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293細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基,解鎖細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)憂秘籍!

2024-10-10  閱讀(144)

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細(xì)胞培養(yǎng)作為現(xiàn)代生命科學(xué)研究的重要手段之一,為我們深入探索生命的奧秘提供了有力的工具。通過(guò)在體外模擬體內(nèi)環(huán)境,讓細(xì)胞在適宜的條件下生長(zhǎng)、增殖和分化,可以研究細(xì)胞的生理功能、疾病發(fā)生機(jī)制以及開(kāi)發(fā)新的治療方法。然而,要實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量的細(xì)胞培養(yǎng)并非易事,培養(yǎng)基的選擇至關(guān)重要。


 

 

 

含血清培養(yǎng)基

 

在傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)中,含血清培養(yǎng)基被廣泛使用。血清中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分和生長(zhǎng)因子,能夠支持細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。然而,血清培養(yǎng)也存在諸多缺點(diǎn)。

 

 
01
 
血清的成分復(fù)雜且不明確,不同批次之間存在差異;
02
 
血清可能攜帶病毒、支原體等潛在污染物,增加了細(xì)胞培養(yǎng)被污染的風(fēng)險(xiǎn);
03
 
在蛋白表達(dá)純化等一些實(shí)驗(yàn)中,血清中的成分可能會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

 

 

無(wú)血清培養(yǎng)基

無(wú)血清培養(yǎng)基是指在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中不添加血清,而是通過(guò)精確調(diào)配各種營(yíng)養(yǎng)成分、生長(zhǎng)因子和其他添加劑來(lái)滿足細(xì)胞生長(zhǎng)需求的培養(yǎng)基。從最初的嘗試到如今的廣泛應(yīng)用,無(wú)血清培養(yǎng)基經(jīng)歷了多年的發(fā)展和完善,逐漸成為細(xì)胞培養(yǎng)的主流選擇之一,它具有以下顯著優(yōu)點(diǎn):

 

 
01
 

成分精準(zhǔn)可控

無(wú)血清培養(yǎng)基的成分經(jīng)過(guò)科學(xué)調(diào)配,明確且穩(wěn)定。每一種成分的作用都清晰可辨,確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的高度可重復(fù)性。這對(duì)于需要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件的研究和生產(chǎn)過(guò)程至關(guān)重要;

02
 
杜絕污染風(fēng)險(xiǎn)
由于不含有血清,極大地降低了潛在的污染風(fēng)險(xiǎn),為細(xì)胞培養(yǎng)提供了一個(gè)純凈、安全的環(huán)境;
03
 
優(yōu)化細(xì)胞生長(zhǎng)

針對(duì)不同類(lèi)型的細(xì)胞,如293細(xì)胞,無(wú)血清培養(yǎng)基能夠提供特定的營(yíng)養(yǎng)成分和生長(zhǎng)因子組合,促進(jìn)細(xì)胞快速增殖并維持良好的細(xì)胞狀態(tài)。

 

 

產(chǎn)品介紹

 

CelCulSF™293 Cell Culture Medium(Serum-free)培養(yǎng)基為無(wú)動(dòng)物源、無(wú)蛋白的化學(xué)成分限定培養(yǎng)基。適應(yīng)于HEK293各細(xì)胞系細(xì)胞(如HEK293F,HEK293T,HEK293H,Expi293 等)規(guī)?;療o(wú)血清懸浮培養(yǎng)及后續(xù)轉(zhuǎn)染表達(dá)。產(chǎn)品經(jīng)過(guò)定向優(yōu)化,尤其適應(yīng)于AAV及蛋白等相關(guān)產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程,可支持細(xì)胞高密度擴(kuò)增及穩(wěn)定的產(chǎn)物表達(dá)。

 

 

使用秘籍

 
//
 

技術(shù)參數(shù)

 

參數(shù)

設(shè)定值

50mL TPP管

培養(yǎng)體積:10-20 mL

125~1000 mL搖瓶

培養(yǎng)體積:搖瓶總體積的20-30%

搖床轉(zhuǎn)速

TPP:轉(zhuǎn)速220 rpm,  搖瓶 110-130 rpm

搖床振幅

50 mm

培養(yǎng)基

CelCulSF293 Cell Culture Medium(Serum-free)

接種密度

0.5×106 cells/mL

培養(yǎng)溫度

37℃

CO2%

5%

相對(duì)濕度

80%RH

 

//
 

細(xì)胞馴化

 

通常,在原用培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的HEK293細(xì)胞需要轉(zhuǎn)移到由50%原用培養(yǎng)基和50%培養(yǎng)(CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium)組成的新培養(yǎng)基中進(jìn)行適應(yīng)性生長(zhǎng)。

 

 
01
 

將原用培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的細(xì)胞移入新培養(yǎng)基(50% CelCulSF™293 Cell Culture Medium + 50% 原用培養(yǎng)基 ),接種密度為0.5×106/mL。

