近年來(lái)，造成人類感染的病原微生物日益復(fù)雜，種類增多，抗菌藥物濫用致使細(xì)菌耐藥，病原微生物已成為關(guān)注的焦點(diǎn)。據(jù)WHO統(tǒng)計(jì)，在中國(guó)，感染性疾病占所有疾病的50%以上。面對(duì)重癥感染患者，能否快速確認(rèn)感染病原體，成為后續(xù)對(duì)癥治療的關(guān)鍵，基于宏基因組新一代測(cè)序技術(shù)（metagenomics next-generation sequencing, mNGS）為解決這一問(wèn)題提供了一個(gè)可能的突破方向。
      mNGS具有不依賴于傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)，直接對(duì)臨床樣本中的核酸進(jìn)行高通量測(cè)序，能夠快速、客觀的檢測(cè)臨床樣本中的較多病原微生物的特點(diǎn)。
      mNGS的檢測(cè)流程可以大致分為5個(gè)步驟：核酸提取、文庫(kù)構(gòu)建、上機(jī)測(cè)序、生信分析與報(bào)告解讀。

圖1： mNGS檢測(cè)流程圖（Gu W et al. Annu Rev Pathol-Mech.2019.14(1), 319）

Yeasen為 mNGS濕實(shí)驗(yàn)部分（核酸提取，文庫(kù)構(gòu)建）提供完整解決方案：

解決方案一：核酸提取系列

      Yeasen MolPure®柱式核酸提取系列試劑盒采用MolPure® DNA/RNA Column和新型的溶液體系，適用于從各種反應(yīng)體系樣品、多種動(dòng)植物樣本、菌體等復(fù)雜樣本中高效提取和純化高純度、高質(zhì)量的核酸?？芍苯佑糜诟鞣N分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1）適用樣本廣：用于動(dòng)物組織、血漿、血清、淋巴液、培養(yǎng)上清、分泌物、拭子、糞便、牛奶、尿液等樣品；
2）合并提?。和瑫r(shí)提取樣本的DNA與RNA；
3）提取純度高：采用硅基質(zhì)材料的離心吸附柱，可提取純度高的病毒RNA/DNA，質(zhì)量穩(wěn)定可靠；
4）滿足多種下游應(yīng)用：可適用于各種下游應(yīng)用實(shí)驗(yàn)，如酶切、PCR、反轉(zhuǎn)錄和RT-PCR、NGS等。

產(chǎn)品性能

1. 分別驗(yàn)證小鼠組織、細(xì)菌和糞便中核酸提取的效率，結(jié)果顯示Yeasen核酸提取效率高于競(jìng)品公司。

 
圖2：小鼠組織（左）細(xì)菌和糞便（右）DNA提取瓊脂糖膠圖，A表示Yeasen試劑盒，F(xiàn)、T、O表示競(jìng)品公司

產(chǎn)品詳情

解決方案二：DNA文庫(kù)構(gòu)建系列

     Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit酶切法DNA建庫(kù)試劑盒，擺脫了繁瑣的超聲流程，操作簡(jiǎn)便化，片段化/末修加A可在一步操作中完成，針對(duì)不同樣本(含F(xiàn)FPE)均可以獲得高質(zhì)量文庫(kù)，尤其滿足病原樣本快速建庫(kù)需求，亦是自動(dòng)化平臺(tái)建庫(kù)的首-選。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1）實(shí)驗(yàn)流程更精簡(jiǎn)：片段化/末修/加A一步完成，大大縮減建庫(kù)時(shí)間；
2）樣本適用范圍廣：適用于痰液，腹水，腦脊液，F(xiàn)FPE等各類樣本；
3）適用場(chǎng)景更廣泛：自動(dòng)化建庫(kù)平臺(tái)首-選；
4）酶切可控時(shí)間長(zhǎng)：僅需調(diào)整酶切時(shí)間即可得到目標(biāo)片段；
5）耐抑制物能力強(qiáng)：對(duì)于復(fù)雜樣本中的一些抑制物有更好的耐受能力。

