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什么是UCF·ME® UltraNuclease？
UltraNuclease，全能核酸酶，又稱為廣譜核酸酶、非限制性核酸內(nèi)切酶。能夠在多種實(shí)驗(yàn)條件下切割和降解各種形式的DNA和RNA，廣泛用于去除生物制品中的核酸。
UltraNuclease 生產(chǎn)全程均在GMP生產(chǎn)車間完成，質(zhì)檢方法均嚴(yán)格按照藥典中的方法進(jìn)行。該酶無蛋白酶活性、不含內(nèi)毒素和任何病毒污染物，適用于各種應(yīng)用場景，可適用于各種生物制品工業(yè)生產(chǎn)過程中殘留核酸的去除。
廣闊的應(yīng)用前景
1、降低細(xì)胞/細(xì)菌裂解時核酸釋放產(chǎn)生的黏度，并且適用于任何裂解方式。
2、在大規(guī)模的層析純化時，避免由于大量的核酸吸附在層析介質(zhì)上降低蛋白質(zhì)的有效載量從而降低純化得率。
3、在 ELISA、二維電泳和免疫印跡分析中，提高分辨率和回收率。
4、消除重組蛋白、疫苗等生物制品的外源性核酸殘留。
產(chǎn)品特性
1、酶的比活≥1.5×106 U/mg（通用底物絕對定量法）
酶活*：在37℃，pH 8.0反應(yīng)條件，2.625 mL反應(yīng)體系中，在30 min內(nèi)使△A260吸收值變化1.0（相當(dāng)于*消化37 μg鮭魚精DNA成為寡核苷酸）所用的酶量定義為一個活性單位（U）
2、酶的純度≥99%（HPLC）
3、不同反應(yīng)條件對酶活的影響（部分?jǐn)?shù)據(jù)）
為了探索UltraNuclease最合適的操作條件，我們研究了在多種緩沖體系下對酶活性的影響以下僅展示部分?jǐn)?shù)據(jù)，如需完整數(shù)據(jù)，請聯(lián)系我們。
4、儲存及凍融穩(wěn)定性
-20℃、4℃儲存一個月，酶活幾乎無變化，37℃儲存一個月，酶活降低約30%。
-80℃~25℃反復(fù)凍融10次，酶活性不受影響。
5、質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)符合GMP生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)
檢測項(xiàng)目 | 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) | 檢測方法 |
酶活 | 250-300 U/uL | 通用底物法 |
比活 | ≥1.5×106 U/mg | 通用底物法 |
蛋白純度 | ≥99% | SDS-PAGE |
蛋白酶 | 符合要求 | 通用底物法 |
細(xì)菌內(nèi)毒素 | 符合要求 | 凝膠法 |
宿主蛋白 | 陰性 | ELISA法 |
宿主DNA | 陰性 | qPCR法 |
無菌檢測 | 無菌生長 | 通則1101 |
病原體檢測 | 陰性（不得檢出） | 參照內(nèi)部方法 |
支原體檢測 | 陰性（不得檢出） | 參照內(nèi)部方法 |
重金屬檢測 | 符合要求 | 通則0821 |
UltraNuclease ELISA kit (全能核酸酶檢測ELISA kit)
在正常的純化步驟中，全能核酸酶作為雜質(zhì)很容易被去除。為了檢測全能核酸酶的殘留，翌圣研發(fā)了配套的UltraNuclease ELISA kit，能夠準(zhǔn)確檢測樣本中全能核酸酶的殘留量，該試劑盒在線性、重復(fù)性、回收率及特異性等方面均表現(xiàn)優(yōu)異。
1、線性范圍：0.047~3 ng/mL，R2＞0.99
2、批次間重復(fù)性好
在樣本中加入固定濃度的UltraNuclease，用3個不同批次的ELISA試劑盒進(jìn)行檢測，在核酸酶濃度3~0.186 ng/mL之間，檢測回收率均在70%~110%之間，CV＜10%。
3、模擬樣本回收率
對于不同濃度UltraNuclease核酸酶樣本回收率均在70%~130%之間，且優(yōu)于其他品牌。
4、特異性強(qiáng)
我們評估了全能核酸酶抗體與8種常見樣本的非特異性結(jié)合，干擾組與對照組結(jié)果重合，未見干擾。
* 表示與陰性相比有顯著性差異；NS：表示與陰性結(jié)果無顯著差異
常見問題FAQ
1、在哪一步中加入 UltraNuclease？
這取決于您處理的樣本。在病毒純化時，一般在病毒澄清后加入；大腸桿菌蛋白純化時，可以在菌體裂解時就加入；在處理細(xì)胞結(jié)團(tuán)問題時，可以直接加入培養(yǎng)基中與細(xì)胞共培養(yǎng)。
2、如果反應(yīng)溫度無法達(dá)到37℃，該如何使用？
UltraNuclease的酶活性受到溫度、處理時間、酶活單位的影響，如果溫度無法達(dá)到37℃，可以適當(dāng)添加酶的用量，或者延長孵育時間。
3、UltraNuclease是否與蛋白酶抑制劑兼容？
可以兼容，但需要注意的是許多蛋白酶抑制劑含有EDTA。EDTA 開始高于1mM時，EDTA將抑制部分核酸酶的活性。
4、如何去除 UltraNuclease？
可通過 TFF、透析及色譜柱等方法將其去除。
5、UltraNuclease ELISA kit可否用于其他品牌全能核酸酶殘留的檢測？
我們不建議這樣做。ELISA kit *是基于UltraNuclease開發(fā)，能夠?qū)?/span>UltraNuclease進(jìn)行準(zhǔn)確定量。其他品牌的全能核酸酶在序列、生產(chǎn)工藝等方面可能與UltraNuclease有所不同，檢測結(jié)果可能不準(zhǔn)確。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
UCF.ME® UltraNuclease GMP-grade 全能核酸酶 | 20157ES25/60/80/90 | 25KU/100 KU/1MU/5MU |
UltraNuclease ELISA kit | 36701ES59 | 96T |
