詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱(chēng) | 款冬花PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱(chēng) | Flos farfarae |
貨號(hào) | FS-P99183 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專(zhuān)門(mén)的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶(hù)只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見(jiàn)的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶(hù)自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶(hù)自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
BUFFERED SOD CHLOR PEPTONE人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞總RNA3-甲氧基GFP 綠色熒光蛋白
液體硫鹽培養(yǎng)基(FTM)人肺間充質(zhì)干細(xì)胞總RNA3-甲氧基GFP 綠色熒光蛋白
NIH硫鹽肉湯人上皮細(xì)胞總RNA3-甲氧基GITR (glucocorticoidinduced tumor necrosis factor receptor) 糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗原
液體A(0.1%蛋白胨水)人成纖維細(xì)胞總RNA氯(*基膦)金GLI1(GLI-Kruppel family member 1) 下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗原
Fluid A人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNA敵草胺GLP-1/KG-31(Glucagon-like peptide-1) peptide 胰高血糖素樣肽-1(多肽)
液體D(0.1%蛋白胨水和吐溫80)人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNA乙基三基溴化磷GLP-1 peptide 胰高血糖素樣肽-1(多肽)
Fluid D人臍靜脈平滑肌細(xì)胞總RNA乙基三基溴化磷GLP-1R peptide 胰高血糖素樣肽-1受體多肽
胰蛋白大豆肉湯人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞總RNA乙基三基溴化磷GLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗原
Ku-80/FITC 熒光素標(biāo)記DNA修復(fù)酶Ku-80IgG磷酸化原癌基因c-kit3-溴-5-甲R(shí)at Neopterin 檢測(cè)試劑盒
KCNA7/FITC 熒光素標(biāo)記電壓閥門(mén)通道混合器相關(guān)亞家族成員7IgG磷酸化原癌基因c-Jun喹啉-5-酸Rat CD4 (Cluster of Differeiation 4) 檢測(cè)試劑盒
κOR/FITC 熒光素標(biāo)記kappa型阿片受體IgG氯離子通道蛋白3喹啉-5-酸Rat AGEs (advanced glycation end products)檢測(cè)試劑盒
Kv1.3/FITC 熒光素標(biāo)記離子通道蛋白Kv1.3IgG磷酸化周期素EBenzyl 2-acetamido-2-deoxy-3-O-β-D- galactopyranosyl-α-D-galactopyranosideRat GRIA1(Glutamate receptor 1) 檢測(cè)試劑盒
Kv3.3/Kcnc3/FITC 熒光素標(biāo)記離子通道蛋白Kv3.3IgG磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C3-甲氧基-4-甲酸甲
KSR1/FITC 熒光素標(biāo)記Ras信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白IgG磷酸化周期素依賴(lài)性激酶93-甲氧基-4-甲酸甲Porcine IL-8 (Ierleukin 8) 檢測(cè)試劑盒
Phospho-KSR1 (Ser392) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化Ras信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白IgG磷酸化Connexin 43蛋白3-甲氧基-4-甲酸甲Porcine IL-1β (Ierleukin 1 Beta) 檢測(cè)試劑盒
KCNC4/KV3.4/FITC 熒光素標(biāo)記離子通道蛋白Kv3.4IgG絲切蛋白1-甲基-2-基吲哚Porcine IFN-γ (Ierferon Gamma) 檢測(cè)試劑盒
款冬花PCR鑒定試劑盒溴芬酸鈉Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
溴芬酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)TBK1/NAK (E9H5S) Mouse mAb
鹽酸氟哌噻噸Phospho-CARD11 (Ser652) Antibody
茶多酚;綠茶提取物Hemoglobin γ (D4K7X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
四氫姜黃素 Mouse Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor (mGM-CSF)
管花苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Mouse Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor (mGM-CSF)
2’-乙?;锘ㄌ擒?標(biāo)準(zhǔn)品)Histone H3 (3H1) Rabbit mAb (HRP Conjugate)
2-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯氧基]乙基溴 Phospho-Bad (Ser112) (7E11) Mouse mAb (Biotinylated)
吡咯喹啉醌;維生素PLipin 1 Antibody
吡咯喹啉醌二鈉鹽;維生素鹽Lipin 1 Antibody