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28

2013年
08月

*--上海不銹鋼試管帽

上海寶葉生物科技有限公司為開學慶祝及為感謝新老客戶長期對我公司的支持,我司特舉行*活動,本公司不銹鋼試管帽長期銷售,各種規(guī)格:13#15#18#,歡迎新老客戶!!新的一學期又開始了希望所有同學們在新的學期里努力學習,為自己的夢想加油吧!
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23

2013年
04月

自身抗體-抗細胞因子抗體

1.致病作用抗細胞因子抗體的致病性尚未清楚,然而上述自身抗體的Fab片段具有特異性低、高親和力結合相應細胞因子的能力。實際上,在正常人血清中抗IL-la,IL-6的自身抗體是其惟一且重要的結合蛋白。雖然目前對血清中的IgG能夠進行分類檢測,但IFNα、IL10的自身抗體卻無法檢測到??赡艿脑蚴亲陨砜贵w與其相應的細胞因子以免疫復合物的形成存在于血清中,或者是血清中存在某種抑制因子。欲將復合物中的抗原、抗體分開,因抗體的高親和力而不易達到目的。至今仍未明白針對這些細胞因子的高親和力的自身抗體為什么
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16

2013年
03月

利用血清篩選噬菌體文庫交叉抑制實驗

[器材和試劑]●多孔板(ImmunoplateMaxisorp,Nuno)●TBS●PEG—純化噬菌體●PBST●封閉液(含5%脫脂牛奶,0.05%Tween—20,0.02%NaN3的PBS)●XLl—Blue細菌提取物●堿性磷酸酶標記的羊抗人IgG(Fc特異性)抗體(Sigma)●底物緩沖液(10%二乙醇胺,0.5mmmol/LMg-2,0.05%NaN3,用HCl調節(jié)至pH9.8)●顯色液(在底物緩沖液中加1mg/mlp硝基苯磷酸)●自動酶標儀[方法]1.將100ul含有2×1010個PE
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16

2013年
03月

利用血清篩選噬菌體文庫PCR擴增的模板

[方法]1.用無菌塑料吸嘴挑取一個AmpR噬菌粒菌落(直徑大約lmm)并將其轉入到0.2mlMicroAmp反應管中,內含20u1洗脫緩沖液。在GeneAmp9600PCR儀中,95℃加熱樣本10分鐘(避免用離心澄清,因為加熱可使細胞碎片黏附在管底)。2.將菌落提取物作為該克隆的主拷貝保存。另外,這些菌落也可以直接轉移到PCR反應體系中,并在PCR程序中插入加熱步驟。此時,可將克隆主拷貝穿刺接種到在用UV滅菌并鋪有LB—瓊脂培養(yǎng)基+Amp的微板孔中。3.配置PCR反應體系:將3ul菌落提取物加入
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14

2013年
03月

噬菌體展示文庫T7活體篩選的特殊步驟

CAS號:3844-53-9中文名稱:L-賴氨酸乙酯二鹽酸鹽其他中文名稱:英文名稱:H-Lys-OEt?2HCl其他英文名稱:L-Lysineethylesterdihydrochloride產品規(guī)格:特純英文名稱:H-Lys-OEt·2HCl;L-LysineethylesterdihydrochlorideCAS號:3844-53-9C8H18N2O2·2HC1=247.17的別:Purum含量:≥98.0%熔點:145℃比旋光度:+10±1°(c=2%inH2O)性狀:白色或類白色結晶粉末
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14

2013年
03月

噬菌體展示文庫體外篩選的通用步驟

1.通過腹腔注射濃度為1.25%(w/v)的阿佛丁來麻醉小鼠。2.打開胸腔并暴露心臟。3.用10ml的DMEM或PBS來灌注小鼠。4.連同一個或多個對照器官一起,取出要研究的器官和組織,并將其置于一個直徑為30m的細胞培養(yǎng)皿中。5.用無菌刀片將每個器官或組織都切碎。6.將切碎的器官或組織放到2.2m1的無菌塑料管中,并加入1.8m10.5mg/m1的膠原酶?;靹虿⒃?7℃搖瓶孵育30分鐘。在37℃培養(yǎng)時,持續(xù)搖動樣品。7.以1500r/min的速率短暫離心細胞懸液5分鐘,并棄去上清。8.將每份用
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12

2013年
03月

pG6質粒簡介,pG6質粒說明

pG6質粒是噬菌體顆粒載體,是為融合蛋白的單價展示設計的。來自輔助噬菌體的野生型pⅥ與噬菌體顆粒載體表達的pⅥ-cDNA的融合蛋白競爭合成原始的噬菌體顆粒。在多鏈接區(qū)域除了有一個額外的SalI位點以外,實際上噬菌體顆粒載體pG6A、pG6B、pG6C與載體pDONG6是等同的,pDONG6允許在gⅥ的3’末端進行eDNA文庫克隆。從lac啟動子轉錄可以產生雙側順反子mRNA:*條順反子在lacZ和gⅢ3’末端之間編碼一個融合蛋白,而第二條順反子包含了gⅥ-eDNA融合基因。gⅥ的核糖體結合位點控
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12

2013年
03月

從預制的入GTll文庫中制備cDNA插入片段

[方法]A.PCR擴增cDNA插入片段1.在冰浴中將以下成分加到0.2m1微量離心管中(執(zhí)行10步反應)●水,36.5ul●10×Pfu緩沖液,5.0ul●10mmol/LdNTP,1.5ul●λGTll正向引物(10umol/L),2.5ul●λGTll反向引物(10umol/L),2.5ul●已制備好的Sfi-NotIλGTllcDNA文庫,1.Oul●PfuDNA聚合酶(2.5U/ul),1.0ul2.混合反應物并用50ul的礦物油覆蓋。3.在95℃下使模板變性2分鐘,按如下操作執(zhí)行25次
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