mL 離子霉素溶液中的不斷增加濃度的 PMA（0、1、50ng/mL）刺激 3 小時。然后將 16µL 上清液轉(zhuǎn)移到白色檢測板（384 孔，低體積）中，用人 IFNγ 檢測試劑盒進(jìn)行分析。