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  • 使用Victor NIVO多模式檢測(cè)已進(jìn)行快速Ca2+信號(hào)檢測(cè)

    G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)參與許多細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。目前,超過(guò)45%的藥物都以GPCR為靶點(diǎn)。確定GPCR細(xì)胞活性,可以通過(guò)監(jiān)測(cè)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的變化來(lái)實(shí)現(xiàn)。Ca2+直接或間接調(diào)節(jié)包括基因表達(dá)、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和收縮在內(nèi)的許多生理過(guò)程。諸如蛋白激酶C(PKC)、轉(zhuǎn)錄因子NFAT或鈣調(diào)磷酸酶等多種蛋白質(zhì)均受Ca2+濃度變化的調(diào)節(jié)。在此,我們介紹了使用VICTOR™Nivo多模式讀板儀以水母發(fā)光蛋白生物發(fā)光檢測(cè)方法,分析在GPCR刺激或抑制下的快速胞內(nèi)Ca2+信號(hào)?;瘜W(xué)發(fā)光法檢測(cè)原理是基于GPCR的激活引
  • 深入了解螢光素酶:從疑惑到掌握,一次說(shuō)清!

    細(xì)胞螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)受多種因素影響,例如載體狀態(tài),細(xì)胞狀態(tài),轉(zhuǎn)染量,轉(zhuǎn)染效率,裂解效率,加樣精度等等,因此實(shí)驗(yàn)中一般需要做3個(gè)或以上復(fù)孔,且最好采用雙螢光素酶報(bào)告基因,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度?,F(xiàn)將雙螢光素酶實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中常見(jiàn)的問(wèn)題匯總?cè)缦拢篞1:如何選擇載體?螢火蟲(chóng)螢光素酶一般選取pGL-3、pGL-4或pmirGLO的載體,也可自己構(gòu)建相應(yīng)的載體;海腎螢光素酶一般選取phRL-TK或pGL-4載體,建議不使用強(qiáng)啟動(dòng)子(如SV40,CMV),而選取中等強(qiáng)度的啟動(dòng)子Q2:檢測(cè)結(jié)果螢光值過(guò)低或無(wú)螢光
  • 探索白介素IL-18的無(wú)限可能:功能、挑戰(zhàn)與應(yīng)用

    IL-18的功能和挑戰(zhàn)免疫功能:IL-18作為一種IL-1家族的促炎細(xì)胞因子,和IL-12、IL-15一樣具有活化記憶樣NK細(xì)胞的功能。IL-18調(diào)節(jié)Th1和Th2細(xì)胞的反應(yīng),也作用于非極化T細(xì)胞、NK/NKT細(xì)胞、B細(xì)胞、DC和巨噬細(xì)胞,在IL-12存在的條件下產(chǎn)生IFN-γ。不含IL-12但含有IL-2的IL-18則可誘導(dǎo)CD4NKT細(xì)胞、NK細(xì)胞甚至已分化的Th1細(xì)胞產(chǎn)生Th2細(xì)胞因子。IL-18和IL-3還能誘導(dǎo)肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞產(chǎn)生IL-4和IL-13。除了免疫功能,IL-18還參
  • 高鹽病毒制備難題:如何高效去除宿主細(xì)胞核酸?

    核酸酶能夠有效去除各種形式的DNA和RNA,是去除宿主細(xì)胞核酸(HostCellDNA,HCD)的理想手段。但來(lái)自粘質(zhì)沙雷氏菌的全能核酸酶(如Pannarase、Benzonase等產(chǎn)品)最適Na+/K+鹽濃度在0-20mM,有效范圍在0-150mM。多應(yīng)用于中低鹽濃度的HCD去除。如果在病毒制備中遇到高鹽條件,怎么更好的去除宿主細(xì)胞核酸?在高鹽環(huán)境下,不僅可以抑制病毒載體聚集、提升產(chǎn)量。因此,在有的病毒制備工藝中,常采用高鹽方法進(jìn)行細(xì)胞裂解來(lái)代替凍融裂解,釋放的病毒載滴度上會(huì)有提升。另外,高鹽
  • 為什么胰酶替代物TrypLUS消化液是消化液?

