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腔腸素
原理
腔腸素（Coelenterazine）是自然界中資源zui豐富的天然熒光素，是絕大多數(shù)海洋發(fā)光生物（超過75%）的光能貯存分子。腔腸素可作為許多熒光素酶的底物，如海腎熒光素酶（Rluc），Gaussia分泌型熒光素酶（Gluc），以及包括水母發(fā)光蛋白（aequorin）和藪枝螅發(fā)光蛋白（Obelia）在內(nèi)的光蛋白（Photoproteins）。與甲蟲（或螢火蟲）熒光素/熒光素酶系統(tǒng)不同，腔腸素/熒光素酶系統(tǒng)不需要三磷酸腺苷（ATP），更便于體內(nèi)生物熒光的研究。因此，腔腸素常用作基于熒光分析的報告基因檢測以及活體動物檢測的發(fā)光底物。
目前商業(yè)化的腔腸素應(yīng)用zui普遍的是天然腔腸素（Coelenterazine native），另外還有很多腔腸素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理論上這些腔腸素可用于相同的實驗，但是由于其發(fā)光波長，細(xì)胞膜滲透性，光量子效率上的差異，使得其在相同應(yīng)用上表現(xiàn)出不同的實驗效果。
分類
Coelenterazine Native天然腔腸素，也叫腔腸素游離酸，是海腎熒光素酶（Rluc）和Gaussia熒光素酶（Gluc）等多種熒光素酶的作用底物，也是水母發(fā)光蛋白的輔助因子，應(yīng)用非常廣泛，可用于檢測活細(xì)胞中鈣離子濃度、基因報告分析、BRET（生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移）研究、ELISA、HTS以及組織或細(xì)胞中ROS水平的化學(xué)發(fā)光檢測等。
Coelenterazine 400a腔腸素400a，也稱為DeepBlue CTM，天然腔腸素的衍生物之一，是海腎熒光素酶（Rluc）的良好底物，但是不能被Gaussia分泌型熒光素酶（Gluc）氧化。是BRET（生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移）研究的腔腸素類底物，因其zui大發(fā)射波長在400nm左右，對GFP受體蛋白的信號干擾zui小。
Coelenterazine h腔腸素h，是海腎熒光素酶（Rluc）和Gaussia熒光素酶（Gluc）等多種熒光素酶的作用底物，其發(fā)光強度比天然腔腸素高10倍以上，適用于報告基因分析。也是水母發(fā)光蛋白的輔助因子，可用于檢測活細(xì)胞中鈣離子濃度。
Coelenterazine f 腔腸素f，以粉末形式供應(yīng)，與天然腔腸素結(jié)構(gòu)上的*差別在于將其R-1位酚基上的羥基替換成氟（F），是水母發(fā)光蛋白（aequorin）的底物。當(dāng)腔腸素f和水母蛋白（Apoaequorin）一起被部分氧化得以活化，生成腔腸素的亞穩(wěn)態(tài)復(fù)合物（aequorin）。與天然腔腸素-水母蛋白（Apoaequorin）復(fù)合物產(chǎn)生的光子總數(shù)相比，此復(fù)合物僅產(chǎn)生80%的光子能。其優(yōu)點在于：僅需非常少的時間來生成aequorin復(fù)合物（通常來說此步反應(yīng)很慢，比如60 min內(nèi)僅有40%的天然腔腸素完成反應(yīng)）。另外，當(dāng)其與Ca2+接觸，即可快速且高產(chǎn)量的發(fā)光，產(chǎn)能強度是天然腔腸素的20倍。具有的細(xì)胞滲透性。當(dāng)需要*的Ca2+檢測靈敏度來研究水母蛋白再生實驗，推薦使用本底物。
Coelenterazine cp 腔腸素cp，是天然腔腸素的衍生物之一。其與水母蛋白（Apoaequorin protein）形成的光蛋白復(fù)合物的發(fā)光強度是天然腔腸素的15倍，且具有更快的Ca2+反應(yīng)速率。腔腸素cp可用于 G-蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs)藥物的高通量篩選研究。
Coelenterazine hcp 腔腸素hcp，是天然腔腸素的衍生物之一。腔腸素hcp-水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的熒光強度比天然腔腸素復(fù)合物高190倍，且量子產(chǎn)量高和Ca2+反應(yīng)速度快。非常適合用于鈣離子水平的檢測。
Coelenterazine n腔腸素n，所有的腔腸素衍生物中熒光強度是zui弱的，且對Ca2+反應(yīng)速率也明顯低于天然腔腸素。非常有用的Ca2+低靈敏檢測底物。
Coelenterazine e腔腸素e，一種天然腔腸素衍生物，結(jié)構(gòu)上比天然腔腸素多了一個乙基。作為海腎熒光素酶的底物，其熒光強度是天然腔腸素的137%。腔腸素e具有zui高的體外水母發(fā)光蛋白反應(yīng)性，且具有雙發(fā)射峰（405& 465），從而可在pCa 5-7范圍內(nèi)通過雙波長的比例測定Ca2+濃度，由于該法不依賴于腔腸素濃度，因此提高了檢測性。但對于細(xì)胞內(nèi)相關(guān)實驗則無此優(yōu)勢，因為該衍生物的細(xì)胞通透性較差。
