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重組人Flt3配體屬于Ⅲ型受體酪氨酸激酶家族成員。該家族的成員還包括c-KIT受體、血小板源生長(zhǎng)因子受體和c-FMS受體等,該家族各成員的基因間具有較高的同源性。FLTS含有5個(gè)免疫球蛋白楊結(jié)構(gòu)組成的胞外配體結(jié)合區(qū),1個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,1個(gè)胞內(nèi)近膜結(jié)構(gòu)域,2個(gè)被插入結(jié)構(gòu)域分開(kāi)的激酶結(jié)構(gòu)域和一個(gè)C端-結(jié)構(gòu)域。
重組人Flt3配體在肝臟、脾臟、淋巴、腦、胎盤等組織中均有表達(dá),在造血干細(xì)胞、前提B細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞的增殖、分化和凋亡中起重要作用。另外,研究發(fā)現(xiàn)急性髓系白血病的發(fā)病往往伴隨著FLT3的異?;罨?,因此FLT3或可作為急性髓系白血病的潛在治療靶點(diǎn)。本品為重組蛋白(FC標(biāo)簽可以通過(guò)腸激酶切除),可用于單克隆抗體篩選或抗體功能驗(yàn)證。
通過(guò)重組人Flt3配體基因,建立其原核高效表達(dá)系統(tǒng),為大規(guī)模獲得rhFL產(chǎn)品,促進(jìn)干細(xì)胞體外擴(kuò)增移植等新技術(shù)在臨床的應(yīng)用創(chuàng)造條件.分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞,提取總RNA,采用RT巢式PCR擴(kuò)增可溶型FL基因,以雙脫氧終止法進(jìn)行DNA序列分析;將目的基因與pProEXHT載體連接,重組體引入大腸桿菌并在IPTG誘導(dǎo)下表達(dá);親和層析純化表達(dá)產(chǎn)物,觀察其刺激CD34+細(xì)胞增殖的情況.從人外周血單核細(xì)胞中克隆得到長(zhǎng)481bp的rhFL基因,測(cè)序結(jié)果與已知人FL基因序列一致。