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精品推薦 | 僅需5min！高效完成反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit是基于Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit開發(fā)的快速逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，適用于PCR擴(kuò)增以及RT-qPCR實(shí)驗(yàn)。與Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit相比，具有穩(wěn)定的檢出率、特異性、產(chǎn)量保證，且反轉(zhuǎn)錄總時(shí)長最快可低于6分鐘，大大縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit
※快速反轉(zhuǎn)：最快5分鐘左右即可完成第一鏈cDNA合成；
※檢出率高：10 pg-1 ug的RNA檢出率；
※高效合成：合成效率媲美進(jìn)口，最長可合成14kb大小的片段；
※應(yīng)用廣泛：可用于下游PCR或qPCR，亦可調(diào)整引物保證small RNA等樣本的反轉(zhuǎn)錄；
※示蹤便利：示蹤版包含無干擾、可視化藍(lán)色示蹤染料，提醒加樣進(jìn)度；
※穩(wěn)定性好：試劑盒可4℃存放14天，反轉(zhuǎn)產(chǎn)物可37℃保存7天，反復(fù)凍融50次。
圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，不同反轉(zhuǎn)錄時(shí)間處理的Ct值差值在0.2之內(nèi)。說明產(chǎn)品可在5分鐘內(nèi)完成反轉(zhuǎn)錄，反轉(zhuǎn)效果和長時(shí)間反轉(zhuǎn)效果持平。
圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，RNA 投入量為10 pg-1 μg時(shí)，11149ES均可反轉(zhuǎn)成功，保證定量結(jié)果。
圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，將得到的cDNA進(jìn)行PCR檢測。結(jié)果顯示，11149ES能夠滿足合成1 kb-14 kb長度的cDNA, 后續(xù)PCR有一定的試用場景。若需要直接反轉(zhuǎn)出10kb以上的片段，建議延長反轉(zhuǎn)錄時(shí)間至20-30分鐘，以保證最終片段的獲取。
圖. 測試顯示，加入一定量的示蹤劑成分，未影響產(chǎn)品的反轉(zhuǎn)錄效率，Ct值、熔解曲線峰值和TM值未受到負(fù)面影響。
圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用-20℃、4℃、25℃、37℃下分別儲(chǔ)存1、3、5、7天的11149ES進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，對(duì)得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，不同溫度不同時(shí)間存放的試劑盒定量結(jié)果的△Ct均在0.3范圍內(nèi)（△Ct于±0.5以內(nèi)，認(rèn)為兩者差異可忽略不計(jì)），具有良好的穩(wěn)定性。
圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES、進(jìn)口A品牌進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，其中11149ES不進(jìn)行g(shù)DNA去除步驟，將得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，進(jìn)口A品牌反轉(zhuǎn)時(shí)間為13分鐘， 11149ES反轉(zhuǎn)時(shí)間為5分鐘，不同產(chǎn)物定量顯示，11149ES的Ct更小或者接近進(jìn)口競品，說明11149ES 5分鐘反轉(zhuǎn)效率優(yōu)于或近似進(jìn)口A品牌的反轉(zhuǎn)錄效率。
圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES、進(jìn)口B品牌進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，其中11149ES不進(jìn)行g(shù)DNA去除步驟，得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示，進(jìn)口B品牌反轉(zhuǎn)時(shí)間為20分鐘，11149ES反轉(zhuǎn)時(shí)間為5分鐘，不同量底物定量顯示，11149ES的Ct更小或者接近進(jìn)口B品牌，說明11149ES 5分鐘反轉(zhuǎn)效率優(yōu)于或近似進(jìn)口B品牌的反轉(zhuǎn)錄效率。
樣本來源：菊花葉片
客戶評(píng)價(jià)：與某進(jìn)口品牌效果相似，擴(kuò)增常規(guī)大小的片段效果不錯(cuò)。
樣本來源：果*葉片
客戶評(píng)價(jià)：藍(lán)色很好看
樣本來源：水稻
客戶評(píng)價(jià)：與其他反轉(zhuǎn)錄試劑盒相比，節(jié)省加樣時(shí)間，節(jié)省反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)時(shí)間（其他試劑盒需要15+2 min，本試劑盒只需5 min），后續(xù)基因克隆DNA電泳結(jié)果證明，本試劑盒反轉(zhuǎn)效率更高，條帶更亮，所以會(huì)更節(jié)省PCR使用試劑，節(jié)省成本。
方法 | 分類 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) |
qPCR染料法 | 高靈敏通用型定量預(yù)混液(染料法) | Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix | 11184ES |
定量預(yù)混液 (染料法)，已發(fā)文章累計(jì)IF達(dá)到5000+ | Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) | 11201ES | |
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) | 11202ES | ||
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) | 11203ES | ||
高靈敏型qPCR預(yù)混液（染料法） | Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) | 11198ES | |
Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) | 11199ES | ||
Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) | 11200ES | ||
miRNA qPCR加A法 | Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix（加A法） | 11171ES | |
miRNA qPCR莖環(huán)法 | Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix（莖環(huán)法） | 11170ES | |
RNA一步法RT-qPCR（染料法） | Hifair® III One Step RT-qPCR SYBR Green Kit | 11143ES | |
細(xì)胞直接RT-qPCR（染料法） | Hieff® Fast Cell Direct SYBR Green RT-qPCR Kit | 11172ES | |
反轉(zhuǎn)錄試劑 | 5 min快速反轉(zhuǎn)，最長可滿足14 kb cDNA合成，含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)New | Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit | 11149ES |
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit（No Dye） | 11150ES | ||
15 min一步完成gDNA去除與反轉(zhuǎn)錄(下游應(yīng)用qPCR) | Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR | 11142ES | |
cDNA合成預(yù)混液，含gDNA去除(下游應(yīng)用qPCR)Hot | Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) | 11141ES | |
最長可滿足19.8 kb cDNA合成試劑盒，含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR) | Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus) | 11139ES | |
常規(guī)30 min反轉(zhuǎn)預(yù)混液,含gDNA去除（下游應(yīng)用qPCR） | Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) | 11123ES | |
miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒（加A法） | Hifair® miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit （加A法） | 11148ES |
