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脫氧核糖核酸酶I（Deoxyribonuclease I, DNase I），是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA的非特異性核酸內(nèi)切酶。它能夠水解磷酸二酯鍵，產(chǎn)生含有5'-磷酸基團(tuán)和3'-OH基團(tuán)的單脫氧核苷酸和寡脫氧核苷酸。
DNase I最佳的工作pH范圍是7-8，其活性依賴于Ca2+，并可被二價金屬離子如Mn2+，Mg2+，Zn2+等激活。在Mg2+存在條件下，DNase I 隨機剪切雙鏈DNA的任意位點；Mn2+存在條件下，DNase I可在同一位點剪切DNA雙鏈，形成平末端，或1-2個核苷酸突出的粘末端。
圖1. DNase I在Mg2+以及Mn2+存在下可切割dsDNA原理圖
翌圣DNase I由ZymeEditor™酶改造平臺重組表達(dá)而來，無RNase殘留，酶切效率高，作用底物類型廣，可應(yīng)用于體外轉(zhuǎn)錄去除模板DNA、RNA建庫中去除rRNA、RNA提取或反轉(zhuǎn)錄前去除gDNA等多個場景。
圖2. RNase殘留檢測 C：對照
分別使用翌圣及進(jìn)口品牌T*、N*的DNase I進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄中DNA模板去除，結(jié)果顯示翌圣DNase I的模板DNA去除效率與國際進(jìn)口品牌相當(dāng)。
圖3. 體外轉(zhuǎn)錄中模板DNA去除 C：不加DNase I對照；T*：進(jìn)口品牌T*；N*：進(jìn)口品牌N*；M：Marker
分別使用翌圣及進(jìn)口品牌T*的DNase I進(jìn)行rRNA去除，將純化后的RNA進(jìn)行建庫，結(jié)果顯示翌圣與進(jìn)口品牌的DNase I在進(jìn)行rRNA去除后，RNA建庫產(chǎn)量相當(dāng)。
圖4. DNase I用于RNA建庫 T*：進(jìn)口品牌T*
為滿足不同的應(yīng)用需求，翌圣可提供牛胰腺提取來源及大腸桿菌重組表達(dá)兩種來源的DNase I，并可提供GMP級別DNase I，以滿足mRNA體外轉(zhuǎn)錄等應(yīng)用。
產(chǎn)品來源 | 產(chǎn)品定位 | 應(yīng)用 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 |
牛胰腺提取 | 普通 | 主要用于從蛋白制備物中去除DNA | Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas | 10607ES |
10608ES | ||||
重組表達(dá) | RNase Free | 適用于從RNA和蛋白制備物中去除DNA | Recombinant DNase I (RNase-free) | 10325ES |
重組表達(dá) | GMP級, RNase Free | 主要用于mRNA體外轉(zhuǎn)錄等 | UCF.ME® Deoxyribonuclease I (DNase I) GMP-grade | 10611ES |
翌圣ZymeEditor™
酶改造定制服務(wù)
翌圣ZymeEditor™是一個酶改造底層技術(shù)平臺，它基于翌圣生物多年在分子酶改造領(lǐng)域中的技術(shù)積累與知識拓展，該平臺已具備對多種酶的多種需求進(jìn)行定向改造的能力。因此，ZymeEditor™平臺從2023年開始正式推出酶改造對外定制服務(wù)，可為各種應(yīng)用領(lǐng)域（如醫(yī)藥、診斷、食品、化工等）的客戶提供全套酶改造服務(wù)，也可以單獨提供蛋白發(fā)酵及純化工藝開發(fā)優(yōu)化、規(guī)?；a(chǎn)服務(wù)，以滿足不同客戶的需求，助力產(chǎn)業(yè)升級。
圖9.ZymeEditor™酶改造定制服務(wù)流程
