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搞事情啊,翊圣請(qǐng)來(lái)了四位ECL超級(jí)魔術(shù)師??
老板,都說(shuō)你家ECL功能強(qiáng),我給個(gè)飛克級(jí)的蛋白,能變出條帶嗎?
辦不到??
老板,我多給點(diǎn)小費(fèi),把蛋白提高到皮克級(jí),能不能變出條帶?
還是辦不到??那也太差勁了,還想不想混了!
不,小伙,你理解錯(cuò)了,是通通不是問(wèn)題??!跟著我往下看!
點(diǎn)亮您的印跡膜,一觸即發(fā)
ECL試劑,即化學(xué)發(fā)光法辣根過(guò)氧化物酶(HRP)底物,是目前Western blotting檢測(cè)中為靈敏的試劑。目前市場(chǎng)上普通ECL試劑在使用過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)易淬滅、高背景、不穩(wěn)定以及低豐度蛋白難以檢測(cè)等問(wèn)題,影響終實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
翊圣生物根據(jù)現(xiàn)狀,集中免疫檢測(cè)領(lǐng)域的科研人員,在嚴(yán)格控制魯米諾原料的基礎(chǔ)上,不斷改良增強(qiáng)劑和穩(wěn)定劑配方,針對(duì)不同需求開(kāi)發(fā)了4類ECL試劑,包含增強(qiáng)型、超敏型、持久型和zui高靈敏度型產(chǎn)品,不僅可滿足實(shí)驗(yàn)者對(duì)目的蛋白從低豐度到高豐度表達(dá)的檢測(cè)要求,同時(shí)可在不影響實(shí)驗(yàn)的條件下,提高發(fā)光強(qiáng)度,使您獲得的圖像更加清晰。
魔術(shù)師特性技能
的靈敏度——皮克至低飛克級(jí)的抗原檢測(cè)
更高的信噪比——發(fā)光底物,降低背景
更利節(jié)省抗體——優(yōu)化底物系統(tǒng),更高抗體結(jié)合力
優(yōu)異的性價(jià)比——更高的性能,更低的價(jià)格
特好的穩(wěn)定性——新型氧化劑,常溫下穩(wěn)定保存1年
ECL魔術(shù)師簡(jiǎn)歷
ECL試劑檢測(cè)的核心原理為氧化反應(yīng)發(fā)光:魯米諾(lumino)作為發(fā)光底物的主要成分,在堿性條件下,通過(guò)辣根過(guò)氧化酶(HRP)催化,被H2O2氧化生成3-氨基鄰苯二酸的激發(fā)態(tài)中間體,當(dāng)其回到基態(tài)時(shí)發(fā)出光子,zui大發(fā)射波長(zhǎng)為425 nm,光子信號(hào)可通過(guò)X射線膠片或CCD成像儀被捕獲。
魔術(shù)師的出場(chǎng)由您來(lái)選擇
翊圣目前擁有的4種ECL產(chǎn)品,各具特色,能夠*用戶的免疫印跡應(yīng)用需求。
表1 ECL試劑選擇指南
Yeasen | Enhanced ECL 增強(qiáng)型 | Super ECL 超敏型 | SuperDura 持久型 | MaxiSignal zui高靈敏度型 |
適用樣本 | 靶點(diǎn)豐度較高,常規(guī)蛋白樣本 | 靶點(diǎn)豐度低,樣本有限 | 靶點(diǎn)豐度較低,樣本有限 | 靶點(diǎn)豐度極低,樣品珍貴 |
檢測(cè)靈敏度 | 中等皮克級(jí) | 低皮克級(jí) | 中等飛克級(jí) | 低飛克級(jí) |
信號(hào)持續(xù)時(shí)間 | < 2 h | < 12 h | < 24 h | < 8 h |
適用檢測(cè)系統(tǒng) | 所有試劑均適用X射線膠片,CCD成像儀 | |||
一抗稀釋濃度 | 1:1000-1:4000 | 1:1000-1:10000 | 1:1000-1:50000 | 1:5000-1:100000 |
二抗稀釋濃度 | 1:1000-1:4000 | 1:2000-1:10000 | 1:50,000-1:250,000 | 1:100,000-1:500,000 |
推薦用膜 | NC膜 | NC膜或PVDF膜 | NC膜或PVDF膜 | NC膜或PVDF膜 |
存儲(chǔ)穩(wěn)定性 | 室溫1年 | 室溫1年 | 室溫1年 | 4℃ 1年,室溫半年 |
優(yōu)勢(shì) | 同一級(jí)別靈敏度中信號(hào)zui強(qiáng) | ,適用于多數(shù)WB實(shí)驗(yàn) | 長(zhǎng)信號(hào)持續(xù)時(shí)間,極其適用于多次曝光 | 靈敏度,極其適用于痕量蛋白檢測(cè) |
【注】:推薦抗體稀釋濃度為抗體儲(chǔ)液濃度為1 mg/mL時(shí)的稀釋濃度。
ECL大師履歷
Yeasen ECL試劑對(duì)比其他品牌同級(jí)別產(chǎn)品具有更佳的使用效果。
圖1 Yeasen ECL超敏型底物Super與品牌T同級(jí)別底物Pico檢測(cè)效果比對(duì)
圖2 Yeasen ECLzui高靈敏度型底物MaxiSignal與品牌T同級(jí)別底物West Femto檢測(cè)效果比對(duì)
圖3 Yeasen ECL持久型底物SuperDura與品牌T同級(jí)別底物West Dura檢測(cè)效果比對(duì)
觀眾好評(píng)
好表演,反饋杠杠的!