02
 
細(xì)胞培養(yǎng)至48±3小時(shí)后,建議按此方法進(jìn)行至少3次細(xì)胞適應(yīng)性傳代。當(dāng)細(xì)胞活率高于90%時(shí)轉(zhuǎn)入100% CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium培養(yǎng)基培養(yǎng)。

 

//
 

細(xì)胞培養(yǎng)

 
 
01
 

37℃水浴中預(yù)熱CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium培養(yǎng)基;

02
 
接種密度為1.0×10viable cells/mL。培養(yǎng) 48±3 小時(shí)后,取0.5mL細(xì)胞懸液,用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀分析活細(xì)胞密度(×106細(xì)胞 /mL)和活細(xì)胞(%);
03
 
傳代前,如果細(xì)胞密度低于2.0 ×106/mL,或細(xì)胞活率低于80%,需要150g - 300g,離心5分鐘處理細(xì)胞。輕輕棄上清,使用100%新鮮培養(yǎng)基按0 .5×106/mL重懸細(xì)胞;
04
 
如果傳代前細(xì)胞密度大于2.0×106/mL且活細(xì)胞率高于85%,則將適量的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新?lián)u瓶(或TPP管)中,并用新鮮培養(yǎng)基直接調(diào)整最終培養(yǎng)體積進(jìn)行細(xì)胞傳代,然后在規(guī)定的環(huán)境條件下培養(yǎng)細(xì)胞;
05
 
如果傳代比(傳代后的種子密度:傳代前的細(xì)胞密度)大于1:4,細(xì)胞需要離心并重新懸浮在100%新鮮培養(yǎng)基中。

 

//
 

蛋白表達(dá),腺相關(guān)病毒病毒等在懸浮293細(xì)胞上的表達(dá)

 
 
01
 

細(xì)胞在CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium 中培養(yǎng);

02
 
72±3 小時(shí)后,取 0.5 mL細(xì)胞懸液,用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀分析活細(xì)胞密度(×106/mL)和細(xì)胞活率(%);
03
 
用相同體積的預(yù)熱培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)物(培養(yǎng)物體積:待添加培養(yǎng)基體積=1:1);
04
 
根據(jù)病毒培養(yǎng)工藝,接種病毒,并繼續(xù)培養(yǎng)病毒至收獲。可根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)工藝進(jìn)行優(yōu)化或聯(lián)系產(chǎn)品相關(guān)負(fù)責(zé)人。

 

 

 

FAQ

 
問(wèn)
 

293 無(wú)血清培養(yǎng)基可以用于哪些細(xì)胞類(lèi)型?

主要適用于293細(xì)胞系,包括HEK293F,HEK293T,HEK293H,Expi293等不同亞型的細(xì)胞。

 

問(wèn)
 

與傳統(tǒng)含血清培養(yǎng)基相比,無(wú)血清培養(yǎng)基有哪些優(yōu)勢(shì)?

無(wú)血清培養(yǎng)基具有以下優(yōu)勢(shì):成分明確且穩(wěn)定,避免血清批次差異帶來(lái)的影響;降低潛在的污染風(fēng)險(xiǎn);簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)操作流程;優(yōu)化細(xì)胞生長(zhǎng),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求;具有更高的成本效益。

 

問(wèn)
 

如何判斷 293 細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)狀態(tài)是否良好?

可以從以下幾個(gè)方面判斷:細(xì)胞形態(tài)正常;細(xì)胞增殖速度穩(wěn)定;培養(yǎng)基顏色變化正常,未出現(xiàn)渾濁等異?,F(xiàn)象。

 

問(wèn)
 

無(wú)血清培養(yǎng)基的保存條件是什么?

建議將293無(wú)血清培養(yǎng)基保存在2 - 8℃冰箱中,避免光照和高溫。開(kāi)封后應(yīng)盡快使用,避免長(zhǎng)時(shí)間存放。

 

問(wèn)
 

在使用無(wú)血清培養(yǎng)基過(guò)程中,如果出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)不良怎么辦?

首先檢查培養(yǎng)條件是否符合要求,如溫度、CO2、濃度等??梢赃m當(dāng)調(diào)整細(xì)胞接種密度、換液頻率等。如果問(wèn)題仍然存在,可以聯(lián)系Yeasen技術(shù)支持團(tuán)隊(duì),尋求專業(yè)的解決方案。

 

選擇 Yeasen 293無(wú)血清培養(yǎng)基,讓你的細(xì)胞培養(yǎng)之路更加順暢無(wú)憂!

 

 

訂購(gòu)信息

 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品貨號(hào)

規(guī)格

CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium(Serum-free) 293細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基

40141ES80

1000 mL

CelCulSF™ Insect Cell Culture Medium(Serum-free) 昆蟲(chóng)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基

40140ES80

1000 mL

CelCulSF™ Hybridoma Cell Culture Medium(Serum-free) 雜交瘤細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基

40143ES80

1000 mL

Serum-Free CellStore Freezing 無(wú)血清細(xì)胞凍存液
(推薦搭配使用無(wú)血清凍存液,效果更佳)

40151ES50

50 mL

40151ES60

100 mL



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