74134凱杰Qiagen總RNA小提試劑盒 50T

凱杰Qiagen74134總RNA小提試劑盒RNeasy Plus Mini Kit 50T

凱杰QIAGEN作為創(chuàng)新市場和技術(shù)的領(lǐng)dao者，憑借強(qiáng)大的樣本制備和分析技術(shù)，實現(xiàn)各種生物樣本內(nèi)容物的高品質(zhì)純化、分析。我們致力于幫助客戶在生命科學(xué)研究、應(yīng)用檢測、制藥、和分子診斷領(lǐng)域獲得成功和突破性進(jìn)展。由此讓生活的改善成為可能。我們秉承市場、客戶、病患至上的理念，不斷推進(jìn)多領(lǐng)域的創(chuàng)新和發(fā)展，充分發(fā)揮我們的樣本制備和分析技術(shù)專長

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74134 凱杰Qiagen總RNA小提試劑盒 50T RNeasy Plus Mini Kit ，產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品品牌：Qiagen
產(chǎn)品貨號：74134
產(chǎn)品名稱：總RNA小提試劑盒
英文名稱：RNeasy Plus Mini Kit
產(chǎn)品規(guī)格：50T

74134 凱杰Qiagen總RNA小提試劑盒 50T RNeasy Plus Mini Kit ，產(chǎn)品說明：

特征

l  使用du特的gDNA消除柱或板高效去除gDNA（無需DNase）

l  使用快速簡單的提取方案在幾分鐘內(nèi)獲得高質(zhì)量的總RNA

l  無酚RNA分離

l  96孔形式的高通量處理

l  適用于實時 RT-PCR 和 RNA-seq 等敏感應(yīng)用

產(chǎn)品詳情

RNeasy Plus 試劑盒是下一代 QIAGEN RNA 提取試劑盒，將高質(zhì)量 RNA 純化與du特的 gDNA 消除柱或板的有效 gDNA 去除相結(jié)合。從各種培養(yǎng)細(xì)胞和易于裂解的組織中獲得高純度和高產(chǎn)量的總RNA。RNeasy Plus 微量試劑盒專為數(shù)量有限的樣品而設(shè)計，可分離出高達(dá) 45 μg 純總 RNA RNeasy Plus 迷你試劑盒可從單次提取中純化高達(dá) 100 μg 的總 RNA （>200 nt），并具有高效的 gDNA 去除功能。兩種試劑盒都可以在QIAcube Connect上實現(xiàn)自動化，并且可以使用RNAprotect組織試劑或Allprotect組織試劑方便地穩(wěn)定樣品，并使用TissueRuptor II或TissueLyser II或LT系統(tǒng)（單獨提供）有效地破碎樣品。RNeasy Plus 96 試劑盒用于從 96 孔板中生長的培養(yǎng)細(xì)胞中高通量純化總 RNA。為了獲得優(yōu)良效果，建議將本產(chǎn)品與QIAvac 96系統(tǒng)一起使用。

Performance

使用 RNeasy Plus 微型和迷你試劑盒從細(xì)胞和組織中提取 RNA，可實現(xiàn)高、可重復(fù)的 RNA 產(chǎn)量和高效的基因組 DNA 消除，適用于敏感應(yīng)用。常規(guī)從組織和培養(yǎng)細(xì)胞中獲取安捷倫 RIN 值接近 10 的總 RNA。

RNeasy Plus 微量和迷你試劑盒還可富集 mRNA，因為大多數(shù) RNA <200 個核苷酸（如 rRNA 和 tRNA）被排除在外。為了從培養(yǎng)的細(xì)胞中分離含有小RNA（例如miRNA）的總RNA，可以使用其他RNA分離方案，并在RNeasy Plus微型手冊中描述，并作為RNeasy Plus迷你試劑盒的單獨補(bǔ)充方案。

RNeasy Plus 96 試劑盒與多種細(xì)胞系兼容，可純化安捷倫 RIN 值接近 10 的高質(zhì)量 RNA。通過試劑盒wan全去除基因組DNA可在高靈敏度應(yīng)用中進(jìn)行特異性轉(zhuǎn)錄本檢測，例如低豐度靶標(biāo)的定量實時RT-PCR分析。此外，從102到106細(xì)胞的可靠RNA純化允許在寬動態(tài)范圍內(nèi)進(jìn)行實時RT-PCR定量。

