HB180514

Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads (50 bp以上)

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads針對AMPure XP磁珠對長度低于200 bp的小片段DNA回收效果不佳而專門設計。本產(chǎn)品基于SPRI（Solid Phase Reverse Immobilization）原理制備，采用超順型磁珠，配合*的緩沖體系，提供了一種簡單、快速、高效的DNA回收方法。本產(chǎn)品可特異性吸附DNA，回收低至50 bp的DNA-片段，并有效去除引物二聚體、dNTP、無機鹽及蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，得到高質(zhì)量的DNA回收產(chǎn)物。

· 適用范圍廣：50 bp-20 kb DNA-片段；

· 回收率高：高達85%以上；

· 純化力好：DNA產(chǎn)物A_260/280=1.8-2.0；

· 操作簡便：30 min內(nèi)完成整個操作流程，無需反復離心；

· 應用多樣：PCR產(chǎn)物純化、酶切產(chǎn)物純化、cfDNA回收、NGS建庫產(chǎn)物回收；

· 產(chǎn)物下游應用：酶切、連接、克隆、NGS建庫等。

運輸與保存方法

冰袋運輸。2-8℃保存，效期一年。避免冷凍！

注意事項

1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2）磁珠使用前須在室溫平衡至少30 min。

3）80%乙醇需現(xiàn)用現(xiàn)配，否則將影響回收效率。

4）進行長度分選時，初始樣品體積需≥100 μL，不足時請用超純水補齊。樣品體積太小，將導致移液誤差增大，進而影響分選的準確性。

使用方法

1. 操作流程

圖1 Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads操作流程

2. 操作步驟

1）將磁珠由冰箱中取出，室溫平衡至少30 min。配制80%乙醇。

2）渦旋振蕩或充分顛倒磁珠以保證充分混勻。

3）按下表吸取不同比例的Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads至DNA溶液中，室溫孵育5 min。

表1磁珠DNA-片段回收推薦比例

注：表中“×”表示樣品DNA體積。如需回收≥50 bp的DNA-片段，樣品DNA體積為100 mL，則磁珠使用體積為2.2×100 mL=220 mL。

4）將PCR管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體，待溶液澄清后（約5 min），小心移除上清。【注意：勿吸取磁珠。】

5）保持PCR管始終置于磁力架中，加入200 μL新鮮配制的80%乙醇漂洗磁珠，室溫孵育30 sec后，小心移除上清。

6）重復步驟5，總計漂洗2次。

7）保持PCR管始終置于磁力架中，開蓋空氣干燥磁珠至剛剛出現(xiàn)龜裂（約5 min）。【注意：切記磁珠不要干燥時間太久，磁珠干燥過度將影響純化效果。】

8）將PCR管從磁力架中取出，加入21 μL ddH₂O (≥20 μL)，渦旋振蕩或使用移液器輕輕吹打至充分混勻，室溫靜置5 min。

9）將PCR管短暫離心并置于磁力架中靜置，待溶液澄清后（約5 min），小心移取20 μL上清至新PCR管中，勿觸碰磁珠。

10）檢測DNA濃度與純化效果。

3. 純化示例

Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads相對AMPure XP磁珠，回收DNA效果更好。

圖2 不同比例磁珠純化DNA電泳圖