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膠原酶
——動物組織消化利器
圖1:膠原酶
產(chǎn)品介紹
膠原酶(Collagenase)是一類能夠特異性的識別Pro-X-Gly-Pro序列(該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中,很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中),并切割該序列中的中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之間的肽鍵的肽鏈內(nèi)切酶,且能夠水解結(jié)締組織中的膠原蛋白。
許多蛋白酶都能水解單鏈和變性的膠原多肽,但膠原酶是唯——種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶,其廣泛存在結(jié)締組織內(nèi),其中有效的膠原酶是由厭氧細菌溶組織梭菌(Clostridium histolyticum)分泌的“粗”膠原酶。
翊圣膠原酶來源于溶組織梭菌(Clostridium histolyticum),是一種酶“粗”提物,不僅含有能夠降解天然膠原和網(wǎng)狀纖維的膠原酶,還含有其他的一些蛋白酶如多糖酶、脂酶等,能夠有效水解結(jié)締組織和上皮組織細胞外基質(zhì)內(nèi)的其他蛋白、多糖和脂質(zhì)等,因此更適用于組織消化。
目前市面上的細菌膠原酶依據(jù)膠原酶的活性差異主要分為5種類型:膠原酶I型,II型,III型,IV型和V型等。
膠原酶的選擇
產(chǎn)品名稱 | 外觀 | 酶活 | 應(yīng)用范圍 |
膠原酶I(Type I Collagenase) | 棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末 | ≥125 U/mg solid | 包含(膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶)活性,用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細胞的分離。 |
膠原酶II(Type II Collagenase) | 棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末 | ≥125 U/mg solid | 含更多的梭菌蛋白酶活性,適用于肝臟,骨,甲狀腺,心臟和唾液腺組織細胞的分離 |
膠原酶III(Type III Collagenase) | 棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末 | ≥100 U/mg solid | 含低蛋白水解活性,對消化組織中連接部分較為有效,常用于哺乳動物組織細胞解離 |
膠原酶IV(Type IV Collagenase) | 棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末 | ≥125 CDU/mg solid* | 含低胰酶活性,常用于胰島和受體完整性的細胞制備 |
膠原酶V(Type V Collagenase) | 棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末 | ≥125 CDU/mg solid* | 含至少7中蛋白酶成分,可用于胰腺小島組織的分離,將結(jié)締組織分離成單個細胞 |
*CDU = collagen digestion units
產(chǎn)品特性
1、消化效率高:溶組織梭菌的酶粗提物,對組織消化效率高。
2、依賴于活化劑:膠原酶需要借助二價陽離子如Ca2+、 Zn2+等活化酶的活性。
3、受抑制劑影響:膠原酶的抑制劑有EDTA 、EGTA等;二是重金屬離子(Hg2+,Pb2+,Cd2+);還有一些化學(xué)試劑如Cysteine、histidine、DTT、2-mercaptoethanol、o-phenanthroline等對膠原酶也有抑制作用。
4、耐干擾性強:膠原不會受到培養(yǎng)細胞所用的血清影響。
更具競爭力的價格
圖2:價格對比圖
FAQ
一、 使用方法:在Hank’s,Earle’s 或者其他平衡鹽溶液中溶解,推薦使用工作濃度0.05 % ~0.5 % (w/v)
二、 存儲溫度: 2-8℃
三、 使用建議:
①對于膠原蛋白結(jié)構(gòu)和生物合成研究,常使用更高純度的膠原酶制劑,不含其他蛋白水解活性。
②對于組織解離,常使用粗制膠原酶制劑,例如彈性蛋白酶,胰蛋白酶或木瓜蛋白酶等。
四、常見問題:
1、實驗過程中消化作用不佳
①如果是酶活不強或鈣離子不足導(dǎo)致,應(yīng)在低溫干燥條件下儲存膠原酶,膠原酶溶液分裝后凍存
②如果是鈣離子不足導(dǎo)致,應(yīng)將膠原酶溶液中鈣離子濃度設(shè)置為5mM。
2、使用過程中出現(xiàn)細胞死亡
①如果是蛋白酶過量,應(yīng)減少蛋白酶接觸時間或是加入白蛋白或滅活血清
②如果是pH 改變應(yīng)使用緩沖液(如HBSS);經(jīng)常檢查并重新調(diào)節(jié)pH
③如果氧氣太少,應(yīng)給消化液通無菌空氣
3、實驗中出現(xiàn)細胞受損
如果是蛋白酶過多導(dǎo)致,應(yīng)減少蛋白酶用量或是加入白蛋白或滅活血清
訂購信息
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格(元) |
40507ES60 | Collagenase I 膠原酶I型 | 100mg | 279.00 |
40508ES60 | Collagenase II 膠原酶II型 | 100mg | 279.00 |
40509ES60 | Collagenase III 膠原酶III型 | 100mg | 528.00 |
40510ES60 | Collagenase IV膠原酶IV型 | 100mg | 279.00 |
40511ES60 | Collagenase V膠原酶V型 | 100mg | 528.00 |
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HB20190905