詳細(xì)介紹
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
DAF-FM DA Solution (5mM in DMSO) | 100T | GOY-F10233 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
本品為溶解于DMSO的淡黃色溶液,濃度為5mM。本品適用于檢測細(xì)胞內(nèi)的一氧化氮水平,推薦工作濃度為1-10μM。如果收集細(xì)胞后再裝載探針,通常至少可以檢測100個(gè)樣品。 DAF-FM DA即4-Amino-5-Methylamino-2,7-Difluorofluorescein Diacetate,也稱DAF-FM Diacetate,是新一代用于一氧化氮(nitric oxide, NO)定量檢測的探針,其檢測原理為:DAF-FM DA可以穿過活細(xì)胞膜(cell-permeable),進(jìn)入細(xì)胞后可以被胞漿內(nèi)的酯酶催化形成不能穿過細(xì)胞膜的DAF-FM。DAF-FM本身僅有很弱的熒光,光量子約0.005,但在與NO反應(yīng)后生成熒光素-苯駢三氮唑(benzotriazole),發(fā)強(qiáng)烈綠色熒光,光量子約0.81。Ex~495nm,Em~515nm。任何可以檢測熒光素(fluorescein)的儀器,包括熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀、熒光分光光度計(jì)或熒光酶標(biāo)儀都可以用于該熒光探針的檢測。 DAF-FM DA是新一代NO檢測探針,與以往成功且應(yīng)用廣泛的一氧化氮熒光檢測探針DAF-2 Diacetate相比較,具有多方面的改進(jìn):1)DAF-FM DA和NO加合反應(yīng)形成的熒光產(chǎn)物在pH5.5以上不受pH影響;2)DAF-FM DA和NO加合反應(yīng)形成的產(chǎn)物熒光更加穩(wěn)定,不容易淬滅,這樣更加便于檢測;3)DAF-FM DA對(duì)一氧化氮的檢測靈敏度更高,其低檢測濃度可達(dá)到3nM,而DAF-2 Diacetate的低檢測濃度約為5nM。 CAS:254109-22-3 分子式:C25H18F2N2O7 分子量:496.42 純度:>98% 儲(chǔ)存條件:-20℃避光,有效期12個(gè)月 |
DNA提取流程圖:
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
人組織蛋白去乙?;?/span>elisa試劑盒 人組織蛋白去乙?;冈噭┖?/span> 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒、人組織蛋白去乙?;?/span>elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 24352-51-0 中文名: 分子式:C28H42 度:% 關(guān)鍵詞: 麥角甾烷; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
人組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒 3,5-Di-O-caffeoylquinic acid 2450-53-5 中文名:異綠原酸A 分子式:C25H24O12
人組織蛋白酶抗體elisa試劑盒 人組織蛋白酶抗體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人組織蛋白酶抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白酶抗體試劑盒、人組織蛋白酶抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 24352-51-0 中文名: 分子式:C28H42
人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 中文名: 分子式:C28H42 度:%
人組織蛋白酶S(cath-S)ELISA試劑盒 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 中文名: 分子式:C28H42
普拉洛芬 Pranoprofen 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 英文名稱RatinhibinBELISAKit大鼠抑制素B(INHB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
普拉洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Pranoprofen 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 谷待測樣品處理試劑盒20
牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白組分五 Albumin(bovine fraction V);BSA 質(zhì)量規(guī)格:Purity>98%,分子生物學(xué)級(jí) ELISAKitHPA人乙酰肝素酶規(guī)格:48T/96T
萘啶酮酸;萘啶酸 Nalidixic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒 ,英文名: Cav-1 ELISA Kit
糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元 Glycogen from oyster 質(zhì)量規(guī)格:BR,>99%,河蚌提取,Type II 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA檢測試劑盒RatAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit 96T/48T
化乙錠(EB) Ethidium bromide(EB) 質(zhì)量規(guī)格:>95% 人促卵泡素(FSH)試劑盒 human follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
貝西鹽酸鹽 Besifloxacin HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甜菜堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Betaine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 HRP穩(wěn)定/稀釋溶液10毫升
甜菜堿 Betaine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,無水高 Mouseα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDHELISA試劑盒小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
尿酸 Uric acid 質(zhì)量規(guī)格:0.99 小鼠窖蛋白(CAV1)ELISA試劑盒 ,英文名: CAV1 ELISA Kit
一氧化氮檢測探針細(xì)胞白細(xì)胞介素-1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒
組織樣品組織G(CATHEPSIN G)活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞組織G(CATHEPSIN G)活性比色法定量檢測試劑盒
組織樣品組織E(CATHEPSIN E)活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞組織E(CATHEPSIN E)活性比色法定量檢測試劑盒