原代細胞活性是判斷體外培養(yǎng)細胞在某些條件下是否能正常生長的重要指標,如藥物處理、放射性或紫外線照射、培養(yǎng)條件變化等。目前常用的方法有很多,如有臺盼藍染色法、克隆(集落)形成法、H放射性同位素摻入法、MTT法等。本文總結(jié)了一些常用的細胞活性檢測方法的原理、特點，并對比了各自的優(yōu)缺點。
一、染色計數(shù)法
1. 化學染色法
染色計數(shù)法是細胞培養(yǎng)中檢查細胞死活zui常用的方法，直接利用死細胞和活細胞對染料的不同親和力，檢查細胞活性，能在光學顯微鏡下觀察到染色結(jié)果?？煞譃閮深悾核兰毎ê突罴毎āＪ顾兰毎某Ｓ萌玖嫌信_盼藍、苯胺黑、伊紅Y。能使活細胞著色的常用染料有結(jié)晶紫、亞甲基藍、甲苯胺藍等。其中zui常用的是臺盼藍染色法。細胞損傷或死亡時，臺盼藍可穿透變性的細胞膜，與解體的DNA結(jié)合，使其著色，而活細胞能阻止染料進入細胞內(nèi)，故可以鑒別死細胞與活細胞。通過細胞計數(shù)可得出細胞的存活率。

本染色法方便實用，價格低廉，操作簡單。但是臺盼藍染色時，時間不宜過長，否則部分活細胞也會著色，會干擾計數(shù)。而且，細胞沒有經(jīng)過固定，形態(tài)不清晰。

2. 熒光染色法
一些熒光染料對死細胞和活細胞也有不同的作用效果，利用熒光顯微鏡檢測細胞活性。如碘化丙啶（PI），被活細胞排斥但能穿透正在死亡或已經(jīng)死亡細胞的細胞膜，因此活細胞不被染料上色，只有死細胞或凋亡細胞才能被染上紅色。吖啶橙（AO）能透過質(zhì)膜完整的細胞，嵌入細胞核DNA，使之發(fā)出明亮的綠色熒光。溴乙錠（EB）僅能透過胞膜受損的細胞，嵌入核DNA，發(fā)橘紅色熒光。也可應(yīng)用AO-EB雙染法鑒定細胞死活。

原代細胞這種檢測方法相比傳統(tǒng)的染料，具有靈敏度高，操作簡便，結(jié)果容易分辨等特點，而且利用雙染法還可以分辨活細胞、凋亡早期細胞、凋亡晚期細胞、死亡細胞。在細胞凋亡的檢測上有很廣泛的應(yīng)用。

缺點在于，要求特殊的儀器進行檢測，如熒光顯微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡或流式細胞儀。而且通過熒光染料具有毒性，操作時需要帶手套。
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原代細胞