目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>蛋白含量測定系列>> BC3185-100T/96S雙縮脲法蛋白含量測定試劑盒 微量法
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
貨號 | BC3185 | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 測定意義:樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食 |
雙縮脲法蛋白含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號: BC3185
規(guī)格: 100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 自備 | - |
試劑一 | 液體20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品 | 液體1 mL×1支,5 mg/mL | -20℃保存 |
溶液的配制:
提取液:自備。根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水。
產(chǎn)品說明:
樣本可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。
強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物;紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關,故可用來測定蛋白質(zhì)含量。該方法適用于蛋白質(zhì)濃度高的樣本,尤其是動物材料。
技術指標:
低檢出限:0.1718 mg/mL
線性范圍:0.25-12 mg/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、離心機、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
1、液體樣本:澄清無色液體樣本可以直接測定。
2、組織樣本:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)冰浴勻漿,10000rpm,4℃離心10min,取上清,即待測液。(動物樣本常常需要稀釋)
3、細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
二、測定步驟
分光光度計/酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到540nm,蒸餾水調(diào)零。
空白管:取0.5mL EP管,加入40μL蒸餾水,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540nm比色,記為A空白管。
標準管:取0.5mL EP管,加入40μL標準液,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540nm比色,記為A標準管。
測定管:取0.5mL EP管,加入40μL待測液,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540nm比色,記為A測定管。
注意:空白管和標準管只需測定1-2次。
注意事項:
樣本蛋白濃度須在0.25~12mg/mL范圍內(nèi),低于0.25mg/mL不能用此法,高于12mg/mL須做相應稀釋。因此測定前用1~2個樣做預實驗,確保蛋白濃度在0.25~12mg/mL范圍內(nèi)。
如果吸光值大于0.44,則需要將樣本用蒸餾水稀釋后再測定。
待測樣本蛋白提取可用生理鹽水、雙蒸水或不含蛋白的PBS提取。該法受硫酸銨、Tris緩沖液干擾,提取液中應不含這些物質(zhì);否則改用BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。
雙縮脲法蛋白含量測定試劑盒 微量法 雙縮脲法蛋白含量測定試劑盒 微量法