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Hifair®系列逆轉(zhuǎn)錄酶

2021-7-31  閱讀(424)

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Hifair®系列逆轉(zhuǎn)錄酶

                               ——助力您合成高質(zhì)量cDNA


Hifair
®系列逆轉(zhuǎn)錄酶是在M-MLV Reverse Transcriptase基礎(chǔ)上改造的逆轉(zhuǎn)錄酶,其熱穩(wěn)定性大幅度提高,可耐受60℃的反應(yīng)溫度,適合具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄。同時(shí), Hifair®系列逆轉(zhuǎn)錄酶缺失了RNaseH活性,提高了其延伸能力,最長(zhǎng)可合成19.8 kb的cDNA。此外,該酶增強(qiáng)了與模板的親和力,非常適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉(zhuǎn)錄。




產(chǎn)品選擇指南




產(chǎn)品形式

產(chǎn)品名稱

引物

適用實(shí)驗(yàn)類型

產(chǎn)品特點(diǎn)

單酶

Hifair® II Reverse Transcriptase /11110ES

PCR/qPCR

A. 逆轉(zhuǎn)錄條件:42℃,30 min
總RNA使用范圍:1 ng-5 μg
合成cDNA長(zhǎng)度:10 kb

Hifair® III Reverse Transcriptase/11111ES

B. 逆轉(zhuǎn)錄條件:55℃,15 min

總RNA使用范圍:10 pg-5 μg

合成cDNA長(zhǎng)度:19.8 kb

酶和buffer 分開

Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit/11119ES/11121ES

單獨(dú)成管的
oligodT、
random primer


PCR/qPCR


同A

Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit/11139ES

同B

酶和buffer預(yù)混

Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR/11120ES/11123ES

按比例預(yù)混的
oligodT、
random primer

qPCR

C. 逆轉(zhuǎn)錄條件:42℃,30 min

總RNA使用范圍:1 ng-5 μg

2×預(yù)混液

Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR/11141ES

D. 逆轉(zhuǎn)錄條件:55℃,15 min

總RNA使用范圍:10 pg-5 μg

4×預(yù)混液,可投入更大體積模板





產(chǎn)品性能


1

可耐受60℃反應(yīng)溫度,適合具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)




ll1.jpg 

圖1. 以500 ng 293T細(xì)胞的總RNA為模板, 使用11139ES在42℃-65℃下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。取1 μL cDNA為模板, 使用Hieff® Canace Gold 高保真酶 (Cat 10148ES)擴(kuò)增TFRC基因(4.4 kb)。M:1 kb DNA ladder.




2

*的延伸性能,可合成19.8 kb的cDNA




 

圖2. 以500 ng 293T細(xì)胞的總RNA為模板,oligodT為引物,使用11139ES合成cDNA。 取1 μL cDNA為模板,使用Hieff® Canace Gold 高保真酶(Cat 10148ES)擴(kuò)增DY1C1N1基因(19.9 kb)的5’的500 bp。M: 1 kb DNA ladder.




3

出色的逆轉(zhuǎn)錄效率,適合不同 GC 含量、不同表達(dá)豐度的基因




 

圖3. 以300 ng 293T細(xì)胞的總RNA為模板, 使用11141ES、T品牌合成cDNA。取1 μL cDNA為模板, 使用Hieff UNICON® Power qPCR 預(yù)混液 (Cat

.11195ES)擴(kuò)增20個(gè)不同GC含量(25-65%)、不同表達(dá)豐度的基因。




4

線性檢測(cè)范圍廣,Total RNA 10 pg-5 μg




ll4.jpg 

圖4. 以10 pg-5 μg的293T細(xì)胞的總RNA為模板,使用11141ES合成cDNA。取1 μL cDNA為模板,使用Hieff UNICON® Power qPCR 預(yù)混液 (Cat .11195ES)擴(kuò)增PTTG1基因。




相關(guān)產(chǎn)品




產(chǎn)品定位

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

單酶

Hifair® II Reverse Transcriptase

11110ES92/93

高靈敏度單酶

Hifair® III Reverse Transcriptase

11111ES92/93

Kit

Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

11119ES60

Kit(含gDNA去除步驟)

Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus)

11121ES60

高靈敏Kit(含gDNA去除步驟)

Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus)

11139ES60

預(yù)混液

Hifair® Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix

11120ES60

預(yù)混液(含gDNA去除步驟)

Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)

11123ES60

高靈敏預(yù)混液(含gDNA去除步驟)

Hifair® III1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)

11141ES60




YEASEN逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品已發(fā)表文獻(xiàn)(部分)




[1] Liu C X, Li X, Nan F, et al. Structure and degradation of circular RNAs regulate PKR activation in innate immunity[J]. Cell, 2019, 177(4): 865-880. e21.IF31.398)

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[3] Wang J., et al., The mycobacterial phosphatase PtpA regulates the expression of host genes and promotes cell proliferation[J]. Nat Commun. 2017 Aug 15;8(1):244.IF 12.353)

[4] Zhou L, Hou B, Wang D, et al. Engineering Polymeric Prodrug Nanoplatform for Vaccinatio Immunotherapy of Cancer[J]. Nano Letters, 2020.IF12.279)

[5] Xu L, Xu S, Sun L, et al. Synergistic action of the gut microbiota in environmental RNA interference in a leaf beetle[J]. Microbiome, 2021, 9(1). (IF 11.607)


                                                                            HB210926




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