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BGC-823人胃腺癌細(xì)胞(低分化)

時(shí)間:2015-3-25閱讀:1493
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  細(xì)胞信息表


細(xì)胞名稱       BGC-823人胃腺癌細(xì)胞(低分化)

種屬            人

組織來源          胃癌

生長狀態(tài)          上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)條件          培養(yǎng)基類型:DMEM培養(yǎng)基

             FBS:10%

             抗生素:雙抗

             培養(yǎng)條件:37℃,CO2:5%


傳代方法  

收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài):如果沒長滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮

培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已經(jīng)長滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

貼壁細(xì)胞傳代方法

1.棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

2.加1ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化,待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

懸浮細(xì)胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。

1.直接傳代是讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3,吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

2.離心法傳代是將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),1000rpm,5分鐘,去除上清,加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。一般沒有特殊說明,細(xì)胞一般是一傳二。


凍存方法     70%*培養(yǎng)基,20%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

             儲存:液氮中長期保存。

注           1.觀察細(xì)胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。

             2.在運(yùn)輸過程中可能會導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

             3.收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等,請?jiān)谝恢軆?nèi)與我們。


實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

 



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