Coelenterazine 2-methyl 二甲基腔腸素，具有無毒、細(xì)胞膜通透性等特性，是一種細(xì)胞強抗氧化劑，可作用于細(xì)胞內(nèi)的活性氧，如單態(tài)氧和超氧陰離子。由于氧化應(yīng)激是細(xì)胞凋亡過程的中介環(huán)節(jié)，因此，二甲基腔腸素可能作為一種研究細(xì)胞凋亡的重要工具。另，二甲基腔腸素還可通過化學(xué)發(fā)光法來檢測超氧陰離子和過氧亞硝酸陰離子水平。
產(chǎn)品名稱 | 分子量 | 分子式 | Em (nm) | RLC* | Relative Intensity | Half-rise time (ms)** |
天然腔腸素 Coelenterazine native | 423.46 |
| 466 | 1.00 | 1 | 6-30 |
腔腸素h Coelenterazine h | 407.48 |
| 466 | 0.75 | 16 | 6-30 |
腔腸素hcp Coelenterazine hcp | 399.48 |
| 445 | 0.65 | 500 | 2-5 |
腔腸素cp Coelenterazine cp | 415.48 |
| 442 | 0.63 | 28 | 2-5 |
腔腸素f Coelenterazine f | 425.46 |
| 472 | 0.80 | 20 | 6-30 |
腔腸素n Coelenterazine n | 457.52 |
| 468 | 0.25 | 0.15 | 6-30 |
腔腸素e Coelenterazine e | 449.5 |
| 405 & 465 | 0.5 | 4 | 0.15-0.3 |
2-methyl Coelenterazine 二甲基腔腸素 | 331.37 |
| / | / | / | / |
腔腸素 400a Coelenterazine 400 a | 391.48 |
| 400 | / | / | / |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編碼 | 規(guī)格 | 價格（元） |
D-Luciferin, Sodium Salt D 熒光素鈉鹽 | 40901ES01/02/03/08/10 | 0.1/0.5/1/5/10 g | 1008/2556/3996/15876/31212 |
D-Luciferin, Potassium Salt D 熒光素鉀鹽 | 40902ES01/02/03/08 | 0.1/0.5/1/5 g | 1000/2600/3996/14898 |
D-Luciferin Firefly, Free Acid D 螢火蟲熒光素，游離酸 | 40903ES01/02/03 | 0.1/0.5/1 | 708/2556/3588 |
Coelenterazine Native 天然腔腸素 | 40904ES02/03/08 | 0.5/1/5 mg | 589/1049/3899 |
Coelenterazine 400 a腔腸素 400a | 40905ES02/03 | 0.5/1 mg | 789/1499 |
Coelenterazine h 腔腸素h | 40906ES02/03/08 | 0.5/1/5 mg | 1329/2359/6759 |
Ready To Use Coelenterazine h 即用型腔腸素h | 40907ES10 | 10 vials | 6856 |
Coelenterazine f 腔腸素f | 40908ES02/03 | 0.5/1 mg | 1329/2359 |
Coelenterazine cp 腔腸素cp | 40909ES72 | 250 μg | 2359.00 |
Coelenterazine hcp 腔腸素hcp | 40910ES72 | 250 μg | 2359.00 |
Coelenterazine n 腔腸素n | 40911ES72 | 250 μg | 2359.00 |
Coelenterazine e 腔腸素e | 40912ES02/03 | 0.5/1 mg | 1329/2359 |
Coelenterazine 2-methyl 二甲基腔腸素 | 40913ES50 | 50 μg | 929 |
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒 | 11402ES60/80 | 100/1000次 | 536/4236元 |
Luciferase Reporter Gene Assay Kit 螢火蟲熒光素酶報告基因檢測試劑盒 | 11401ES60/76/80 | 100/500/1000次 | 349/969/1748元 |
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