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20439ES20重組人泛素連接酶E3(UBE3)
參考價(jià): 1355
訂貨量: 1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 20439ES20 產(chǎn)品型號(hào)
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問(wèn)次數(shù):463更新時(shí)間:2022-11-21 13:49:14

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20ul
貨號(hào) 20439ES20 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
重組人泛素連接酶E3(UBE3):泛素結(jié)合酶E2L3,又稱泛素結(jié)合酶H7 (UbcH7),是泛素結(jié)合酶(E2)家族的成員。 它的預(yù)測(cè)分子量約為18 kDa。
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

Recombinant Human Ubiquitin Ligase E3(UBE3)

重組人泛素連接酶E3(UBE3)

20439ES20

20 µL

1,355

重組人泛素連接酶E3(UBE3)描述

泛素化是通過(guò)三個(gè)酶促步驟實(shí)現(xiàn)的。在ATP依賴的過(guò)程中,泛素激活酶(E1)催化與泛素形成活性硫酯鍵,然后轉(zhuǎn)移到泛素載體蛋白的活性位點(diǎn)半胱an酸(E2)。泛素級(jí)聯(lián)對(duì)特定底物蛋白的選擇性依賴于E2結(jié)合酶(細(xì)胞中包含的相對(duì)較少)和泛素-蛋白連接酶(E3)之間的相互作用,迄今為止已經(jīng)鑒定出600多種這種酶。E3s是一個(gè)大的,多樣化的蛋白質(zhì)組,其特征是幾個(gè)確定的基序之一。這些包括HECT(與e6相關(guān)蛋白c端同源),RING(真正有趣的新基因)或U-box(沒有Zn2+結(jié)合配體的完整補(bǔ)充的修飾的RING基序)結(jié)構(gòu)域。而HECT E3s在泛素化過(guò)程中具有直接的催化作用,RING和U-box E3s促進(jìn)蛋白質(zhì)泛素化。 后兩種E3類型充當(dāng)適配器類分子。 它們使E2和底物足夠接近,從而促進(jìn)底物的泛素化。雖然許多RING-type e3,如MDM2和c-Cbl,可以單獨(dú)發(fā)揮作用,但其他一些是作為更大的多蛋白復(fù)合體的組成部分,如后期促進(jìn)復(fù)合體。綜上所述,這些多面的特性和相互作用使E3s能夠利用泛素-蛋白酶體系統(tǒng),在真核生物的所有細(xì)胞中提供一種強(qiáng)大而具體的蛋白質(zhì)清除機(jī)制。E3s的重要性突出體現(xiàn)在其調(diào)節(jié)的正常細(xì)胞過(guò)程的數(shù)量,以及與其功能喪失或靶向不當(dāng)相關(guān)的疾病的數(shù)量。          

產(chǎn)品性質(zhì)

來(lái)源(Source

E.coli

分子量Molecular Weight

E3酶大約102kDa,底物蛋白大約40.7kDa。

外觀(PhZZysical Appearance

液體

標(biāo)簽(Tag)

無(wú)

純度(Purity

> 95% by SDS-PAGE

儲(chǔ)存液(Stock)

0.88 mg/ml (25 µM) in 50 mM HEPES pH 7.5, 200 mM NaCl, 10% Glycerol

濃度(concentration)

見管外標(biāo)簽

產(chǎn)品組分

組分

規(guī)格

重組人泛素連接酶E3

20 μL

修飾底物蛋白

20 μL

反應(yīng)緩沖液配方

名稱

組分

濃度

10 ×Reaction Buffer (200 μL)

Tris PH 8.0

500 mM

DTT

6 mM

ddH2O

to 200 μL


10 × ATP-Mg (200 μL

ATP

100 mM

MgCl2

100 mM

ddH2O

to 200 μL

陽(yáng)性反應(yīng)體系

組分

體積 (μL)

ddH2O

to 20 μL

10 × Reaction Buffer

2 μL

10 × E1 Enzyme

2 μL

5 × Ubiquitin

4 μL

10 × ATP-Mg

2 μL

20 × E2 Enzyme

1 μL

10 × E3 Ligase Itch (Positive control)

2 μL

20 × S5a substrate (Positive control)

1 μL

反應(yīng)條件

37℃孵育(30 min-2 h,如果效果不明顯可增加反應(yīng)時(shí)間12 h),建議使用PCR儀或金屬浴。

結(jié)果檢測(cè)

1. 取樣品20 μL加入5 μL的5× SDS-PAGE Buffer(加入1 μL新鮮配制的1M DTT),加熱樣品95℃ 5 min,隨后使用還原性(含DTT)上樣緩沖液進(jìn)行SDS-PAGE電泳分析;
2. 選擇E3 Ubiquitin Ligase、泛素、Substrate抗體進(jìn)行Western-blot分析。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃至-80℃保存,1年有效期。建議第一次使用時(shí)分裝凍存,避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)

1. 避免反復(fù)凍融。

2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3. 本產(chǎn)品僅作科研用途!



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