    胰蛋白酶(EC3.4.21.4)是一種絲氨酸蛋白酶,酶解賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組胰蛋白酶是利用基因工程菌表達(dá)并采用層析色譜法純化獲得,其氨基酸序列與豬胰腺來(lái)源的陽(yáng)離子型胰蛋白酶一致,分子量為24kDa,最適pH為7.0-9.0。可以替代豬胰腺來(lái)源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過(guò)程中,例如:重組胰島素生產(chǎn)、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞發(fā)酵、蛋白質(zhì)的酶解、測(cè)序和各種組織的細(xì)胞分離等。目前市面上常用的細(xì)胞消化液包括非酶法的EDTA和酶法的Trypsin、TrypLUS&TrypLE消化液:EDTA屬于非酶法
  • IL-15獲批,當(dāng)心其促瘤風(fēng)險(xiǎn)

    2024年4月22日,ImmunityBio公司宣布,F(xiàn)DA已批準(zhǔn)Anktiva(N-803)聯(lián)合卡介苗(BCG),用于治療卡介苗不響應(yīng)的非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌(NMIBC)伴原位癌(CIS),伴或不伴乳頭狀瘤患者。但是除了抗腫瘤活性,很多研究顯示IL-15本身也有促進(jìn)腫瘤的活性。IL-15及其受體IL-15是一種多效細(xì)胞因子,最初被認(rèn)為是T細(xì)胞生長(zhǎng)因子,在體內(nèi)連接先天和適應(yīng)性免疫反應(yīng)。IL-15屬于四α-螺旋束細(xì)胞因子家族,由不同類型的細(xì)胞,如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、上
  • 逐典蛋白定制服務(wù),從設(shè)計(jì)到生產(chǎn),滿足您的所有需求!

    逐典生物科學(xué)家團(tuán)隊(duì)在細(xì)胞因子和酶領(lǐng)域深耕十多年,擁有強(qiáng)大的分子設(shè)計(jì)和工藝開(kāi)發(fā)能力,通過(guò)AI驅(qū)動(dòng)的分子設(shè)計(jì)平臺(tái)、高通量蛋白制備平臺(tái)以及專有的包涵體變復(fù)性平臺(tái)等,可以快速、低成本地為您提供一站式蛋白設(shè)計(jì)優(yōu)化、工藝開(kāi)發(fā)、放大生產(chǎn)、申請(qǐng)等服務(wù),您可從任何一點(diǎn)切入合作,給您多種服務(wù)模式的選擇。服務(wù)優(yōu)勢(shì)1,AI酶定向進(jìn)化平臺(tái)2,專有包涵體變復(fù)性技術(shù)3,蛋白親和力改造平臺(tái)4,超低內(nèi)毒素質(zhì)控體系5,豐富的酶及細(xì)胞因子項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)案例展示案例一:高活性IL-15pro開(kāi)發(fā)項(xiàng)目背景:野生型IL-15分子構(gòu)象不穩(wěn)定、活性
  • 重組胰蛋白酶在細(xì)胞分離中的應(yīng)用

    你是否對(duì)細(xì)胞分離感到好奇?想知道那些神奇的液體是如何將細(xì)胞從復(fù)雜的環(huán)境中分離出來(lái)的嗎?今天,就讓我們一起揭開(kāi)重組胰蛋白酶在細(xì)胞分離中的神秘面紗!這個(gè)看似普通的液體到底有何神奇之處呢?首先,我們要明白細(xì)胞分離的重要性。在細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中,我們經(jīng)常需要將細(xì)胞從復(fù)雜的生物組織中分離出來(lái),以便進(jìn)行更深入的研究。而重組胰蛋白酶消化液就是我們的得力助手,它能幫助我們輕松實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。那么,組胰蛋白酶消化液是如何工作的呢?簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),它就像一把神奇的鑰匙,能夠打開(kāi)細(xì)胞間的連接,使細(xì)胞從組織中“脫落
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