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翌圣ZymeEditor™精品盤點之脫氧核糖核酸酶I(DNase I)

2023-6-29  閱讀(182)

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脫氧核糖核酸酶I(Deoxyribonuclease I, DNase I),是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA的非特異性核酸內切酶。它能夠水解磷酸二酯鍵,產生含有5'-磷酸基團和3'-OH基團的單脫氧核苷酸和寡脫氧核苷酸。

DNase I最佳的工作pH范圍是7-8,其活性依賴于Ca2+,并可被二價金屬離子如Mn2+,Mg2+,Zn2+等激活。在Mg2+存在條件下,DNase I 隨機剪切雙鏈DNA的任意位點;Mn2+存在條件下,DNase I可在同一位點剪切DNA雙鏈,形成平末端,或1-2個核苷酸突出的粘末端。

 


圖1. DNase I在Mg2+以及Mn2+存在下可切割dsDNA原理圖

 

翌圣DNase I由ZymeEditor酶改造平臺重組表達而來,無RNase殘留,酶切效率高,作用底物類型廣,可應用于體外轉錄去除模板DNA、RNA建庫中去除rRNA、RNA提取或反轉錄前去除gDNA等多個場景。

 

 

產品特點

 

1、高酶切效率:37℃孵育可快速高效降解DNA;
2、無RNase殘留;
3、特異性強:特異性去除DNA,對RNA無影響;
4、底物多樣性:可作用于單鏈DNA、雙鏈DNA、染色質及DNA-RNA雜交鏈。

 

 

性能展示

 

 
 
 
1、無RNase殘留
將DNase I與底物RNA孵育,瓊脂糖凝膠電泳比較RNA譜帶變化。結果顯示翌圣DNase I無RNase殘留。

 

圖2. RNase殘留檢測 C:對照

 

 
 
 
2、高效去除模板DNA

分別使用翌圣及進口品牌T*、N*的DNase I進行體外轉錄中DNA模板去除,結果顯示翌圣DNase I的模板DNA去除效率與國際進口品牌相當。

 

圖3. 體外轉錄中模板DNA去除 C:不加DNase I對照;T*:進口品牌T*;N*:進口品牌N*;M:Marker

 

 
 
 
3、NGS建庫,產量與進口品牌相當

分別使用翌圣及進口品牌T*的DNase I進行rRNA去除,將純化后的RNA進行建庫,結果顯示翌圣與進口品牌的DNase I在進行rRNA去除后,RNA建庫產量相當。

圖4. DNase I用于RNA建庫 T*:進口品牌T*

 

 

翌圣DNase I 選擇指南

 

為滿足不同的應用需求,翌圣可提供牛胰腺提取來源及大腸桿菌重組表達兩種來源的DNase I,并可提供GMP級別DNase I,以滿足mRNA體外轉錄等應用。

產品來源

產品定位

應用

產品名稱

產品貨號

牛胰腺提取

普通

主要用于從蛋白制備物中去除DNA

Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas

10607ES

10608ES

重組表達

RNase Free

適用于從RNA和蛋白制備物中去除DNA

Recombinant DNase I (RNase-free)

10325ES

重組表達

GMP級, RNase Free

主要用于mRNA體外轉錄等

UCF.ME® Deoxyribonuclease I  (DNase I) GMP-grade

10611ES

 

 

 

翌圣ZymeEditor™

酶改造定制服務

 
 

翌圣ZymeEditor™是一個酶改造底層技術平臺,它基于翌圣生物多年在分子酶改造領域中的技術積累與知識拓展,該平臺已具備對多種酶的多種需求進行定向改造的能力。因此,ZymeEditor™平臺從2023年開始正式推出酶改造對外定制服務,可為各種應用領域(如醫(yī)藥、診斷、食品、化工等)的客戶提供全套酶改造服務,也可以單獨提供蛋白發(fā)酵及純化工藝開發(fā)優(yōu)化、規(guī)?;a服務,以滿足不同客戶的需求,助力產業(yè)升級。

 

 
 
 
定制服務流程

圖9.ZymeEditor™酶改造定制服務流程



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