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詳細(xì)介紹
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester | 5mg | GOY-F10185 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
CFDA SE 的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，分子式為C29H19NO11，分子量為557.47。CFDA SE可以通透細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，并標(biāo)記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時(shí)，即可充分標(biāo)記細(xì)胞。被CFDA SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)個(gè)月。CFSE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，比以前使用的其它細(xì)胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均勻。 由于CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定，每分裂一次子代細(xì)胞的熒光會減弱一半，這樣通過流式細(xì)胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細(xì)胞，分裂一次的細(xì)胞(1/2的熒光強(qiáng)度)，分離兩次的細(xì)胞(1/4的熒光強(qiáng)度)，分裂三次的細(xì)胞(1/8的熒光強(qiáng)度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細(xì)胞。 CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測，也可以用于成纖維細(xì)胞、NK細(xì)胞等其它細(xì)胞的增殖檢測，甚至還可以用于細(xì)菌增殖的檢測。 儲存：-20℃，避光，有效期6個(gè)月。 |
DNA提取流程圖：
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí)，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔白介素-1RA(rabbit IL-1ra) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Benzyl L-aspartate 中文名：L-天冬-4-芐酯 分子式：C11H13NO4 度：98.0%
兔白介素-1a(rabbit IL-1a) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate 7536-58-5 中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-天冬-4-芐酯 分子式：C16H21NO6 度：98.0%
兔白介素-18(rabbit IL-18) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Benzyl L-aspartate 2177-63-1 中文名：L-天冬-4-芐酯 分子式：C11H13NO4 度：98.0%
兔白介素17elisa試劑盒 兔白介素17試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔白介素17試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔白介素17試劑盒、兔白介素17 elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 4-Biphenylcarboxylic acid 92-92-2 中文名：4-苯甲酸 分子式：C13H10O2
兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate 3479-47-8 中文名：N-芐氧羰基-L-天冬-4-芐脂 分子式：C19H19NO6
蛋白酶K(進(jìn)分) Proteinase K 質(zhì)量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma分裝 Ratplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
蛋白酶K(Sigma) Proteinase K 質(zhì)量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma原裝 GST(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
胰凝乳蛋白酶抑制劑 Chymostatin 質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分 Mousethrombin-aithrombincomplex,TATELISA試劑盒小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
亮抑蛋白酶肽(進(jìn)口) Leupeptin 質(zhì)量規(guī)格：≥95%,進(jìn)口半硫酸鹽 小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒 ，英文名： ACA-IgA ELISA Kit
胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制劑 Pepstatin A microbial 質(zhì)量規(guī)格：≥90%,進(jìn)分 大鼠C(VC)ELISA檢測試劑盒RatVitaminC,VCELISAKit 96T/48T
巖藻糖；L-巖藻糖 L-(-)-Fucose 質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR 人蛋-R-亞砜還原酶 B2,線粒體(MSRB2/CBS-1/MSRB/CGI-131)試劑盒 Human MSRB2 ELISA kit
果膠酶 Pectinase 質(zhì)量規(guī)格：3萬U/g Ratplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
β-(70萬u/ml液體) beta-Amylase 質(zhì)量規(guī)格：BR,70萬u/ml液體 GST釣餌(PULLDOWN)檢測試劑盒2/5
β-(酶活5萬粉末) beta-Amylase 質(zhì)量規(guī)格：BR,酶活5萬,粉末 Mousethrombospondin1,TSP-1ELISA試劑盒小鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
DNA酶,脫氧核糖核酸酶Ⅰ Deoxyribonuclease 質(zhì)量規(guī)格：≥2000KU/mg protein,(牛胰) 小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒 ，英文名： AMA ELISA Kit
細(xì)胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)細(xì)胞SPHK2激酶活性熒光定量檢測試劑盒
組織SPHK1激酶活性熒光定量檢測試劑盒
細(xì)胞SPHK1激酶活性熒光定量檢測試劑盒
組織SPHK激酶總活性比色法定量檢測試劑盒（510）
細(xì)胞SPHK激酶總活性比色法定量檢測試劑盒（510）
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