1) 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所
圖4 Yeasen ECL超敏型底物Super相對(duì)品牌M同級(jí)別底物Crescendo,檢測(cè)靈敏度更高
2)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院
圖5 使用Yeasen ECL增強(qiáng)型底物Enhanced檢測(cè)目的蛋白,獲得清晰銳利的條帶
巡演
[1] Ren C F, Zhao Y X, Hou C F, et al. Expression of soluble programmed death-1 protein in peripheral blood regulatory T cells and its effects on rheumatoid arthritis progression[J]. Molecular Medicine Reports, 2017, 15(1): 460-466.
[2] Zhu T, Zhao Y, Wu Y, et al. The Staphylococcus epidermidis gdpS regulates biofilm formation independently of its protein-coding function[J]. Microbial Pathogenesis, 2017, 105: 264-271.
出場(chǎng)費(fèi)用
Yeasen致力于為您提供的產(chǎn)品。
圖6 Yeasen ECL產(chǎn)品與其他品牌同級(jí)別產(chǎn)品價(jià)格比對(duì)
戲后觀眾指南
遇到的問(wèn)題 | 原因分析 | 推薦解決方法 |
膠片出現(xiàn)反影 | 反應(yīng)系統(tǒng)中HRP量過(guò)多 | 稀釋HRP標(biāo)記物 |
膠片出現(xiàn)棕色或黃色條帶 | ||
熒光猝滅 | ||
操作時(shí)間過(guò)長(zhǎng),膜逐漸干掉 | 避免膜干掉 | |
保鮮膜、顯影液或定影液污染 | 養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣 | |
反應(yīng)系統(tǒng)中HRP量過(guò)少 | 增加HRP標(biāo)記物 | |
膠片無(wú)條帶顯現(xiàn)或者信號(hào)較弱 | 轉(zhuǎn)膜的效率低 | 提高轉(zhuǎn)膜效率,用預(yù)染Marker判斷。 |
抗原、抗體量少或不匹配 | 增加抗原/抗體量或選擇合適抗原/抗體 | |
X光膠片有問(wèn)題 | 曝光后X光譜全黑(而非透明色),則表明膠片已*曝光,使用新的X光片 | |
顯影/定影液有問(wèn)題 | 可預(yù)先曝光一張膠片進(jìn)行判斷,如有問(wèn)題當(dāng)換用新的顯影/定影液 | |
反應(yīng)系統(tǒng)中HRP量過(guò)多 | 稀釋HRP標(biāo)記物 | |
高背景 | 一抗二抗?jié)舛忍?/span> | 降低抗體濃度,延長(zhǎng)封閉時(shí)間 |
抗體未清洗干凈 | 增加洗膜次數(shù) | |
封閉不* | 優(yōu)化封閉條件 | |
使用錯(cuò)誤的封閉劑 | 使用其他的封閉劑 | |
過(guò)度曝光 | 降低曝光時(shí)間 | |
抗體特異性差 | 更換抗體 | |
反應(yīng)系統(tǒng)中HRP量過(guò)多 | 稀釋HRP標(biāo)記物 | |
條帶有空斑 | 抗原以及二抗的濃度過(guò)高 | 稀釋樣品重新跑膠,也可將混合好的顯色液冰浴后,加到膜上即刻快速顯色。 |
帶型不規(guī)則 | 轉(zhuǎn)膜有氣泡或甲醇(對(duì)于PVDF膜)水化不均勻 | 優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件。 |
膠片出現(xiàn)斑點(diǎn) | HRP標(biāo)記物聚集體 | 0.2μm膜過(guò)濾HRP標(biāo)記物 |
非特異性條帶 | 反應(yīng)系統(tǒng)中HRP量過(guò)多 | 稀釋HRP標(biāo)記物 |
SDS引起蛋白非特異性結(jié)合 | 實(shí)驗(yàn)流程中不使用SDS | |
抗體特異性差 | 更換抗體 | |
封閉不足 | 增加封閉時(shí)間或使用其他封閉劑 |
預(yù)約信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
Super ECL Detection Reagent 化學(xué)發(fā)光超敏顯色試劑盒 | 36208ES60 | 100 mL | 228.00 |
36208ES76 | 500 mL | 828.00 | |
Enhanced ECL Chemiluminescent Substrate Kit 增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒 | 36222ES60 | 100 mL | 325.00 |
36222ES76 | 500 mL | 1255.00 | |
SuperSignal SuperDura Extended Duration Substrate 持久性化學(xué)發(fā)光底物 | 36223ES10 | 10 mL | 267.00 |
36223ES60 | 100 mL | 1557.00 | |
36223ES70 | 200 mL | 2857.00 | |
36223ES76 | 500 mL | 5257.00 | |
SuperSignal MaxiSignal Maximum Sensitivity Substrate zui高靈敏度化學(xué)發(fā)光底物 | 36224ES10 | 10 mL | 287.00 |
36224ES60 | 100 mL | 1757.00 | |
36224ES70 | 200 mL | 3257.00 | |
36224ES76 | 500 mL | 5857.00 |
其余大師推薦
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
X射線攝影暗盒(小號(hào)) | 36243ES35 | 5×7英寸 | 129.00 |
X射線攝影暗盒(中號(hào)) | 36243ES58 | 8×10英寸 | 169.00 |
X光片 | 36209ES01 | 1盒(100片) | 223.00 |
Fixing Powder 定影粉 | 36210ES01 | 包 | 23.00 |
Developing Powder 顯影粉 | 36211ES01 | 包 | 23.00 |
Primary & Secondary Antibody Diluent for WB WB一抗二抗稀釋液 | 36206ES60 | 100 mL | 147.00 |
36206ES76 | 500 mL | 538.00 |