Principle

RNeasy Plus程序?qū)?span>QIAGEN用于雙鏈DNA選擇性結(jié)合的創(chuàng)新技術(shù)與成熟的RNeasy技術(shù)相結(jié)合。保證高質(zhì)量RNA的高效純化，無需額外的DNA酶消化。純化的RNA即用型，非常適合對少量DNA污染敏感的下游應(yīng)用，例如定量實時RT-PCR。

細(xì)胞和易于裂解的組織首先在高度變性的含異硫氰酸胍的緩沖液RLT Plus中裂解和勻漿，該緩沖液可立即滅活RNA酶以確保分離完整的RNA。然后將裂解物通過gDNA消除器離心柱或gDNA消除器96板，該板與高鹽緩沖液結(jié)合使用，選擇性地有效地去除基因組DNA。加入乙醇以提供適當(dāng)?shù)?span>RNA結(jié)合條件，并將樣品施加到RNeasy離心柱或96孔板上。這些專用色譜柱和 96 孔板含有硅膠膜，可特異性結(jié)合裂解細(xì)胞的 RNA。

對于脂肪和難以裂解的組織，建議使用 RNeasy Plus 通用試劑盒。為了從其他樣品類型中分離總RNA（包括miRNA），我們建議使用miRNeasy試劑盒。

Procedure

RNeasy Plus 微量試劑盒可從多達(dá) 5 x 10 5 個細(xì)胞或5 mg 組織中純化總 RNA，RNeasy Plus 迷你試劑盒可從多達(dá) 10 個7 個細(xì)胞或 30 mg 組織中分離總 RNA。短的工作流程可在不到 25 分鐘的時間內(nèi)完成 RNA 分離和基因組 DNA 去除。首先裂解樣品并進(jìn)行均質(zhì)化。裂解物通過gDNA消除器離心柱，將乙醇添加到流通中，并將樣品施加到RNeasy離心柱上。RNA與膜結(jié)合，污染物被沖走。使用 RNeasy Plus 微量試劑盒在低至 14 μl 水中洗脫高質(zhì)量 RNA，或使用 RNeasy Plus 迷你試劑盒在 30 μl 水中洗脫。

不同的實驗方案可用于不同的起始材料。該方案的主要區(qū)別在于樣品的裂解和均質(zhì)化。一旦將樣品應(yīng)用于gDNA消除器離心柱，實驗方案就相似了。該程序為mRNA提供了富集，因為大多數(shù)RNA<200個核苷酸（如rRNA和tRNA）被排除在外。

在 RLT Plus 緩沖液（隨 RNeasy Plus 迷你試劑盒隨附）中破碎和均質(zhì)組織時，可能會出現(xiàn)過度起泡。通過在開始破碎和均質(zhì)化之前將試劑DX（單獨提供）添加到緩沖液RLT Plus中，可以大大減少這種起泡。試劑DX已使用試劑盒進(jìn)行了仔細(xì)測試，對RNA純度或下游應(yīng)用沒有影響。

通過使用RNeasy 96板實現(xiàn)高通量RNA純化。在應(yīng)用于RNeasy 96板之前，細(xì)胞裂解物首先通過gDNA消除器96板。gDNA 消除器 96 板使用離心機(jī)（離心機(jī) 4-16）方便地進(jìn)行處理。使用 RNeasy 96 板進(jìn)行 RNA 純化是手動的，包括 3 個簡單步驟：結(jié)合、洗滌和洗脫。使用離心機(jī)（離心機(jī)4-16和板轉(zhuǎn)子2 x 96）或真空（QIAvac 96）和離心機(jī)的組合可以快速方便地處理板。使用離心機(jī)處理板時，最多可使用2 x 10 6個細(xì)胞作為起始材料，而使用真空和離心機(jī)處理板時，最多可使用1 x 106個細(xì)胞。該程序為mRNA提供了富集，因為大多數(shù)RNA<200個核苷酸（如rRNA和tRNA）被排除在外?？梢孕薷?span>RNeasy Plus程序，以允許從培養(yǎng)的細(xì)胞中純化含有小RNA（例如miRNA）的總RNA。

Applications

使用 RNeasy Plus 試劑盒純化的 RNA 非常適合對少量 DNA 污染敏感的下游應(yīng)用，例如 RNA-seq 和定量實時 RT-PCR。純化的RNA也可用于其他應(yīng)用。

RNeasy Plus 微量試劑盒適用于小樣品，包括：

l  激光顯微解剖冷凍切片

l  細(xì)針抽吸物

RNeasy Plus 96 試劑盒易于純化 96 孔格式的 RNA，非常適合以下領(lǐng)域的高通量基因表達(dá)分析：

l  藥物發(fā)現(xiàn)

l  生物醫(yī)學(xué)研究

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