番紅O固綠染色實驗技巧

番紅O固綠染色實驗服務(wù)

番紅0固綠染色服務(wù)介紹

番紅0固綠染色(軟骨)在涉及關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨的形態(tài)學(xué)研究中，常需要聯(lián)合使用多種染料以顯示其組織學(xué)結(jié)構(gòu)。中,起源于上世紀60年代的番紅0 (safranin 0) -固綠(fast green)染色因可以直觀反映關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下骨和骨組織結(jié)構(gòu)而備受青睞。軟骨呈紅色，成骨呈綠色。

番紅0固綠染色實驗意義

番紅0固綠染色染色是針對軟骨及植物進行染色的方法，此方法簡易，節(jié)約時間、用具器皿及藥品，染色清晰。

實驗步驟:

1軟骨染色步驟:

①骨組織固定、脫鈣,制成石蠟切片。

②切片常規(guī)脫蠟至水。

③入新鮮配制的weigert染液染色。

④流水沖洗。

⑤酸性乙醇分化液分化。

⑥蒸餾水洗。

⑦在固綠染色液內(nèi)浸染。

⑧蒸餾水洗。

⑨入番紅0染液內(nèi)浸染。

（10）蒸餾水洗。

（11）用乙酸溶液洗滌切片，以便去除殘留的固綠，再用蒸餾水洗。

（12）分別用95%乙醇、無水乙醇脫水。

（13）二甲苯透明，中性樹脂封固。

（14）鏡檢。

2.植物染色步驟:

①標本的處理:固定，切成石蠟切片。

②粘片。

③脫蠟:二甲苯-50%二甲苯+50%乙醇- -100%乙醇- -95%乙醇- -85%乙醇- -70%乙醇- -50%乙醇- -30%乙醇- -水。

④入番紅0染色液染色。

⑤酸性乙醇分化液分化15s。

⑥脫色: 35%乙醇- -50%乙醇- -70%乙醇- -80%乙醇。

⑦水洗1min。

⑧入固綠染色液內(nèi)浸染，蒸餾水洗1min。

⑨無水乙醇脫水3-5min,無水乙醇脫水，50%二 甲苯+50%乙醇透明5min,二甲苯5min。

（10）樹脂封固。

染色結(jié)果:

(1)軟骨染色結(jié)果:

軟骨基質(zhì)深紅色:軟骨細胞核藍色;細胞漿、肌肉、膠原纖維及骨組織呈灰綠色。

(2)植物染色結(jié)果:

木質(zhì)化、木栓化的細胞壁染成紅色;纖維素細胞壁染成綠色:導(dǎo)管染成紅色，篩管染成綠色。

實驗技巧5:

(1)軟骨染色:

固綠與膠原纖維結(jié)合,不宜褪色，番紅o-固綠染色的分化很關(guān)鍵，分化過度容易導(dǎo)致切片不著色，分化不足易導(dǎo)致切片著色

過深。

(2)植物染色:

番紅染色后，在50%乙醇中脫色需經(jīng)實踐,如果脫色不夠綠色會不好染;脫色過度會導(dǎo)致紅色過淡,甚至全部綠色。