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支原體檢測(cè)，快人一步

2022-6-2　　閱讀(275)

支原體檢測(cè)，快人一步

支原體（Mycoplasma）又稱霉形體，是目前發(fā)現(xiàn)小、簡(jiǎn)單的原核生物，在實(shí)驗(yàn)室和生物制品工廠在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中易受到支原體污染，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道：支原體污染在儲(chǔ)存細(xì)胞系中發(fā)生率約為 15%-35%，在生物制藥行業(yè)中約為0.44%-6.70%^[1]。支原體污染后能導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生多種變化（見(jiàn)圖1），因此如何快速的檢測(cè)支原體的存在不僅大大降低污染的風(fēng)險(xiǎn)，也能為開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)降本增效。

圖1：受支原體污染后細(xì)胞出現(xiàn)的相關(guān)狀態(tài)的改變

支原體檢測(cè)應(yīng)用場(chǎng)景

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，基于核酸檢測(cè)的方法廣泛應(yīng)用于各類實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中。等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的反應(yīng)過(guò)程在恒定的溫度下進(jìn)行，通過(guò)添加不同活性的酶和特異性引物來(lái)達(dá)到快速擴(kuò)增核酸的目的。

支原體檢測(cè)技術(shù)對(duì)比

與其他的核酸擴(kuò)增技術(shù)相比，LAMP反應(yīng)只需要把模板、引物、鏈置換型DNA合成酶、基質(zhì)等共同置于一定溫度下（60~65℃），經(jīng)一個(gè)步驟即可完成，且其擴(kuò)增效率*，可在15~60 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)10⁹~10¹⁰倍的擴(kuò)增；而且由于有著高度的特異性，只需很據(jù)擴(kuò)增產(chǎn)物的有無(wú)即可對(duì)靶基因序列的存在與否做出判斷，等溫?cái)U(kuò)增具有快速、高效、特異的優(yōu)點(diǎn)且無(wú)需專用的設(shè)備等優(yōu)勢(shì)。

圖2：LAMP 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增原理示意圖

一步法恒溫支原體檢測(cè)

Yeasen一步法恒溫支原體檢測(cè)試劑盒基于LAMP等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)開(kāi)發(fā)，無(wú)需特殊儀器，1h就可通過(guò)顏色判定檢測(cè)結(jié)果，在拷貝數(shù)提升的情況下反應(yīng)時(shí)間可縮短至30min。檢測(cè)靈敏度是普通恒溫檢測(cè)的1000倍并添加了防污染組分，杜絕假陽(yáng)性現(xiàn)象的發(fā)生。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

? 快速方便：一步完成操作，60 min獲取結(jié)果；

? 操作簡(jiǎn)單：無(wú)需借助殊儀器，一臺(tái)水浴鍋 or PCR儀；

? 肉眼觀察：顏色變化差異明顯，肉眼即可判別結(jié)果；

? 檢測(cè)范圍廣：精確檢測(cè)22種支原體，包括常見(jiàn)8種支原體。