性能展示

1. 不同模板的質(zhì)量不均一，采用不同的酶切時(shí)間可獲得優(yōu)質(zhì)文庫(kù)。

產(chǎn)品詳情

解決方案二：RNA文庫(kù)構(gòu)建系列

      Hieff NGS® Dual-mode RNA Library Prep Kit是翊圣生物推出針對(duì)微量RNA構(gòu)建試劑盒，可以銜接市面上mRNA純化試劑盒或rRNA去除試劑盒構(gòu)。本試劑盒提供的所有試劑都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制和功能驗(yàn)證，zui大程度上保證了文庫(kù)構(gòu)建的穩(wěn)定性和重復(fù)性。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1）操作簡(jiǎn)便：二鏈合成，末修加A合并為一步，操作更加簡(jiǎn)便；
2）適用范圍廣：適用于pg級(jí)別的微量樣本建庫(kù)；
3）病原微生物檢測(cè)：適用于不同來(lái)源的病原微生物檢測(cè)（痰液，肺泡灌洗液，腦脊液等低濃度樣本）；
4）產(chǎn)品穩(wěn)定：不同生產(chǎn)批次間穩(wěn)定。

性能展示
1.選取來(lái)源于不同人體的痰液和肺泡灌洗液提取的RNA樣本，經(jīng)rRNA去除之后進(jìn)行RNA文庫(kù)構(gòu)建，表明低濃度樣本亦可高效建庫(kù)。

產(chǎn)品詳情

解決方案三：文庫(kù)定量系列

dsDNA Assay Kit for Qubit®是Yeasen開(kāi)發(fā)的專門用于Qubit®熒光儀或熒光酶標(biāo)儀的試劑盒，線性范圍0.2-100 ng，即使在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下，也可以選擇性的檢測(cè)dsDNA，且耐受較高濃度的蛋白質(zhì)、鹽類、洗滌劑等污染物。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1）簡(jiǎn)便：實(shí)驗(yàn)操作與原裝品牌一致，5min之內(nèi)出結(jié)果；
2）靈敏：準(zhǔn)確定量0.2-100ng樣本；
3）準(zhǔn)確：包含F(xiàn)FPE、cfDNA等樣本在內(nèi)的測(cè)試誤差均小于10%；
4）穩(wěn)定：嚴(yán)格批次間穩(wěn)定性指控。

性能展示

1. 可準(zhǔn)確定量dsDNA濃度在0.2-100ng的樣本，且不論在低濃度區(qū)間（0-1ng）或高濃度區(qū)間都能準(zhǔn)確定量。測(cè)量值與實(shí)際值誤差：1%-10% ；與原裝Life實(shí)際定量誤差：1%-15%。

圖3：  dsDNA Assay Kit for Qubit®測(cè)試準(zhǔn)確性。樣品使用標(biāo)準(zhǔn)品，每個(gè)測(cè)試3個(gè)平行，CV≤5%。

產(chǎn)品詳情

解決方案四：文庫(kù)純化系列

       Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理，配合精心優(yōu)化過(guò)的緩沖體系，可用于二代測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程中的DNA///片段分選、純化。操作方式與AMPure XP Beads相同，片段回收效率和文庫(kù)大小分布亦與AMPure XP Beads高度吻合。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1）操作簡(jiǎn)便：無(wú)縫替代XP，實(shí)驗(yàn)操作、文庫(kù)大小和產(chǎn)量與XP*一致；
2）純化分選效果優(yōu)異：純化回收效率高達(dá)90%，精準(zhǔn)分選；
3）適用多種樣本：適用于FFPE、糞便、gDNA、微生物、血液等樣本的純化與分選；
4）通用性廣：兼容各種品牌建庫(kù)試劑盒；
5）品質(zhì)穩(wěn)定：不同生產(chǎn)批次間無(wú)差異。

性能展示

1. 相同的分選比例，Yeasen磁珠與XP磁珠分選效果相當(dāng)。

圖4： 磁珠分選精度與XP對(duì)比示意圖

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