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DNA提取流程圖：
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中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 貨號 |
50μg|2×50μg|5×50μg | GOY-F10214 |
產品詳細介紹：
CM-Dil為DiI的一種衍生物，通過與膜結構的脂質分子結合而標記細胞，適合監(jiān)測細胞運動以及細胞定位分析。因具有良好的染料維持性，可用以追蹤多次傳代細胞的運動特性。其有著強而穩(wěn)定的紅色熒光（Ex/Em=553/570nm），與綠色熒光染料以及蛋白具有良好的熒光分辨性，適合做多重指標染色。CM-Dil可自由穿透質膜進入細胞，從而產生不具有膜滲透性的反應產物。經過幾次傳代此染料還可完好的維持在活細胞內，染料隨著細胞分裂傳入子代細胞內，但不會進入相鄰細胞。至少在72小時內保持熒光信號（一般可傳3~6代）。工作濃度下，此染料無細胞毒性，不會影響細胞活力以及增殖能力。 與Dil相比，CM-Dil水溶性更好一些，便于懸浮細胞和固定細胞染色溶液的制備；CM-Dil攜帶的CM基團（即氯甲基替代基團）能與多肽及蛋白上的巰基反應從而使該分子在醛類物質中保持穩(wěn)定。與其他膜染料如DiI和PKH26不同，一些細胞經CM-Dil染色后，可在后續(xù)的固定，透化和石蠟包埋處理中維持穩(wěn)定的標記，因此特別適用于同時做細胞膜標記以及后續(xù)的免疫組化，熒光原位雜交或者電鏡觀察的實驗。 研究證實，CM-DiI標記后熒光在胞內表達穩(wěn)定，陽性標記率達98%以上，標記細胞形態(tài)良好，能有效地觀察細胞在體外的誘導分化情況；或將標記的細胞注入體內，可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。 CAS：180854-97-1 分子式：C68H105Cl2N3O 分子量：1051.5 外觀：紅色固體 Ex/Em：553nm/570nm 推薦濾光器：XF23-Omega, 31002-Chroma 儲存條件：-20℃避光干燥，有效期12個月。 |
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養(yǎng)板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
生存素 (survivin) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝 Anthraflavic acid 中文名：二羥蒽醌 分子式：C14H8O4
神經營養(yǎng)素3 英文名稱： Neuroophin-3 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： -3 3-Hydroxychimaphilin 中文名：3-羥基梅笠草素 分子式：C12H10O3
神經營養(yǎng)素 4(-4) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt 219921-94-5 中文名： 分子式：C23H37N3O5 度：98.0% 關鍵詞：
神經營養(yǎng)素 4(-4) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝 3-Methoxyfuran 3420-57-3 中文名： 分子式：C5H6O2
神經營養(yǎng)素 3(-3) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝 3-Methoxyfuran 3420-57-3 中文名： 分子式：C5H6O2 度：99.0% 關鍵詞： 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
丙谷二肽,L-丙-谷二肽,力肽 Ala-Gln 質量規(guī)格：>98%,BR MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor,VEGFR-3/Flt-4ELISA試劑盒小鼠血管內皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L-精甲酯二鹽酸 H-Arg-OMe·2HCl 質量規(guī)格：>99%,BR 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒 ，英文名： MIP-1β/CCL4 ELISA Kit
D-丙氨酰胺鹽酸鹽 D-Alaninamide 質量規(guī)格：>98%,BR 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA檢測試劑盒RatAquaporin1,AQP-1ELISAKit 96T/48T
硝酸芬替康唑; 硝酸芬康唑 Fenticonazole Nitrate 質量規(guī)格：>99%,BR 人催乳素釋放激素(PRH)試劑盒 Human PRH ELISA Kit
1-芐基D-谷 1-Benzyl D-Glutamate 質量規(guī)格：0.98 RaeninELISAKit大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
D-苯丙 D-Phenylalanine 質量規(guī)格：>99%,BR HIS釣餌(PULLDOWN)檢測試劑盒5
D-丙 D-Alanine 質量規(guī)格：>98%,BR MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA試劑盒小鼠血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
β-丙 β-Alanine 質量規(guī)格：>98% 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA試劑盒 ，英文名： MIP1β ELISA Kit
β-丙(標準品) β-Alanine 質量規(guī)格：>98%(T),標準品 人腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA檢測試劑盒Humannicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit 96T/48T
D-色 D-Tryptophan 質量規(guī)格：>98%,BR 大鼠血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒 Rat Angiopoietin-like 3,ANGPTL3 ELISA KIT
CM-DiI活細胞染色劑組織基質金屬（MMP-3）活性比色法定量檢測試劑盒
細胞基質金屬（MMP-3）活性比色法定量檢測試劑盒
體液基質金屬（MMP-3）活性熒光定量檢測試劑盒
組織基質金屬（MMP-3）活性熒光定量檢測試劑盒
細胞基質金屬（MMP-3）活性熒光定量檢測試劑盒
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
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