詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 木瓜染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Fructus chaenomelis |
貨號 | FS-P99251 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
APNG/MPG N-甲基嘌呤DNA糖基化酶秦皮苷; 白蠟樹苷3- 巰基酸正酯HSP-90Alpha(Heat Shock Protein 90Alpha ) 熱休克蛋白90α(抗原)
APOD 載脂蛋白D奇任,奇壬2-氯-5-甲(易制爆)HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta) 熱休克蛋白-90β (抗原)
APOH 載脂蛋白H高良姜素2-氯-5-甲(易制爆)IASPP(inhibitory member of the ASPP family) 腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員(抗原)
APOE 載脂蛋白E比枯枯靈;畢靈堿;荷包牡丹堿2-氯-5-甲(易制爆)CD54/ICAM-1 細(xì)胞間粘附分子-1
APOJ 載脂蛋白J異槲皮苷4-氯-2-三氟基異酸酯IL-1 Beta(Ierleukin-1 Beta) 白介素1β(白細(xì)胞介素-1β)(多肽抗原)
Apollon/BIRC6 Apollon凋亡抑制蛋白乙酰紫堇靈; 乙酰紫堇靈堿3-(二基膦基)胺IL1RAPL1 (Ierleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白(抗原)
APP/ABPP 淀粉樣肽前體蛋白三葉豆紫檀苷3-(二基膦基)胺IL-6(Ierleukin-6) 白介素6(白細(xì)胞介素-6)(多肽抗原)
APP/ABPP APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白苷(R)-(+)-碳酸烯酯IL-10(Ierleukin-10) 白介素10(白細(xì)胞介素-10)(抗原)
軸突相關(guān)CP2蛋白(少突膠質(zhì)細(xì)胞)5-氟-8-羥基喹啉Porcine MYH9 (Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle) 檢測試劑盒
酪蛋白激酶δ15-氟-8-羥基喹啉Porcine MK (Midkine) 檢測試劑盒
活化白細(xì)胞粘附分子二對甲磺酸拉帕替尼(GW-572016)Porcine CYSLTR1 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 1) 檢測試劑盒
1號染色體開放閱讀框1912'-甲氧基肌苷Porcine TSPAN30 (Tetraspanin 30) 檢測試劑盒
柯薩奇病A16型聚合酶3DD-(+)-纖維四糖Porcine RANκ (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B) 檢測試劑盒
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子N,N',N''-三乙?;鶜と荘orcine GAL9 (Galectin 9 ) 檢測試劑盒
細(xì)胞角蛋白161-(4-)哌鹽酸鹽Porcine SA (Sialic Acid) 檢測試劑盒
4號染色體開放閱讀框17甲氧基乙酰氯Porcine OPN (Osteopoin) 檢測試劑盒
木瓜染料法PCR鑒定試劑盒匹莫苯丹GATA-3 (D13C9) XP® Rabbit mAb
2-氨基-4'-氟二苯甲酮HO-1 (D60G11) Rabbit mAb
2-氨基-4'-氯二苯甲酮WTX (D38E5) Rabbit mAb
原百部堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Bmi1 (DC9) Mouse mAb
雪上一枝蒿甲素Bmi1 (D42B3) Rabbit mAb
麥冬皂苷D' DBC1 (3G4) Mouse mAb
糠胺,2-呋喃CD133 (A3G6K) Rabbit mAb
芐氟噻FoxA1/HNF3α (D7P9B) Rabbit mAb
蘭雪醌,白花丹醌,白花丹素(標(biāo)準(zhǔn)品)NFAT1 (D43B1) XP® Rabbit mAb
黃鐘花醌;拉帕 (標(biāo)準(zhǔn)品)NFAT1 (D43B1) XP® Rabbit mAb