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14614ES超潔凈高穩(wěn)定性逆轉(zhuǎn)錄酶含甘油
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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 14614ES 型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):85更新時間:2025-03-19 08:55:29

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
Hifair UCF. ME® Advanced Reverse Transcriptase是在Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase基礎(chǔ)上通過基因工程技術(shù)得到的全新逆轉(zhuǎn)錄酶,與Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比,其速度和穩(wěn)定性大幅度提高。
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品簡介

 

Hifair UCF. ME® Advanced Reverse Transcriptase是在Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase基礎(chǔ)上通過基因工程技術(shù)得到的全新逆轉(zhuǎn)錄酶,與Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比,其速度和穩(wěn)定性大幅度提高。此外,該產(chǎn)品經(jīng)過翌圣生物特別研發(fā)的精制工藝處理,產(chǎn)品中核酸酶、宿主gDNA以及其他背景菌gDNA殘留極低適用于快速全預(yù)混RT-qPCR試劑開發(fā)。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號

14614ES92 14614ES97 14614ES98

規(guī)格

10 KU / 100 KU / 200 KU

單位定義

Poly(A) .Oligo(dT)為模板-引物,在37℃,10 min內(nèi),將1 nmol的dTTP摻入為酸不溶性物質(zhì)所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。

 

組分信息

 

組分名稱

14614ES92

14614ES97

14614ES98

Hifair UCF. ME® Advanced Reverse Transcriptase (200 U/μL)

50 μL

500 μL

1 mL

 

儲存條件

 

-25~-15℃保存,有效期1年。

 

使用說明

 

1.兩步法RT-PCR/qPCR第一鏈cDNA合成

1)RNA變性(此步為可選步驟,RNA變性有助于打開二級結(jié)構(gòu),可在很大程度上提高第一鏈cDNA的產(chǎn)量。)

組分

使用量

RNase free ddH2O

to 13 μL

Oligo (dT)18 (50 μM)

or Random Primers (50 μM)

or Gene Specific Primers (2 μM)

1 μL

or 1 μL

or 1 μL

模板RNA

Total RNA: 1 ng -5 μg或mRNA: 1-500 ng

65℃加熱5 min,迅速置于冰上冷卻2 min。簡短離心收集反應(yīng)液后,加入下表中的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液,并輕輕吹打混勻。

2)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系配制(20 μL體系)

組分

使用量

上一步的反應(yīng)液

13 μL

RT Buffer

4 μL

dNTP Mix (10 mM)

1 μL

Hifair UCF. ME® Advanced Reverse Transcriptase (200 U/μL)

200 U

RNase inhibitor (40 U/µL)

1 μL

RNase free ddH2O

To 20 μL

3)逆轉(zhuǎn)錄程序設(shè)置

溫度

時間

25℃*

5 min

42℃**

15-30 min

85℃***

5 min

*當(dāng)使用Random Primers時,需25℃,孵育5 min;若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers,此步可省略。

**逆轉(zhuǎn)錄溫度:推薦使用42℃。對于高GC含量模板或者復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的模板,可將逆轉(zhuǎn)錄溫度提高至50-60℃。

***85℃加熱5 min,目的是使逆轉(zhuǎn)錄酶失活。

4)逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可立即用于后續(xù)PCR或qPCR反應(yīng),也可-20℃短期保存,若需長期保存,建議分裝后,于-80℃保存,避免反復(fù)凍融。

 

2.一步法RT-PCR/qPCR

該逆轉(zhuǎn)錄酶適用于一步法RT-PCR/qPCR,推薦每25 μL反應(yīng)體系,添加10-40 U逆轉(zhuǎn)錄酶,最適逆轉(zhuǎn)錄條件為50℃ 15min,也可根據(jù)實(shí)際情況逐步增加逆轉(zhuǎn)錄酶用量,多重體系建議提高酶量。

 

注意事項(xiàng)

 

1. 請保持實(shí)驗(yàn)區(qū)域潔凈;操作時需穿戴干凈的手套、口罩;實(shí)驗(yàn)所用耗材均需保證RNase free,以防止RNase污染。

2. 所有操作均應(yīng)在冰上進(jìn)行,防止RNA降解。

3. 為保證高效率逆轉(zhuǎn)錄,建議使用高質(zhì)量的RNA樣本。

4. 本產(chǎn)品僅用作科研用途。

5. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。




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