詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
海藻糖酶(TREH)真核蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D3074 |
英文名稱:Eukaryotic Trehalase (TREH)
TRE; TREA; Brush Border Membrane Glycoprotein; Alpha,Alpha-Trehalase; Alpha,Alpha-Trehalose Glucohydrolase
型號:GOY-01D3074
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:真核表達
宿主293F cell
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞膜
預測分子量:62.4kDa
實際分子量:63kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Leu21~Ser553 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:5.2
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關產(chǎn)品:
Recombinant Myeloperoxidase (MPO)產(chǎn)品名稱:髓過氧化物酶(MPO)重組蛋白物種:Cattle,牛酶與激酶
Recombinant Gamma-Glutamyl Hydrolase (gGH)產(chǎn)品名稱:γ-谷氨酰水解酶(gGH)重組蛋白物種:Human,人GH; conjugase, folylpolygammaglutamyl hydrolase; Gamma-Glu-X carboxypeptidase
Recombinant Calpain 3 (CAPN3)產(chǎn)品名稱:鈣3(CAPN3)重組蛋白物種:Human,人CANPL3; p94; LGMD2; LGMD2A; nCL1; Calcium-activated neutral proteinase 3; Muscle-specific calcium-activated neutral protease 3; New calpain 1
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
AGS(人胃腺細胞)5×106cells/瓶×2
野;Scutellarin 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
CTLL-2(小鼠T細胞)5×106cells/瓶×2
遠志皂苷元;Tenuigenin 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
A875(人黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
鷹嘴豆芽素A;Biochanin A 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
小鼠胚胎成纖維細胞英文名稱:NIH3T3
異去氫鉤藤堿;Isocorynoxein 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
胎兒表角細胞培養(yǎng)基100mL
異甘草素;Isoliquiritigen 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
42℃生長培養(yǎng)基/42℃ Growth Medium副溶血弧菌42℃生長試驗250克國產(chǎn)/進口
柚皮苷;Naringin 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基100mL
延胡索乙素;Tetrahydropalm 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
Orchimax培養(yǎng)基(含木炭)/Orchimax Medium with charcoalBR10升國產(chǎn)/進口
淫羊藿苷;Icariin 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
海藻糖酶(TREH)真核蛋白小鼠人Gremlin-1蛋白(GREM1)免疫試劑盒進口、分裝
1瓶 MRC-5細胞株 MRC-5 低溫運輸和保存
2 ug pBlueScript II SK(+) pBlueScript II SK(+) 低溫運輸,-20℃保存
豬乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
500mL Acrylamide: Bis-acrylamide Solution(丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液),37.5:1 Acrylamide: Bis-acrylamide Solution,37.5:1 常溫保存
牛生長激素釋放多肽(GHRP)免疫試劑盒
1瓶 TM3細胞株 TM3 低溫運輸和保存
人克拉拉細胞蛋白(CC16)免疫試劑盒進口、分裝
胰胨大豆胨固綠瓊脂 Tryptic Soy Fast Green Agar 250g
人酸性神經(jīng)鞘磷脂(ASM)免疫試劑盒
大鼠乳腺癌標志物-CA153免疫試劑盒進口、分裝