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Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit
——快速型DNA建庫(kù)試劑盒
產(chǎn)品描述
Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina® 是針對(duì)lllumina®高通量測(cè)序平臺(tái)專業(yè)開發(fā)設(shè)計(jì)的轉(zhuǎn)座酶法建庫(kù)試劑盒。適用于1 ng/50 ng的基因組DNA、cDNA、擴(kuò)增子（>500 bp）等樣本的建庫(kù)。與常規(guī)分步法建庫(kù)相比，僅需10 min即可完成DNA片段化、末端修復(fù)和接頭連接過(guò)程，顯著縮短建庫(kù)時(shí)間，并獲得優(yōu)異的測(cè)序質(zhì)量。
產(chǎn)品原理
在Transposome Mix中包含由轉(zhuǎn)座酶和兩種等摩爾的接頭Adapter 1和Adapter 2構(gòu)成一個(gè)完整的轉(zhuǎn)座子。轉(zhuǎn)座發(fā)生時(shí)，該轉(zhuǎn)座子將Adapter 1和Adapter 2接頭序列插入靶基因中，形成一端帶有Adapter 1，一端帶有Adapter 2的DNA，之后利用DNA聚合酶將轉(zhuǎn)座形成的切口補(bǔ)齊。這種產(chǎn)物經(jīng)N5（N5XX）和N7（N7XX）以及P5和P7（PCR Primer Mix）兩對(duì)引物擴(kuò)增，產(chǎn)物經(jīng)分選和純化后即為可測(cè)序文庫(kù)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
》》 操作簡(jiǎn)便：一步法文庫(kù)構(gòu)建，一步完成片段化到接頭連接；
》》 適用范圍廣：適用不同來(lái)源不同GC含量的DNA樣本；
》》 極速建庫(kù)：單個(gè)文庫(kù)構(gòu)建僅90 min即可完成；
》》 產(chǎn)品穩(wěn)定：嚴(yán)格的批次性能與穩(wěn)定質(zhì)控。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1）簡(jiǎn)便
本產(chǎn)品基于轉(zhuǎn)座酶法開發(fā)，其核心原理是轉(zhuǎn)座酶及其轉(zhuǎn)坐機(jī)制。產(chǎn)品整個(gè)操作流程僅包括片段化、擴(kuò)增和純化過(guò)程，整體過(guò)程僅需 90分鐘，即可完成建庫(kù)。
2） 文庫(kù)質(zhì)量
使用Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®對(duì)1 ng嗜鹽桿菌gDNA（65% GC）樣本建庫(kù)，并分別使用1.0×磁珠進(jìn)行純化，0.8×/0.2×、0.7×/0.2×、0.5×/0.15×磁珠比例進(jìn)行文庫(kù)分選，均獲得高質(zhì)量文庫(kù)。
圖. Agilent 2100文庫(kù)質(zhì)量分析
3）測(cè)序質(zhì)量
使用Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®對(duì)不同GC含量的微生物gDNA樣本建庫(kù)，并使用HiSeq 4000測(cè)序，結(jié)果顯示：無(wú)論樣本起始量及GC含量，Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®所建文庫(kù)均獲得堿基質(zhì)量好且覆蓋度均一的測(cè)序數(shù)據(jù)。
圖 Input DNA為50 ng，PCR cycles為7，測(cè)序數(shù)據(jù)每個(gè)樣品1 G，對(duì)應(yīng)不同GC含量樣本的數(shù)據(jù)偏好性分析
