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1分鐘解鎖兩代轉(zhuǎn)染試劑的差異
導(dǎo)讀
圖1. 脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)（源于Nature）
a.簡(jiǎn)單的脂質(zhì)體，由磷脂雙分子層構(gòu)成的脂質(zhì)囊泡
b.“隱身"脂質(zhì)體，通過(guò)PEG修飾實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)循環(huán)
c.大多數(shù)陽(yáng)離子脂質(zhì)體具有洋蔥樣結(jié)構(gòu)，DNA夾在陽(yáng)離子膜之間
d.Kubitschke等人報(bào)道的新型脂質(zhì)體，由花瓶狀的脂質(zhì)分子(分子兩側(cè)有疏水鏈和親水鏈)組成雙分子層
同時(shí)，人們也一直在尋找更有效、毒性小，同時(shí)對(duì)研究影響也小的轉(zhuǎn)染試劑。由于脂質(zhì)類轉(zhuǎn)染試劑對(duì)細(xì)胞的毒性是由其脂質(zhì)特性決定的，眾多的研究者和生物公司將新一代轉(zhuǎn)染試劑的開發(fā)聚焦在非脂質(zhì)體的聚合物上。
圖2. 陽(yáng)離子脂質(zhì)體與陽(yáng)離子聚合物介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染
◆ 不含疏水部分而*溶于水
◆ 方便地進(jìn)行化學(xué)修飾
◆ 不像脂質(zhì)體一樣破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)
◆ 濃縮DNA，將DNA運(yùn)送到細(xì)胞內(nèi)，并其在細(xì)胞核內(nèi)釋放
◆ 細(xì)胞毒性很低，很穩(wěn)定
◆ 不被血清清除
◆ 毒性低、成本低、免疫原性低
◆ 可將外源基因轉(zhuǎn)染到懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞中
圖3. PEI轉(zhuǎn)染DNA示意圖（源于網(wǎng)絡(luò)）
PEI是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子，每相隔二個(gè)碳原子，即每第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿"(proton sponge)體。自1995年P(guān)EI被用于DNA轉(zhuǎn)染以來(lái)，就因其安全性和穩(wěn)定性而被廣泛應(yīng)用于科學(xué)研究和基因療法中。
圖4. PEI使用效果圖
a. PEI 40000轉(zhuǎn)染GFP質(zhì)粒到貼壁細(xì)胞Hek-293，72h后，轉(zhuǎn)染效率達(dá)到90%（左圖）
b.PEI 40000轉(zhuǎn)染GFP質(zhì)粒到懸浮細(xì)胞CHO-K1，72h后，轉(zhuǎn)染效率達(dá)到80%（右圖）
目前翌圣提供了多種轉(zhuǎn)染試劑，客戶可根據(jù)轉(zhuǎn)染核酸的種類/貼壁細(xì)胞/懸浮細(xì)胞等條件，選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑，我們將在下期進(jìn)行說(shuō)明。
[1]. Andrzej W.Cwetsch, Bruno Pinto, Annalisa Savardi, Laura Cancedda. In vivo methods for acute modulation of gene expression in the central nervous system. Progress in Neurobiology. 2018 September 2018, Pages 69-85. doi.org/10.1016/j.pneurobio.2018.04.008
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40802ES02 | 0.5mL |
40802ES03 | 1.0mL | |
Hieff TransTMsiRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑 | 40806ES02 | 0.5mL |
40806ES03 | 1.0mL |
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