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血管生成(angiogenesis )會與傷口愈合、炎癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病視網(wǎng)膜病變、黃斑變性和腫瘤生長等存在著密切的關(guān)聯(lián)。在生物體生長過程中,血管生成是新組織生長的重要組成部分。在成年期,除在特殊器官中受到嚴(yán)格調(diào)節(jié)的周期性事件外,由于促血管生成和抗血管生成內(nèi)源性因素之間的平衡,幾乎每個正常組織都缺乏大量的生理性血管生成。當(dāng)促血管生成方向的平衡被打亂時,微血管內(nèi)皮細胞 (EC) 會轉(zhuǎn)變?yōu)檠苌杀硇?,從而開始血管生成反應(yīng),該反應(yīng)可以被消除或加速。在研究過程中所涉及到血管生成實驗,傳統(tǒng)的體內(nèi)血管生成實驗方法有:角膜微袋、腸系膜、海綿/基質(zhì)植入物、圓盤分析 (DAS)、斑馬魚等【1】。
在模型生成過程中的細胞生長維持基質(zhì)物就是來源與EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物——基質(zhì)膠來保證血管或膠塞實驗成功。Ceturegel®基質(zhì)膠不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),超低內(nèi)毒素含量,并全部經(jīng)過支原體檢測保證無支原體污染,包括基本濃度、高濃度、低生長因子等不同類型基質(zhì)膠。
Ceturegel®基質(zhì)膠
應(yīng)用方向
產(chǎn)品特點
安全性高:不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒);
濃度多樣性:濃度范圍在8~20 mg/mL之間;
批次穩(wěn)定性好:嚴(yán)格生產(chǎn)質(zhì)檢過程保證批次間性能穩(wěn)定;
低內(nèi)毒素:內(nèi)毒素含量<8 EU/mL;
污染物檢測: 經(jīng)檢測無支原體和細菌、真菌殘留;
產(chǎn)量高:產(chǎn)量在50L/月以上;
兼容性好:可與任何類型的細胞培養(yǎng)基兼容。
基質(zhì)膠塞實驗(plug assay)
實驗步驟
【2】
取3~7周的BALB/c nude小鼠放置在層流凈化屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)。
從-20℃冰箱內(nèi)取Ceturegel®基質(zhì)膠放置4℃下 12h,待其變成液態(tài)。
將小鼠按實驗分對照組、VEGFA組、肝素鈉組和VEGFA+肝素鈉組。
對照組裸鼠經(jīng)皮下注射Ceturegel®高濃度基質(zhì)膠0.5 mL,VEGFA與肝素鈉組裸鼠分別經(jīng)皮下注射添加VEGFA (20 μg/L) 、肝素鈉 (50U/mL)的基質(zhì)膠0.5 mL,VEGFA+肝素鈉組裸鼠皮下注射物為混勻VEGFA (20μg /L) 和肝素鈉 (50U/mL) 的基質(zhì)膠0.5mL,皮下注射部位為裸小鼠的腹中線附近。
1周后處死裸鼠取出基質(zhì)膠塞,嚴(yán)格根據(jù)Drabkin試劑進行血紅蛋白濃度測定。
注:Drabkin試劑配制: 碳酸氫鈉1.0g,氫化鉀0.05g,高鐵0.2g,加蒸餾水至1 000ml即可,置4C冰箱保存。
實驗結(jié)果
圖.BALB/c nude培養(yǎng)7天培養(yǎng)栓塞結(jié)果
FAQ
實驗操作要注意哪些事項?
1、高濃度基質(zhì)膠極易凝固,接種前基質(zhì)膠及注射針管冰上預(yù)冷!
2、裸鼠皮下注射膠體積較大,進針深度要把握好,慎防漏液!
3、正常飼喂,注意觀察注射基質(zhì)膠部位,穩(wěn)定1-2周觀察即可!
產(chǎn)品選擇
產(chǎn)品類型 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 |
基本濃度 | Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質(zhì)膠 | 40183ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40184ES08/10 | 5/10 mL | |
低生長因子 | Ceturegel® Matrix GFR,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40185ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix GFR, Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40186ES08/10 | 5/10 mL | |
高濃度 | Ceturegel® Matrix High Concentration,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40187ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix High Concentration,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40188ES08/10 | 5/10 mL | |
Ceturegel® Matrix High Concentration,GFR,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40189ES08/10 | 5/10 mL | |
干細胞專用 | Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40190ES08/10 | 5/10 mL |
類器官專用 | Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40191ES08/10 | 5/10 mL |
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