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上新 | 抽提效率突破90%！升級(jí)版血漿游離DNA提取試劑盒，實(shí)力登場(chǎng)！
cfDNA（Circulating free DNA）簡(jiǎn)稱(chēng)循環(huán)游離DNA，是指循環(huán)血中游離于細(xì)胞外的部分降解了的機(jī)體內(nèi)源性DNA。正常生理情況下，cfDNA主要來(lái)源于衰老凋亡細(xì)胞基因組DNA的降解，當(dāng)機(jī)體發(fā)生疾病時(shí)，如惡性腫瘤、外傷、排異、組織器官衰竭和感染重大疾病等，異常壞死細(xì)胞會(huì)釋放大量DNA進(jìn)入血液循環(huán)。
圖1.cfDNA的來(lái)源
游離核酸（cfDNA）是一類(lèi)高度片段化的 DNA分子，片段分析則呈現(xiàn) 170bp 左右的一個(gè)主峰、340bp 左右的一個(gè)伴峰、510bp 左右的一個(gè)次伴峰以及其他伴峰。
圖2.cfDNA的特點(diǎn)
目前已經(jīng)在血漿、血清、尿液、前列腺液、支氣管灌洗液、唾液、腦脊液、胃液、膽汁、淋巴液、腹腔液及類(lèi)便中檢測(cè)到了游離循環(huán)核酸。隨著精準(zhǔn)醫(yī)療時(shí)代技術(shù)的發(fā)展，越來(lái)越多的研究者和醫(yī)生將基于cfDNA檢測(cè)的"液態(tài)活檢"技術(shù)應(yīng)用于產(chǎn)前診斷，腫瘤的篩查，早期診斷，治療監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)估等多個(gè)方面。
為了克服cfDNA在血漿樣本中微量、片段短的痛點(diǎn)和難點(diǎn)，翌圣全新推出MolPure® Magnetic Circulating Cell-Free DNA Kit（18382ES）,該產(chǎn)品適用于從0.3-4 mL的血漿、血清樣本中的提取游離DNA。
提取得率高：相同樣本提取的核酸濃度高，尤其對(duì)短片段的回收效率高；
提取樣本質(zhì)量好：提取的核酸建庫(kù)，文庫(kù)質(zhì)量高；
樣本適用性強(qiáng)：能夠適用于0.3-4mL體積的血漿樣本游離DNA提取，兼容游離DNA保存用采血管或普通EDTA采血管采集樣本。
采用cfDNA保存管采集健康人全血，通過(guò)離心分離血漿和去除細(xì)胞碎片等雜質(zhì)。提取4個(gè)2mL健康人血漿樣本，50 µl的洗脫體積，并采用Qubit定量，樣本濃度（ng/ µL），結(jié)果顯示，18382相對(duì)競(jìng)品A有更高的提取效率。
試劑 | 樣本1 | 樣本2 | 樣本3 | 樣本4 |
競(jìng)品A | 0.296 | 0.262 | 0.378 | 0.525 |
18382 | 0.437 | 0.308 | 0.41 | 0.6 |
圖3.18382對(duì)血漿cfDNA的提取能力
采用400 ng梯狀條帶 DNA Lader 分別添加入1 mL模擬血漿和1 mL TE buffer中，并以模擬血漿未加DNA Lader作為陰性對(duì)照，如圖4所示，18382ES在不同模擬基質(zhì)樣本中，回收率均在90%以上。
圖4.18382對(duì)不同片段長(zhǎng)度DNA的提取能力
3個(gè)EDTA抗凝的健康人血漿樣本采用18382ES和競(jìng)品A提取cfDNA,采用Hieff NGSTM DNA Library Prep Kit（13577ES）對(duì)cfDNA進(jìn)行建庫(kù)，不同樣本不同提取試劑的文庫(kù)濃度和數(shù)據(jù)質(zhì)量如圖5所示，18382提取cfDNA在文庫(kù)濃度、數(shù)據(jù)質(zhì)量和插入片段與競(jìng)品A相當(dāng)。
圖5.18382提取cfDNA的文庫(kù)構(gòu)建數(shù)據(jù)質(zhì)量
將5%突變頻率Kars12D標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋為1 ng/uL，制備成模擬cfDNA 。取 10μL 并用 1 mL 血漿稀釋成模擬樣本，采用18382ES和競(jìng)品A提取模擬cfDNA，取2µL cfDNA進(jìn)行qPCR定量檢測(cè)(11211ES)，如圖6所示，低至6 copies/mL的突變片段，18382ES提取之后未出現(xiàn)漏檢的情況。
圖6.18382提取含低頻突變的模擬cfDNA樣本，低頻突變檢出率分析
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品規(guī)格 |
MolPure® Magnetic Circulating Cell-Free DNA Kit血漿、血清游離DNA提取試劑盒 | 18382ES20 | 20 T |
18382ES50 | 50 T | |
18382ES70 | 200T |
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品應(yīng)用 |
MolPure® Magnetic FFPE DNA Kit | 18371ES | 磁珠法石蠟包埋組織DNA提取 |
MolPure® Magnetic M4P1 Blood DNA Kit | 18504ES | 磁珠法血液DNA提取 |
MolPure® Mag32 M6P2 Soil DNA Kit FA | 18511ES | 磁珠法32孔土壤DNA提取試劑盒FA |
MolPure® Magnetic Tissue/Cell Total RNA Kit | 18600ES | 磁珠法組織/細(xì)胞總RNA提取 |
