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1分鐘解鎖兩代轉染試劑的差異
導讀
圖1. 脂質(zhì)體結構（源于Nature）
a.簡單的脂質(zhì)體，由磷脂雙分子層構成的脂質(zhì)囊泡
b.“隱身"脂質(zhì)體，通過PEG修飾實現(xiàn)長循環(huán)
c.大多數(shù)陽離子脂質(zhì)體具有洋蔥樣結構，DNA夾在陽離子膜之間
d.Kubitschke等人報道的新型脂質(zhì)體，由花瓶狀的脂質(zhì)分子(分子兩側有疏水鏈和親水鏈)組成雙分子層
同時，人們也一直在尋找更有效、毒性小，同時對研究影響也小的轉染試劑。由于脂質(zhì)類轉染試劑對細胞的毒性是由其脂質(zhì)特性決定的，眾多的研究者和生物公司將新一代轉染試劑的開發(fā)聚焦在非脂質(zhì)體的聚合物上。
圖2. 陽離子脂質(zhì)體與陽離子聚合物介導的轉染
◆ 不含疏水部分而*溶于水
◆ 方便地進行化學修飾
◆ 不像脂質(zhì)體一樣破壞細胞結構
◆ 濃縮DNA，將DNA運送到細胞內(nèi)，并其在細胞核內(nèi)釋放
◆ 細胞毒性很低，很穩(wěn)定
◆ 不被血清清除
◆ 毒性低、成本低、免疫原性低
◆ 可將外源基因轉染到懸浮細胞或貼壁細胞中
圖3. PEI轉染DNA示意圖（源于網(wǎng)絡）
PEI是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡在任何pH下都能充當有效的“質(zhì)子海綿"(proton sponge)體。自1995年PEI被用于DNA轉染以來，就因其安全性和穩(wěn)定性而被廣泛應用于科學研究和基因療法中。
圖4. PEI使用效果圖
a. PEI 40000轉染GFP質(zhì)粒到貼壁細胞Hek-293，72h后，轉染效率達到90%（左圖）
b.PEI 40000轉染GFP質(zhì)粒到懸浮細胞CHO-K1，72h后，轉染效率達到80%（右圖）
目前翌圣提供了多種轉染試劑，客戶可根據(jù)轉染核酸的種類/貼壁細胞/懸浮細胞等條件，選擇合適的轉染試劑，我們將在下期進行說明。
[1]. Andrzej W.Cwetsch, Bruno Pinto, Annalisa Savardi, Laura Cancedda. In vivo methods for acute modulation of gene expression in the central nervous system. Progress in Neurobiology. 2018 September 2018, Pages 69-85. doi.org/10.1016/j.pneurobio.2018.04.008
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 |
Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉染試劑 | 40802ES02 | 0.5mL |
40802ES03 | 1.0mL | |
Hieff TransTMsiRNA/miRNA體外轉染試劑 | 40806ES02 | 0.5mL |
40806ES03 | 1.0mL |
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