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詳細(xì)介紹
商品介紹：
測定意義LPS又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。LPS廣泛的存在于各種生物中。對于人來說，主要是胰脂肪酶，分解食物中脂肪形成單酰甘油和游離脂肪酸，被人體吸收并重新合成脂肪。外源性脂質(zhì)攝入過多是引發(fā)肥胖的重要原因，血清中LPS的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。測定原理LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測定脂肪酸生成速率，即可計(jì)算LPS活性。實(shí)驗(yàn)中所需儀器和用品甲苯、無水乙醇、研缽、冰、臺式離心機(jī)、震蕩混勻器、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321181 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
去斑蝥鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 1-Tridecene γ-微管蛋白GCP4抗體包裝5g
去堿鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： 1-Tetradeceneγ-微管蛋白GCP6抗體包裝500g
去氧基姜黃英文名： 1-Pentadeceneβ-葡萄糖苷1抗體包裝100ml
去氧基姜黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： 1-Hexadecene甘裂解系統(tǒng)H蛋白抗體包裝25ml
去氧基麻醉椒英文名： 1-Heptadecene15號染色體開放閱讀框58抗體包裝25g
去異波爾定（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 1-Nonadecene淀粉結(jié)合域蛋白1抗體包裝5g
去澤木（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 2-Bromo-4'-phenylacetophenone延伸因子G1抗體包裝100g
去芹菜糖桔梗皂苷D（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Dabsyl Chloride β葡萄糖苷2抗體包裝25g
去芹糖桔梗皂苷D3英文名： O-4-Nitrobenzylhydroxylamine Hydrochlorideβ葡萄糖苷3抗體包裝100g
去氫厄弗英文名： 7-Acetoxy-4-bromomethylcoumarin膠質(zhì)母瘤相關(guān)蛋白GBAS抗體包裝1g
去氫二異丁香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)紅糖苷α1抗體包裝25g
去氫茯苓英文名： 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one G蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
去氫鉤藤堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin G蛋白結(jié)合蛋白4抗體包裝1g
去氫毛鉤藤堿英文名： DBD-CO-Hz [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-hydrazinocarbonylmethyl-N-methyl)amino-2,1,3-benzoxadiazole] G蛋白結(jié)合蛋白6體包裝25g
去氫木香內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： NBD-CO-Hz [=4-(N-Hydrazinocarbonylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole] 鳥苷環(huán)化激活蛋白1抗體包裝5g
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品,一合物凝溶膠蛋白試劑盒木蝴蝶苷A;Oroxin A
皺蓋假芝（血芝）Amauroderma│rude 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,一合物凝聚試劑盒漏蘆甾;Rhapontisterone
斜臥青霉Penicillium│decumbens 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP31,可用于培養(yǎng)檸檬合成,線粒體試劑盒羅漢果甜IV;Mogroside IV
脂肪酶（LPS)測試盒50管/48樣暗蓋淡鵝膏 1,3-二甲基尿酸彈性蛋白抑制劑Elisa
巨大芽胞桿 3-氨基-2-羥基吡啶甲胎蛋白異質(zhì)體Elisa
耐久腸球 2-氨基-5-PSD95Elisa
塔賓曲霉 4-溴叔丁酯核心結(jié)合因子β亞基Elisa
分枝節(jié)桿 Chloro[(S)-(-)-5,5'-bis(diphenylphosphino)-4,4'-bi磷酸化蛋白酪激JAK-2Elisa
淺天青鏈霉 3-溴-1-苯并髓觸發(fā)受體2Elisa
Sporosarcina 4-乙酸乙酯白血病抑制因子受體Elisa
盤長孢狀盤孢 米索前列固調(diào)節(jié)因子結(jié)合蛋白2Elisa
淺白隱球酵母 8-溴-4-羥基-2-三氟甲基喹啉周期I2Elisa
豌豆根瘤 甲基4-乙酰-2-乙氧基苯甲脂周期蛋白E2Elisa
棉阿舒囊霉 6-溴-1-甲基吲唑C反應(yīng)蛋白單體Elisa
Lactobacillus brevis 3-溴-2-三氟雙烯雌Elisa
檸檬色短小桿 2-巰基-S-硫代苯甲酰乙酸己烷雌Elisa
游動放線* 酸-S-糠基硫代酯假尿苷酸合1Elisa
格氏嗜鹽堿桿 2-氨基-4-苯甲酰β-羥基類固脫氫2Elisa
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
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