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DC2.4 小鼠樹突狀細(xì)胞 培養(yǎng)詳細(xì)說明:
培養(yǎng)條件:
培養(yǎng)基類型:RPMI-1640
FBS: 10%
抗生素:雙抗
培養(yǎng)條件:37℃,CO2: 5%
收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài):如果沒長滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已經(jīng)長滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。
傳代方法:
1 棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。
2 加1ml 0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時觀察細(xì)胞狀態(tài)變化,待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。
3 一般沒有特殊說明,細(xì)胞一般是一傳二。
凍存方法:70% *培養(yǎng)基,20%FBS,10%DMSO,先用現(xiàn)配。
儲存:液氮中長期保存。
注:
1 觀察細(xì)胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。
2 在運(yùn)輸過程中可能會導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。
3 收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等,請及時拍照存檔,于一周內(nèi)與我們。
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