詳細介紹
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產品名稱 | 款冬花PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Flos farfarae |
貨號 | FS-P99183 |
優(yōu)點:
(1)操作簡單,LAMP核酸擴增是在等溫條件下進行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴增只需要在反應體系中加入逆轉錄酶就可同步進行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因為不需要預先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時間損失.核酸擴增在l h內均可完成,添加環(huán)狀引物后時間可以節(jié)省1/2,多數情況在20。30 rain均可檢測到擴增產物。且產物可以擴增至109倍,達0.5 mg/mL.應用專門的濁度儀可以達到實時定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個區(qū)域設計的4種特異性引物。6個區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進行核酸擴增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對于病毒擴增模板可達幾個拷貝,比PCR高出數量級的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產品A 型含電泳染料,PCR 反應液可直接上樣電泳,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經過精心優(yōu)化,反應的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應。
使用及效果:將本產品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反(PCR 參數由用戶自己確定),反應結束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結果。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
BUFFERED SOD CHLOR PEPTONE人臍帶間充質干細胞總RNA3-甲氧基GFP 綠色熒光蛋白
液體硫鹽培養(yǎng)基(FTM)人肺間充質干細胞總RNA3-甲氧基GFP 綠色熒光蛋白
NIH硫鹽肉湯人上皮細胞總RNA3-甲氧基GITR (glucocorticoidinduced tumor necrosis factor receptor) 糖皮質激素誘導腫瘤壞死因子受體抗原
液體A(0.1%蛋白胨水)人成纖維細胞總RNA氯(*基膦)金GLI1(GLI-Kruppel family member 1) 下游轉錄因子Gli1蛋白抗原
Fluid A人臍靜脈內皮細胞總RNA敵草胺GLP-1/KG-31(Glucagon-like peptide-1) peptide 胰高血糖素樣肽-1(多肽)
液體D(0.1%蛋白胨水和吐溫80)人臍動脈內皮細胞總RNA乙基三基溴化磷GLP-1 peptide 胰高血糖素樣肽-1(多肽)
Fluid D人臍靜脈平滑肌細胞總RNA乙基三基溴化磷GLP-1R peptide 胰高血糖素樣肽-1受體多肽
胰蛋白大豆肉湯人臍動脈平滑肌細胞總RNA乙基三基溴化磷GLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉運蛋白3抗原
Ku-80/FITC 熒光素標記DNA修復酶Ku-80IgG磷酸化原癌基因c-kit3-溴-5-甲Rat Neopterin 檢測試劑盒
KCNA7/FITC 熒光素標記電壓閥門通道混合器相關亞家族成員7IgG磷酸化原癌基因c-Jun喹啉-5-酸Rat CD4 (Cluster of Differeiation 4) 檢測試劑盒
κOR/FITC 熒光素標記kappa型阿片受體IgG氯離子通道蛋白3喹啉-5-酸Rat AGEs (advanced glycation end products)檢測試劑盒
Kv1.3/FITC 熒光素標記離子通道蛋白Kv1.3IgG磷酸化周期素EBenzyl 2-acetamido-2-deoxy-3-O-β-D- galactopyranosyl-α-D-galactopyranosideRat GRIA1(Glutamate receptor 1) 檢測試劑盒
Kv3.3/Kcnc3/FITC 熒光素標記離子通道蛋白Kv3.3IgG磷酸化細胞分裂周期蛋白25C3-甲氧基-4-甲酸甲
KSR1/FITC 熒光素標記Ras信號轉導KSR1蛋白IgG磷酸化周期素依賴性激酶93-甲氧基-4-甲酸甲Porcine IL-8 (Ierleukin 8) 檢測試劑盒
Phospho-KSR1 (Ser392) /FITC 熒光素標記磷酸化Ras信號轉導KSR1蛋白IgG磷酸化Connexin 43蛋白3-甲氧基-4-甲酸甲Porcine IL-1β (Ierleukin 1 Beta) 檢測試劑盒
KCNC4/KV3.4/FITC 熒光素標記離子通道蛋白Kv3.4IgG絲切蛋白1-甲基-2-基吲哚Porcine IFN-γ (Ierferon Gamma) 檢測試劑盒
款冬花PCR鑒定試劑盒溴芬酸鈉Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
溴芬酸鈉(標準品)TBK1/NAK (E9H5S) Mouse mAb
鹽酸氟哌噻噸Phospho-CARD11 (Ser652) Antibody
茶多酚;綠茶提取物Hemoglobin γ (D4K7X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
四氫姜黃素 Mouse Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor (mGM-CSF)
管花苷A(標準品)Mouse Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor (mGM-CSF)
2’-乙?;锘ㄌ擒?標準品)Histone H3 (3H1) Rabbit mAb (HRP Conjugate)
2-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯氧基]乙基溴 Phospho-Bad (Ser112) (7E11) Mouse mAb (Biotinylated)
吡咯喹啉醌;維生素PLipin 1 Antibody
吡咯喹啉醌二鈉鹽;維生素鹽Lipin 1 Antibody