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細(xì)胞技術(shù)專題：人臍動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)實驗
標(biāo)簽：臍動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)人臍動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)可以：（1）獲得人臍動脈平滑肌細(xì)胞；（2）作為重大動脈疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）對血管疾病的藥理學(xué)和治療繼續(xù)提供信息。實驗方法消化法貼塊法實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)，并用倒置顯微鏡進行形態(tài)學(xué)觀察和用免疫組化對培養(yǎng)細(xì)胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原酶消化液胰蛋白酶膠原酶彈性蛋白酶DMEM儀器、耗材眼科剪滴管離心機培養(yǎng)皿CO2培養(yǎng)箱實驗步驟一、實驗步驟1.冰冷無菌D-Hanks’液中漂洗，用眼科剪仔細(xì) -
細(xì)胞技術(shù)專題：兔膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)實驗
標(biāo)簽：兔膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)兔膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)可以：（1）分離得到高純度兔膀胱平滑肌細(xì)胞；（2）進行細(xì)胞學(xué)鑒定研究；（3）用于細(xì)胞學(xué)其他研究。實驗方法酶分離法實驗方法原理運用顯微手術(shù)器械在肉眼下仔細(xì)剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細(xì)胞，體外原代和傳代培養(yǎng)分離細(xì)胞。在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及生長狀況，同時進行細(xì)胞爬片H-E染色和透射電鏡等形態(tài)學(xué)觀察分析，并應(yīng)用免疫熒光染色平滑肌*的α-肌動蛋白進行細(xì)胞學(xué)鑒定分析。zui后根據(jù)細(xì)胞計數(shù)繪制細(xì)胞生長曲線和 -
細(xì)胞技術(shù)專題：大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)實驗
標(biāo)簽：大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)可以：（1）應(yīng)用于血腦屏障的研究；（2）腦血管疾病的病理生理及分子生物學(xué)研究；（3）新藥篩選；（4）腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞生理生化及藥理學(xué)研究。實驗方法酶消化法實驗方法原理丁香園站友參考文獻(xiàn)采用以大腦皮質(zhì)為材料、酶消化及梯度離心分離腦微血管段并進行原代培養(yǎng),，成功地摸索出大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離和原代培養(yǎng)的方法，并獲得純度較高的腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒纖連蛋白Ⅳ型膠原明膠肝素鈉堿性成纖維細(xì)胞生長因子青霉素鏈霉素NaHC -
細(xì)胞技術(shù)專題：大鼠肝星狀細(xì)胞原代培養(yǎng)實驗
標(biāo)簽：大鼠肝星狀細(xì)胞原代培養(yǎng)大鼠肝星狀細(xì)胞原代培養(yǎng)可以：（1）用于細(xì)胞保種；（2）用于分子生物學(xué)研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法胰酶消化法實驗方法原理將小鼠的肝細(xì)胞從機體中取出，經(jīng)胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細(xì)胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM酶消化液D-Hanks'液酚紅臺盼蘭HBSS氯化鈉PBS儀器、耗材手術(shù)刀手術(shù)剪尼龍網(wǎng)相差顯微鏡熒光顯微鏡實驗步驟一、實驗材料準(zhǔn)備1.動物：雄性SD大鼠(體重250 -
細(xì)胞技術(shù)專題：腫瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)實驗
標(biāo)簽：腫瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)可以：（1）研究癌變機理；（2）研究抗癌藥檢測；（3）研究癌分子生物學(xué)；（4）用于闡明和解決癌癥。詳細(xì)實驗方法組織塊法酶消化法脫落細(xì)胞法實驗方法原理腫瘤細(xì)胞的原代培養(yǎng)與正常細(xì)胞的原代培養(yǎng)的條件基本相似。一般常用原代細(xì)胞的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，10%血清濃度即可，在原代培養(yǎng)時需加入原代細(xì)胞培養(yǎng)的特制添加物，或原患者血清（1%-2%）以利細(xì)胞生長。用細(xì)胞生長因子如胰島素、松、雌激素等等。也可以考慮動物媒介培養(yǎng)。根據(jù)細(xì)胞種類不同選用不同的促細(xì)胞生長因子。實驗材料瘤組織試劑、 -
細(xì)胞技術(shù)專題：staurosporine誘導(dǎo)小鼠心肌細(xì)胞凋亡模型構(gòu)建
原代心肌細(xì)胞的培養(yǎng)及實驗方案取出生后0~24hC57BL/6cr小鼠心臟，按改良的Lader方法進行細(xì)胞的分離。獲取博動的心臟迅速放置于無Ca2+、Mg2+的Hank’s平衡液中。剪碎心臟，放置在4℃條件下100g/L的Trypsin溶液中消化16~18h，用Trypsin抑制劑中止消化。然后在37℃下，用膠原酶Ⅱ于CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，在搖床上繼續(xù)孵化消化45~60min，zui后用70μm直徑尼龍過濾網(wǎng)過濾獲取心肌細(xì)胞，用含有25mmol/LHCO3-，100mL/LFSB，1×105u/L青霉素 -
細(xì)胞技術(shù)專題：腫瘤細(xì)胞的軟瓊脂集落培養(yǎng)實驗
標(biāo)簽：腫瘤軟瓊脂集落在體外培養(yǎng)基中由一個祖先細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞團，稱之為集落。腫瘤細(xì)胞能無限繁殖，所以具有這種能力，而成熟分化的細(xì)胞則不能形成集落。實驗方法基本方案實驗方法原理HL-60細(xì)胞是一種急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞，在體外無需加刺激因子，可在軟瓊脂培養(yǎng)基中形成集落。二甲基亞砜是一種細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑，經(jīng)二甲基亞砜處理后的HL-60細(xì)胞按粒系途徑定向成熟分化，同時細(xì)胞的增殖力降低，幾乎全部細(xì)胞喪失了軟瓊脂中形成集落的能力。因此，這種方法可用于細(xì)胞分化的基礎(chǔ)研究和臨床腫瘤治療的療效檢驗等方面。實驗 -
細(xì)胞技術(shù)專題：大鼠胰島細(xì)胞培養(yǎng)實驗
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)實驗方法原理水合氯醛腹腔麻醉，采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島，并分離、培養(yǎng)胰島單細(xì)胞。實驗材料一周齡Wistar大鼠試劑、試劑盒D-Hanks’液胰蛋白酶Ⅴ型膠原酶葡萄糖碘乙酸儀器、耗材手術(shù)剪手術(shù)鉗眼科剪刀眼科鑷子大頭針手術(shù)刀片培養(yǎng)皿實驗步驟一、實驗步驟1.一周齡Wistar大鼠，斷頸處死，于75%乙醇浸泡15分鐘，無菌取出胰腺，于冰冷無菌D-Hanks’液中漂洗，用眼科剪仔細(xì)清除脂肪、包膜、血管等胰外組織，轉(zhuǎn)入青霉素小瓶中。2.
