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干貨 | 翌圣核酸提取寶典,建議先收藏!
硅膠膜離心柱法核酸提取原理
實驗流程操作簡單; 價格低廉; 提取濃度濃度高,純度高。
磁珠法核酸提取原理
運用納米技術(shù),對超順磁性納米顆粒的表面進(jìn)行表面修飾制備成超順磁性氧化硅納米磁珠。核酸結(jié)合到磁珠上主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用。在鹽離子和外加磁場的作用下,能從樣本中分離出核酸,并洗去非特異性吸附的雜質(zhì),得到純化后的核酸。
能夠?qū)崿F(xiàn)自動化、大批量的實驗操作; 操作簡單,用時短,如核酸提取10分鐘內(nèi)可以完成; 安全無毒,符合環(huán)保理念。
核酸提取常見的問題及解決方案
A260 / A280比值應(yīng)大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。
DNA提取中RNA 污染會增高260/280比值;
RNA提取中RNA降解會增高260/280比值;
蛋白的污染會降低A260 / A280比值。
較純凈的核酸A260/A230的比值一般在1.8-2.2之間;
酚、胍鹽、蛋白的污染會降低A260/A230的比值;
當(dāng)樣本核酸濃度太低時,A260/A230結(jié)果不準(zhǔn)確,會導(dǎo)致比值偏低;
當(dāng)樣本濃度低于50ng/µl,A260/ A280、A260/ A230比值波動非常大,應(yīng)謹(jǐn)慎對待!
提取的基因組DNA中鹽分濃度過高,請嚴(yán)格按照說明書操作;
提取的基因組DNA中含有乙醇。離心的速度和時間應(yīng)該嚴(yán)格遵循說明書要求進(jìn)行。
菌體裂解和中和過程中,劇烈混合造成基因組DNA斷裂所致。請溫和地進(jìn)行菌體的裂解和中和;
每一步嚴(yán)格按照說明書的操作時間;
細(xì)菌的質(zhì)量差,中有許多斷裂或降解而游離的基因組DNA,請使用生長良好的新鮮細(xì)菌。
篩選、選擇匹配的磁珠; 調(diào)節(jié)設(shè)備,增強(qiáng)外磁場; 放慢磁介入速度并延長磁吸時間。
縮短干燥時間;
增強(qiáng)混勻震蕩強(qiáng)度。
NO!通常情況下,磁珠法試劑盒給出的參考磁珠用量都是略微過量的。
過多的磁珠將無法均勻分散于液體中;
過量的磁珠會吸附更多的雜質(zhì);
過多的磁珠會吸附蛋白酶、溶菌酶等功能成分,導(dǎo)致整個提取效率降低。
NO!于不同磁珠適合的體系和用量是不同的,往往需要調(diào)整后才能獲得更好的提取效果。
有的磁珠適合偏酸性系列的試劑體系,有的適合偏堿性系列的試劑體系;
有的磁珠磁響應(yīng)性好但是沉降速度快,更適合磁棒式自動提取儀;
有的磁珠沉降速度慢但是磁響應(yīng)時間長,更適合移液式自動提取儀。
翌圣核酸提取TOP產(chǎn)品,活動等你來!
類別 | 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品應(yīng)用 |
柱式RNA提取 | 19221ES | MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit | 細(xì)胞/組織總RNA提取 |
19211ES | MolPure® TRIeasy Plus Total RNA Kit | 總RNA提取 | |
19231ES | MolPure® Cell RNA Kit | 培養(yǎng)細(xì)胞RNA提取 | |
磁珠法RNA提取 | 18600ES | MolPure® Magnetic Tissue/Cell Total RNA Kit | 組織/細(xì)胞RNA提取 |
柱式DNA提取 | 18700ES | MolPure® Cell/Tissue DNA Kit | 細(xì)胞/組織DNA提取 |
18815ES | MolPure® Soil DNA Kit | 土壤DNA提取 | |
18820ES | MolPure® Stool DNA Kit | 糞便DNA提取 | |
磁珠法DNA提取 | 18371ES | MolPure® Magnetic FFPE DNA Kit | FFPE DNA提取 |
18382ES | MolPure® Magnetic Circulating Cell-Free DNA Kit v2 | 血漿游離DNA提取 | |
18504ES | MolPure® Magnetic M4P1 Blood DNA Kit | 血液gDNA提取 | |
質(zhì)粒提取 | 19036ES | MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit | 無內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取 |
PCR產(chǎn)物回收 | 19101ES | MolPure® Gel Extraction Kit | 瓊脂糖凝膠回收 |