探討下國產(chǎn)液相色譜HPLC的分析基礎(chǔ)
探討下國產(chǎn)液相色譜HPLC的分析基礎(chǔ)
國產(chǎn)液相色譜色譜法又稱色譜分析、色譜分析法、層析法,是一種分離和分析方法,在分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用。色譜法利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配,以流動相固定相中德混合物進(jìn)行洗脫,混合物中不同的物質(zhì)會以不同的速度沿固定相移動,終達(dá)到分離效果。色譜技術(shù)有分離效率高應(yīng)用范圍廣,分析速度快,樣品用量少而且靈敏度高。在食品分析中應(yīng)用較廣泛的是液相色譜法。液相色譜法在20世紀(jì)70年代末在我國開始應(yīng)用在食品衛(wèi)生領(lǐng)域;20世紀(jì)90年代后期,國家標(biāo)準(zhǔn)中開始將HPLC法列為檢測食品中德營養(yǎng)成分、添加劑、有害物質(zhì)等的國標(biāo)方法。
液相色譜法檢測(HPLC),是利用經(jīng)高壓泵加壓后的流動相帶動待測物各組分通過色譜柱,因各組分從色譜柱中流出的速度不同,從而實現(xiàn)不同組分的分離,各組分先后從柱內(nèi)流出后通過檢測器的后被轉(zhuǎn)化成電信號,再由數(shù)據(jù)系統(tǒng)收集處理,終得到色譜圖,與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對比,通過保留時間進(jìn)行定性分析,也可通過計算色譜峰面積和峰高等進(jìn)行定量分析。
HPLC分析技術(shù)的操作條件有:室溫;高壓(液體粘度大,峰展寬?。?。
HPLC分析技術(shù)的分析對象:
·溶解后能制成溶液的樣品;
·不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制;
·相對分子質(zhì)量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差及高分子和離子型樣品均可檢測;
·用途廣泛,占有機(jī)物的80%。
HPLC分析技術(shù):
·流動相與組分間有親合作用力,為提高柱的選擇性、改善分離度增加了因素,對分離起很大作用;
·流動相種類較多,選擇余地廣;
·流動相極性和pH值的選擇也對分離起到重要作用。