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  • 免疫組化技術專題:免疫組化Elivison二步法

    1、石蠟切片置于67℃烘箱中,烘片2小時,脫蠟至水,用pH7.4的PBS沖洗三次,每次3分鐘(3×3’)。2、取一定量pH=6.0檸檬酸鹽緩沖液,加入微波盒中,微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的組織切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔微波處理10分鐘,取出微波盒流水自然泠卻,從緩沖液中取出玻片,先用蒸餾水沖洗兩次,之后用PBS沖洗2×3’。(注:不是所有的抗體都需要微波修復的,視具體情況而定)3、每張切片加1滴3%H2O2,室溫下孵育10分鐘,以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS沖
  • 細胞技術專題:原代胚胎成纖維細胞培養(yǎng)

    實驗器材手術小直剪刀三把、眼科直鑷子三把、眼科彎鑷子兩把、玻璃平皿三套、200目尼龍濾網(wǎng)、50ML、15ML離心管和手術刀片。以上物品均需要高壓滅菌消毒處理。實驗試劑無Ca2+和Mg2+的PBS、0.05%胰酶0.53mmol/LEDTA溶液、小鼠胚成纖維細胞(MEF)生長培養(yǎng)基:高糖DMEM加10%FCS。實驗動物孕期14至16天的孕鼠實驗步驟1.處死孕鼠,置于75%酒精里全身浸泡,然后在超凈臺中用一把剪刀和一把鑷子把孕鼠外皮剪開,用另外一把剪刀和一把鑷子把內(nèi)皮剪開,露出子宮,zui后用第三把
  • 細胞技術專題:補體介導的細胞毒試驗

    1、實驗原理帶有特異抗原的靶細胞(如正常細胞、腫瘤細胞、病毒感染細胞)與相應抗體結合后,在補體的參與下,引起靶細胞膜損傷,導致細胞膜的通透性增加、細胞死亡。染料(例如:伊紅-Y、臺盼藍)可通過細胞膜進入細胞內(nèi)使細胞著色,故可用于指示死細胞或瀕死細胞,而活細胞不著色。此即補體依賴性細胞毒試驗,利用細胞毒試驗可以檢查細胞膜抗原,亦可鑒定抗體的特異性。本實驗中,Thy-1抗原是小鼠胸腺T細胞特異的表面抗原,在體外利用抗小鼠Thy-1的單克隆抗體通過補體的協(xié)同作用,可殺傷95%以上的胸腺細胞。2、實驗材
  • 細胞技術專題:細胞生長曲線實驗

    標簽:細胞生長曲線細胞生長曲線是測定細胞生長數(shù)的常用方法,是判定細胞活力的重要指標。一般細胞傳代之后,經(jīng)過短暫的懸浮然后貼壁,隨后度過長短不同的潛伏期,即進入大量分裂的指數(shù)生長期。為了準確描述整個過程中細胞數(shù)目的動態(tài)變化,典型的生長曲線可分為生長緩慢的潛伏期,斜率較大的指數(shù)生長期,呈平臺狀的平頂期及退化衰亡4個部分。實驗方法細胞生長曲線實驗方法原理細胞生長曲線是觀察細胞生長基本規(guī)律的重要方法。只有具備自身穩(wěn)定生長特性的細胞才適合在觀察細胞生長變化的實驗中應用。因而在細胞系細胞和非建系細胞生長特性
  • 細胞技術專題:小鼠腹腔巨噬細胞培養(yǎng)實驗

    標簽:小鼠腹腔巨噬細胞培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細胞培可以:(1)吞噬與清除異物;(2)分泌生物活性物質(zhì);(3)對仿生全降解材料,降解后的無機產(chǎn)物與生命過程中有機物的合成作用。實驗方法細胞培養(yǎng)技術實驗方法原理取小鼠腹腔巨噬細胞與乳膠顆粒在不同培養(yǎng)條件下混合后定量加入24孔板,37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中孵育后,熒光顯微鏡下計數(shù)吞噬百分率和吞噬指數(shù)。實驗材料小鼠試劑、試劑盒1640培養(yǎng)基小牛血清雙抗臺盼蘭儀器、耗材手術器械一次性注射器眼科鑷眼科剪96孔板CO2培養(yǎng)箱實驗步驟一、實驗步驟1.如果采用刺激物,則可
  • Abnova高通量蛋白表達系統(tǒng)

    亞諾法生技公司是*一家結合中國臺灣IT產(chǎn)業(yè)之生產(chǎn)管理、自動化及量化的精華及其概念,將人類重要基因有計劃性的快速大量生產(chǎn),利用快速有效的抗體生產(chǎn)平臺,建立起zui大的蛋白質(zhì)及抗體銀行。亞諾法使用的體外小麥胚無細胞蛋白表達系統(tǒng),此小麥胚屬于真核生物,故生產(chǎn)出來的蛋白較E.coli制成的蛋白更似天然人源蛋白的結構和正確的折疊,加上*的全自動化的生產(chǎn)設備,亞諾法生產(chǎn)出的重組蛋白產(chǎn)品是率、高產(chǎn)量、*,目前已擁有超過22,000種重組蛋白,其中包括全長及部分序列人源重組蛋白,還有各類針對哺乳動物細胞和昆蟲細
  • Abnova無內(nèi)毒素生長因子-您干細胞研究的Z佳幫手

    內(nèi)毒素(Endotoxin),也被稱為脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS),會干擾細胞之功能和生長等,特別是以干細胞zui易受影響。目前可接受的內(nèi)毒素濃度水平為小于1EU/μg(≈0.1ng/μg)(1),這是目前大多數(shù)生長因子產(chǎn)品的上限。但是,在體外干細胞的研究顯示,0.005ng/ml的內(nèi)毒素可抑制中胚層的形成,并導致胚狀體(EmbryoidBodies,EBs)無法分化成為成骨細胞(2)。0.005ng/ml此一濃度就相當于將5個濃度為10ng/ml的生長因子(每個含接
  • InvivoGen,為您提供更專業(yè)的天然免疫系統(tǒng)研究工具

    InvivoGen致力于天然免疫系統(tǒng)相關產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn)。天然免疫系統(tǒng)在抵抗病毒感染方面發(fā)揮著重要作用,在天然免疫過程中識別特定的病原體相關的分子模式(pathogen-associatedmolecularpatterns,PAMPs)需要依賴于有限的一組模式識別受體(patternrecognitionreceptors,PRRs),這些PRRs能夠觸發(fā)炎癥反應并能有效地將入侵病原體清除。PRRs包含有四大類:Toll樣受體(Toll-LikeReceptors,TLRs);NOD樣受體(N
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